HiMedia M887F-500G Бескровный селективный агар для Campylobacter

Питательная среда HiMedia M887F-500G Бескровный селективный агар для Campylobacter — порошковая основа с дрожжевым экстрактом для селективного выделения и дифференциации видов Campylobacter. Среда применяется при микробиологическом анализе пищевых и клинических образцов, требует добавления восстановленного содержимого флакона CCDA Supplement FD135F и инкубации при 37–42 °C.

Назначение

Бескровный селективный агар для Campylobacter с дрожжевым экстрактом применяется для селективного выделения и дифференциации видов Campylobacter в соответствии с протоколом FDA BAM 1998.

Состав

Расчётный состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия рабочим параметрам.

Мясной экстракт B# эквивалентен экстракту говядины.

Методика приготовления

1. Взвесьте 47,5 г сухой среды и суспендируйте в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа; ≈1,03 бар) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое 1 флакона добавки CCDA Supplement FD135F.
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Campylobacter — микроаэрофильные очень мелкие изогнутые тонкие грамотрицательные палочки размером 1,5–5 мкм, обладающие винтообразной подвижностью. Бактерии вызывают от лёгкой до тяжёлой диареи; жидкий водянистый стул часто сменяется кровавой диареей. Инфекция, вызываемая Campylobacter, называется кампилобактериозом.

Campylobacter обитают в кишечном тракте различных диких и домашних животных, особенно птиц, и часто загрязняют пищевые продукты животного происхождения.

Изначально для выделения Campylobacter использовали кровь. Позднее было показано, что уголь может эффективно заменять кровь. Виды Campylobacter обладают высокой устойчивостью к цефоперазону — антибиотику, эффективно подавляющему рост Pseudomonas и представителей семейства Enterobacteriaceae. Добавление цефоперазона повышает селективность среды. По этой причине среда также известна как дифференциальный агар с углём для Campylobacter — CCDA.

Уголь, пируват натрия и сульфат железа снижают аэротолерантность среды за счёт связывания токсичных производных кислорода, образующихся фотохимическим путём. Пептон, гидролизат казеина и мясной экстракт B служат источниками необходимых питательных веществ и аминокислот. Казеин добавляют для обеспечения роста некоторых термофильных видов Campylobacter, устойчивых к налидиксовой кислоте и встречающихся в окружающей среде.

Дополнительный амфотерицин B в основе бульона для бескровного выделения Campylobacter подавляет рост дрожжей и плесневых грибов-загрязнителей. При первичном выделении из клинических образцов колонии могут проявлять роение.

Пробоподготовка и выделение

Согласно протоколу BAM, при необходимости образцы предварительно обогащают в подходящих средах в микроаэробных условиях в течение установленного времени при 37 °C. Полученные обогащённые культуры используют для выделения, идентификации и подтверждения.

Для выделения соответствующим образом разведённые образцы инокулируют на одну из следующих сред:

• основу агара с сердечно-мозговым экстрактом и дрожжевым экстрактом — Heart Infusion Yeast Extract Agar Base M169F с добавкой FD294 и/или FD009;
• бескровную селективную агаровую основу для Campylobacter с дрожжевым экстрактом — Blood Free Campylobacter Selectivity Agar Base, w/ yeast extract M887F с добавкой FD135F.

Чашки инкубируют при 37–42 °C в анаэробных условиях, защищая от света.

Колонии Campylobacter на агаре имеют округлую или неправильную форму с гладкими краями. Рост может выглядеть как плотный полупрозрачный белый слой либо как распространяющийся прозрачный плёнчатый рост. Для окончательного подтверждения проводят микроскопическое исследование и биохимические тесты.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от серого до чёрного цвета.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется чёрный непрозрачный гель.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления CCDA Supplement FD135F и инкубации при 42 °C в течение 24–48 ч.

Условия хранения и срок годности

• Условия хранения сухой среды: ниже 30 °C, в плотно закрытой ёмкости.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок применения: до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Назначение изделия: питательная среда
• Форма выпуска: порошок
• Масса: 500 г
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: HDPE
• Происхождение: животное
• Температура хранения сухой среды: ниже 30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Конечный pH среды при 25 °C: 7,4 ± 0,2

Техническое отличие от кровяных сред

В составе среды кровь заменена бактериологическим углём; селективность обеспечивается добавлением цефоперазона в составе CCDA Supplement FD135F, а приготовленная среда формирует чёрный непрозрачный агаровый гель.