HiMedia M909F-500G Модифицированная пептонная вода Андраде

Питательная микробиологическая среда HiMedia M909F-500G Модифицированная пептонная вода Андраде — порошковый препарат массой 500 г. Среда предназначена для исследований ферментации углеводов и дифференциации представителей семейства Enterobacteriaceae; хранение среды требуется при температуре ниже 30 °C, а приготовленной среды — при 2–8 °C.

Назначение

Модифицированная пептонная вода Андраде применяется для изучения ферментации углеводов, дифференциации и идентификации бактерий, преимущественно представителей семейства Enterobacteriaceae. В состав пептона не входят ферментируемые углеводы и нитраты, способные влиять на образование газа.

Среда подготовлена в соответствии с FDA BAM, 1998, для исследований ферментации углеводов. Окончательная биохимическая идентификация бактерий требует проведения дополнительных биохимических тестов.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Принцип действия и интерпретация результатов

Бактерии различаются по способности метаболизировать углеводы и родственные соединения. Реакции ферментации углеводов используются для дифференциации и идентификации различных бактерий.

В среду добавляют выбранный углевод, после чего среду инокулируют исследуемым микроорганизмом. Если исследуемый микроорганизм метаболизирует добавленный углевод, образуются кислоты, снижающие pH среды. Последующее изменение окраски индикатора происходит от бесцветной к розовой, а затем к красной. Если добавленный углевод не метаболизируется, среда сохраняет окраску от светло-коричневой до соломенно-жёлтой.

Газ, образующийся при ферментации, собирается в перевёрнутой трубке Дюрхема. Мясной экстракт служит дополнительным источником питательных веществ.

Индикатор Андраде представляет собой раствор кислотного фуксина. В щелочной среде индикатор изменяет окраску от розовой к жёлтой, а в кислой — от жёлтой к розовой. В горячем состоянии среда имеет розовую окраску, которая при охлаждении изменяется на соломенно-жёлтую.

Идентификацию микроорганизмов, способных расти в среде, проводят по результатам ферментации различных сахаров. Для анализа используют свежие культуры микроорганизмов, предварительно предположительно идентифицированных по окраске по Граму и морфологии колоний.

Методика приготовления и проведения анализа

1. Суспендируйте 23,02 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости нагревайте до полного растворения среды.
3. Разлейте среду в пробирки, содержащие перевёрнутые трубки Дюрхема.
4. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин. Давление при стерилизации — 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует примерно 0,10 МПа.
5. Охладите среду до комнатной температуры.
6. Асептически добавьте стерильный маточный раствор углевода до конечной концентрации 0,5–1,0 % (м/об.).
7. Тестируемые растворы углеводов стерилизуйте отдельно и добавляйте асептически в стерильную среду.
8. Инокулируйте подготовленную среду исследуемым микроорганизмом.
9. Оцените ферментацию по изменению окраски среды и образованию газа в трубке Дюрхема.
10. Для окончательной идентификации бактерий проведите необходимые биохимические тесты.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета с розоватым оттенком.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор от светло-розового до соломенно-жёлтого цвета без осадка.

Реакция среды

Реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 2,03 %, измеренная при 25 °C: pH 7,2 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M909F-500G
• Назначение изделия: питательная среда
• Физическая форма: порошок
• Масса: 500 г
• Происхождение: животное
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Температура: 10–30 °C

Хранение и срок годности

• Сухая среда: хранить при температуре ниже 30 °C в плотно закрытой таре.
• Приготовленная среда: хранить при температуре 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Техническое отличие методики

В отличие от определения ферментации углеводов непосредственно на готовой среде с фиксированным составом углевода, для модифицированной пептонной воды Андраде стерильный маточный раствор выбранного углевода добавляют отдельно до конечной концентрации 0,5–1,0 % (м/об.), что позволяет исследовать разные углеводы на одной базовой среде.