Среда Хью-Лейфсона с глюкозой HiMedia M871-500G (уп/500 гр)

Дифференциальная питательная среда Среда Хью-Лейфсона с глюкозой HiMedia M871-500G (уп/500 гр) производства HiMedia предназначена для определения ферментации глюкозы в анаэробных условиях. Среда используется для дифференциации стафилококков и микрококков по характеру образования кислоты в аэробной и анаэробной среде.

Назначение

Среда рекомендована для дифференциации стафилококков и микрококков на основании их способности ферментировать глюкозу в анаэробных условиях.

Области применения:

• идентификация патогенных и галофильных микроорганизмов;
• исследование аэробного и анаэробного расщепления глюкозы стафилококками и микрококками;
• анализ клинических, пищевых и молочных образцов.

Состав

Состав скорректирован и стандартизирован для обеспечения заданных рабочих параметров.

Методика приготовления

1. Взвесьте 45,52 г сухой среды и суспендируйте в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Разлейте среду в пробирки попарно для проведения аэробной и анаэробной ферментации.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите среду в пробирках, установленных в вертикальном положении.

Принцип действия и интерпретация

Среда Хью-Лейфсона с глюкозой разработана Hugh и Leifson и предназначена для дифференциации стафилококков и микрококков. Методика приготовления среды описана в руководстве FDA для дифференциации стафилококков и микрококков. Ферментативный и окислительный метаболизм углеводов имеет таксономическое значение и может использоваться для дифференциации ряда бактерий.

Микроорганизмы используют углеводы двумя основными способами:

• ферментация;
• окисление.

Среда содержит высокую концентрацию углеводов и низкую концентрацию пептона. Такое соотношение снижает вероятность использования аэробным микроорганизмом пептона с образованием щелочной реакции, которая могла бы нейтрализовать слабую кислотность, образуемую окислительным микроорганизмом.

Концентрация агара обеспечивает возможность определения подвижности микроорганизмов и способствует распределению по пробирке кислоты, образуемой на поверхности среды.

Высокая концентрация соли позволяет использовать среду для идентификации патогенных и галофильных микроорганизмов, а также для исследования аэробного и анаэробного расщепления глюкозы стафилококками и микрококками.

Образование кислоты определяют по изменению цвета среды с пурпурного на жёлтый по всей высоте пробирки.

Типы исследуемых образцов

• Клинические образцы: мазки из ротовой полости, слизистых оболочек, ротоглотки и верхних дыхательных путей.
• Пищевые и молочные образцы.

Подготовка образцов и проведение анализа

1. Инокулируйте пробирки для аэробной и анаэробной ферментации исследуемой культурой.
2. Вносите культуру в две пробирки с помощью длинной бактериологической петли методом прокола по всей длине среды.
3. Поверхность агара в одной пробирке из пары покройте слоем стерильного жидкого парафинового масла толщиной около 25 мм. Вторая пробирка остаётся незапечатанной.
4. Инкубируйте пробирки при 37 °C.
5. Интерпретируйте появление жёлтой окраски как образование кислоты при ферментации глюкозы.

Для стерилизации жидкого парафина используйте сухой способ при 160–170 °C в течение 2 ч. Влажная стерилизация под высоким давлением для этой цели недостаточна.

Интерпретация результатов

• Окислительные микроорганизмы образуют кислоту в незапечатанной пробирке; при этом рост слабый или отсутствует. В запечатанной пробирке образование кислоты отсутствует.
• Ферментирующие микроорганизмы образуют кислоту как в запечатанной парафином, так и в незапечатанной пробирке.
• Стафилококки образуют кислоту в результате ферментации по всей глубине среды как в анаэробной пробирке, запечатанной парафином, так и в аэробной незапечатанной пробирке.
• Микрококки либо не образуют кислоту ни в одной из пробирок, либо образуют её только в результате окисления в верхней части аэробной пробирки.

Технические характеристики

• Тип питательной среды: дифференциальная
• Назначение изделия: среда
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или голубовато-серый однородный сыпучий порошок без комков.

Гелеобразование

Полутвёрдый гель, сопоставимый с 0,3%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В пробирках в виде столбиков образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель пурпурного цвета.

Реакция среды

Реакция 4,55 % масс./об. водного раствора при 25 °C.

• pH: 7,4 ± 0,2

Диапазон pH

pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения сухого продукта: в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения приготовленной среды: 15–30 °C.
• Срок применения: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрыв флакон, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Ограничения применения

Влажная стерилизация под высоким давлением недостаточна для стерилизации жидкого парафина, используемого при постановке анализа.

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке и в пределах установленного срока годности при хранении при рекомендованной температуре.

Меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед вскрытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила работы в микробиологической лаборатории.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методами и установленными процедурами обращения с инфекционными материалами.