HiMedia M880F-500G Модифицированная среда Раппапорта-Вассилиадиса

Селективная модифицированная среда Раппапорта-Вассилиадиса HiMedia M880F-500G для обогащения культур Salmonella из пищевых продуктов. Применяется для подавления сопутствующей микрофлоры за счёт высокого осмотического давления и действия малахитового зелёного; вес упаковки 500 г.

Принцип действия

Модифицированная среда Раппапорта-Вассилиадиса (Rappaport Vassiliadis Medium, Modified) разработана для селективного обогащения Salmonellae из проб пищевых продуктов в соответствии с методиками FDA BAM (1998).

Механизм селективности основан на следующих факторах:

• Малахитовый зелёный: подавляет рост большинства бактерий, кроме видов Salmonella.
• Хлорид магния: повышает осмотическое давление среды, к которому Salmonella более устойчивы, чем другие представители семейства Enterobacteriaceae.
• Низкий уровень pH: в сочетании с малахитовым зелёным и хлоридом магния обеспечивает высокую селективность в пользу резистентных видов Salmonella.
• Триптон: служит источником основных питательных веществ для роста.
• Фосфат калия: выполняет роль буфера для поддержания постоянного значения pH.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс.

Методика проведения анализа

1. Подготовка проб: образцы инокулируют в соответствующие среды для предварительного обогащения и инкубируют при 35 °C в течение 24 ± 2 ч.
2. Пересев: 0,1 мл смеси переносят в 10 мл модифицированной среды Раппапорта-Вассилиадиса (M880F), а также 1 мл — в 10 мл тетратионатного бульона (TT).
3. Инкубация: пробы перемешивают на вортексе и инкубируют при оптимальной температуре в течение 24 ± 2 ч (время зависит от типа пробы и микробной нагрузки).
4. Посев на плотные среды: проводят пересев на агар XLD или агар HE. Пластины инкубируют при 35 °C в течение 24 ± 2 ч.
5. Интерпретация результатов:
   • На агаре XLD: появление типичных колоний Salmonella сине-зелёного или синего цвета.
   • На агаре HE: появление розовых колоний с чёрным центром или без него.

Приготовление и стерилизация

1. Растворить 33,37 г сухой среды (эквивалент веса на 1 литр) в 1000 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости нагреть до полного растворения компонентов.
3. Разлить по пробиркам в нужном объёме.
4. Стерилизовать в автоклаве при температуре 115 °C (давление ≈0,07 МПа) в течение 15 минут.

Технические характеристики

Состав (на 1110 мл)

Физико-химические свойства

• Внешний вид: светло-жёлтый или светло-голубой гомогенный свободнотекучий порошок.
• Цвет и прозрачность готовой среды: голубовато-зелёный, прозрачный или слегка опалесцирующий раствор с небольшим осадком.
• Реакция 3,34% (масса/объём) водного раствора при 25 °C: pH 5,5 ± 0,2.
• Диапазон pH: 5,30–5,70.

Дополнительные параметры

Культуральные характеристики

Характеристики определены после инкубации при 42 ± 1 °C в течение 18–24 ч. После инкубации проводится пересев на селективные среды, такие как агар МакКонки (M081) или агар XLD (M031), с последующей инкубацией при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: ниже 30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Срок годности: до даты, указанной на этикетке.