HiMedia M880F-500G Модифицированная среда Раппапорта-Вассилиадиса

Порошковая питательная среда HiMedia M880F-500G Модифицированная среда Раппапорта—Вассилиадиса с эквивалентной массой обезвоженной среды 33,37 г/л. Предназначена для селективного обогащения Salmonella из пищевых образцов; хранится при температуре ниже 30 °C, приготовленная среда — при 2–8 °C.

Назначение и область применения

Модифицированная среда Раппапорта—Вассилиадиса применяется для селективного обогащения Salmonella из пищевых образцов. Методика предусматривает последующий пересев на селективные агары XLD или HE с инкубацией и оценкой характерных колоний.

Среда представляет собой модификацию состава, разработанного Van Schothorst и соавторами. Применение для селективного обогащения Salmonella из пищевых образцов рекомендовано методикой FDA BAM, 1998.

Salmonella обычно сохраняет жизнеспособность при несколько повышенном осмотическом давлении, растёт при несколько пониженном pH и обладает большей устойчивостью к малахитовому зелёному по сравнению с другими бактериями. Salmonella относится к наиболее таксономически сложной группе бактерий семейства Enterobacteriaceae. Инфекции человека, вызываемые Salmonella, чаще всего связаны с употреблением пищевых продуктов, воды или молока, загрязнённых выделениями человека или животных; источником пищевых сальмонеллёзов также могут быть загрязнённые яйца и продукты, содержащие яйца.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных эксплуатационных параметров.

Принцип действия и интерпретация

Триптон обеспечивает среду необходимыми питательными веществами для роста. Хлорид магния повышает осмотическое давление среды. Малахитовый зелёный подавляет рост организмов, отличных от Salmonella. Пониженный pH в сочетании с малахитовым зелёным и хлоридом магния обеспечивает селекцию высокоустойчивых видов Salmonella. Фосфат калия выполняет буферную функцию и поддерживает постоянный pH. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс.

Методика приготовления

1. Взвесьте 33,37 г сухой среды — количество, эквивалентное массе обезвоженной среды на 1 л.
2. Суспендируйте навеску в 1000 мл дистиллированной воды.
3. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
4. Разлейте приготовленную среду в пробирки в необходимом объёме.
5. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 10 фунтов/кв. дюйм, что соответствует примерно 0,069 МПа, при 115 °C в течение 15 мин.

Методика проведения анализа

1. Внесите образцы в соответствующие обогащающие среды.
2. Инкубируйте в течение 24 ± 2 ч при 35 °C.
3. Перенесите 0,1 мл смеси в 10 мл модифицированной среды Раппапорта—Вассилиадиса M880F.
4. Одновременно перенесите 1 мл смеси в 10 мл тетратионатного бульона (TT) M880F.
5. Обработайте пробирки на вихревом смесителе.
6. Инкубируйте при оптимальной температуре в течение 24 ± 2 ч; температура и продолжительность зависят от микробной нагрузки и типа образца.
7. Выполните пересев на агар XLD или агар HE.
8. Инкубируйте чашки в течение 24 ± 2 ч при 35 °C.
9. Оцените появление типичных колоний Salmonella: на агаре XLD формируются сине-зелёные или синие колонии, на агаре HE — розовые колонии с чёрным центром или без него.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или светло-голубой однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Раствор голубовато-зелёного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий, с небольшим количеством осадка.

Реакция среды

Реакция 3,34 % масс./об. водного раствора при 25 °C: pH 5,5 ± 0,2.

Значение pH

Диапазон pH: 5,30–5,70.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 42–43 °C в течение 18–24 ч. После инкубации выполняют пересев на селективные агаризованные среды, такие как агар МакКонки M081 или агар XLD M031, и инкубируют при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M880F-500G
• Назначение изделия: питательная среда
• Физическая форма: порошок
• Масса: 500 г
• Происхождение: животное
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Эквивалентная масса обезвоженной среды: 33,37 г/л
• Конечный pH при 25 °C: 5,5 ± 0,2
• Диапазон pH: 5,30–5,70
• Температура хранения сухой среды: ниже 30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке

Источники состава и методики

• Van Schothorst M., Renauld A. and VanBeek C., 1987, Food Microbiol., 4: 11.
• Van Schothorst M. and Renauld A., 1983, J. Appl. Bact., 54:209.
• Peterz M., Wiberg C. and Norberg P., 1989, J. Appl. Bact., 66:523.