Среда Хью-Лейфсона с глюкозой HiMedia M871-500G (уп/500 гр)

Дифференциальная питательная среда Хью-Лейфсона с глюкозой HiMedia M871-500G (уп/500 г) для разделения стафилококков и микрококков. Применяется для определения способности микроорганизмов к анаэробной ферментации глюкозы; содержит высокую концентрацию соли для идентификации патогенных и галофильных организмов.

Принцип измерения

Среда основана на методе Хью и Лейфсона и предназначена для дифференциации бактерий по типу метаболизма углеводов: окислению или ферментации. Высокое содержание углеводов при низкой концентрации пептона предотвращает возможность использования пептона аэробными организмами, что могло бы привести к защелачиванию среды и нейтрализации слабой кислотности, создаваемой окислительными организмами.

Добавление агара в низкой концентрации позволяет определять подвижность микроорганизмов и способствует равномерному распределению кислоты по всей длине пробирки. Высокая концентрация соли делает среду подходящей для работы с галофильными и патогенными штаммами.

Область применения

Среда используется для анализа следующих типов образцов:

• Клинические материалы: мазки из полости рта, слизистых оболочек, ротоглотки и верхних дыхательных путей.
• Пищевые и молочные продукты.

Методика проведения анализа

1. Приготовление среды: суспендируйте 45,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
2. Розлив: разлейте среду в пробирки в двух экземплярах (для аэробной и анаэробной ферментации).
3. Стерилизация: стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут. Охладите пробирки в вертикальном положении.
4. Посев: внесите исследиемую культуру в две пробирки, произведя глубокий укол (посевом «на прокол») по всей длине среды с помощью длинной проволочной петли.
5. Создание анаэробных условий: поверхность агара в одной из двух пробирок залейте слоем стерильного жидкого парафина толщиной около 25 мм. Примечание: жидкий парафин должен быть подвергнут сухой стерилизации при 160–170 °C в течение 2 часов; влажная стерилизация под давлением недостаточна.
6. Инкубация: инкубируйте пробирки при температуре 37 °C.

Интерпретация результатов

Положительным результатом считается изменение цвета среды с пурпурного на жёлтый по всему объёму (образование кислоты).

• Стафилококки: вырабатывают кислоту путём ферментации во всей глубине среды как в анаэробной пробирке (с парафином), так и в аэробной (без парафина).
• Микрококки: либо не вырабатывают кислоту вовсе, либо производят её только путём окисления в верхней части аэробной пробирки.
• Окислительные организмы: производят кислоту в открытой пробирке (при слабом или отсутствии роста), но не создают её в герметичной пробирке.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Дополнительные параметры:

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от светло-жёлтого до сине-серого цвета.
• Желирование: полутвердый гель, сопоставимый с 0,3 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность готовой среды: пурпурный цвет, прозрачный или слегка опалесцирующий гель в форме столбика в пробирке.
• Реакция: pH 7,4 $\pm$ 0,2 для 4,55 % (масса/объём) водного раствора при 25 °C.
• Диапазон pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, защищённом от перепадов температур и источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре 15–30 °C.
• Особенности: из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание комкования.
• Утилизация: отработанные среды и материалы, контактировавшие с клиническими образцами, подлежат деконтаминации и утилизации путём автоклавирования и/или инсинерации согласно лабораторным протоколам.

Меры предосторожности

• Только для профессионального использования в целях диагностики in vitro.
• При работе использовать защитные перчатки, спецодежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности при работе с культурами и клиническими образцами.