HiMedia M887I-500G Модифицированный агар с активированным углем, цефоперазоном и дезоксихолатом

Микробиологическая питательная среда HiMedia M887I-500G Модифицированный агар с активированным углем, цефоперазоном и дезоксихолатом производства HiMedia предназначена для селективного обнаружения и количественного определения видов Campylobacter в пищевой продукции. Среда применяется при анализе образцов пищевых продуктов и воды; для подтверждения результатов требуются дополнительные биохимические и серологические тесты.

Назначение

Среда рекомендована для селективного обнаружения и количественного определения видов Campylobacter в пищевой цепи. Состав и критерии эффективности соответствуют требованиям ISO 10272-1:2017, ISO 10272-2:2017, ISO 17995:2019 и ISO 11133:2014 (E) / Amd.: 2020.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Спецификация агара mCCD по ISO 10272-1, ISO 10272-2 и ISO 17995:2019 (E)

Агар mCCD M8871

Эквивалент мясного экстракта.

Эквивалент ферментативного переваривания тканей животного происхождения.

Эквивалент ферментативного переваривания казеина.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 22,74 г порошка — эквивалентную массу обезвоженной среды на 1 л — в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,103 МПа), при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое 1 флакона селективной добавки CCDA (FD135).
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Campylobacter обитают в кишечном тракте животных и поэтому могут загрязнять пищевые продукты животного происхождения. Campylobacter вызывают кишечные расстройства или аборты у животных и относятся к числу наиболее значимых причин гастроэнтерита у человека, особенно у детей.

Первоначально для выделения Campylobacter использовали кровь. Позднее было установлено, что кровь может быть эффективно заменена активированным углем, что устраняет вариабельность результатов, связанную с использованием крови. Основа модифицированного агара с активированным углем, цефоперазоном и дезоксихолатом сформулирована в соответствии с рекомендациями APHA и рекомендована комитетом ISO для обнаружения и количественного определения Campylobacter spp. в пищевых и экологических образцах на предприятиях пищевой промышленности.

В исходной рецептуре цефалотин заменён цефоперазоном как селективным агентом, поскольку цефоперазон обеспечивает более высокую селективность. Виды Campylobacter обладают высокой устойчивостью к цефоперазону, который эффективно подавляет рост Pseudomonas и представителей семейства Enterobacteriaceae. Добавление цефоперазона повышает селективность среды; поэтому среда также известна как дифференциальный агар с активированным углём для Campylobacter (CCDA).

Активированный уголь, пируват натрия и сульфат железа снижают аэротолерантность среды за счёт поглощения фотохимически образующихся токсичных производных кислорода. Пептон, триптон и экстракт HM служат источниками углерода, азота, аминокислот с длинной цепью и необходимых питательных веществ. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс. Дополнительный амфотерицин B подавляет рост дрожжей и плесневых грибов-контаминантов.

Образцы

Тип образца:

• пищевые продукты;
• вода.

Подготовка и обработка образцов

Селективное обогащение A

Для приготовления исходной суспензии смешайте 10 г или 10 мл исследуемой порции с 90 мл обогатительной среды — бульона Болтона (M1592). Метод применяется для приготовленных и замороженных пищевых продуктов.

Инкубируйте исходную суспензию в микроаэрофильной атмосфере:

• при 37 °C в течение 4–6 ч;
• затем при 41,5 °C в течение 44 ч ± 4 ч.

Селективное обогащение B

Для приготовления исходной суспензии смешайте 10 г или 10 мл исследуемой порции с 90 мл обогатительной среды — бульона Престона (M8991). Метод применяется для сырого мяса или сырого молока.

Инкубируйте исходную суспензию в микроаэрофильной атмосфере при 41,5 °C в течение 24 ч ± 2 ч.

Высев на плотную среду

Используя культуру, полученную в обогатительной среде, выполните посев на поверхность агара mCCD стерильной петлёй объёмом 10 мкл.

Инкубируйте чашки при 41,5 °C в микроаэрофильной атмосфере в течение 44 ч ± 4 ч.

Селективное обогащение C

Выполните прямой мазок или штриховой посев на агар mCCD из слепых или фекальных образцов с помощью петли или стерильного тампона. Использование второй среды в этой процедуре необязательно.

Инкубируйте чашки при 41,5 °C в микроаэрофильной атмосфере в течение 44 ч ± 4 ч.

Подтверждение

Для подтверждения проводят биохимические и серолог