HiMedia M871-100G Глюкозная среда Хью-Лейфсона

Питательная среда HiMedia M871-100G Глюкозная среда Хью-Лейфсона с конечным pH 7,4 ± 0,2. Среда предназначена для дифференциации стафилококков и микрококков по способности анаэробно ферментировать глюкозу и применяется для исследования клинических, пищевых и молочных образцов.

Назначение

Среда Хью-Лейфсона с глюкозой предназначена для:

• дифференциации стафилококков и микрококков по способности ферментировать глюкозу в анаэробных условиях;
• выявления различий между окислительным и ферментативным метаболизмом углеводов;
• исследования аэробного и анаэробного расщепления глюкозы стафилококками и микрококками;
• идентификации патогенных и галофильных микроорганизмов.

Препарат предназначен для диагностики in vitro и профессионального применения.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Среда Хью-Лейфсона с глюкозой разработана на основе метода Хью и Лейфсона. Метод применяется для дифференциации стафилококков и микрококков; рецептура среды также описана Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США для этой цели.

Микроорганизмы используют углеводы двумя основными способами: путём ферментации или окисления. Различия в характере утилизации углеводов могут использоваться для дифференциации бактерий.

Среда содержит:

• высокую концентрацию углеводов;
• низкую концентрацию пептона, чтобы предотвратить использование пептона аэробным микроорганизмом с образованием щелочной реакции, способной нейтрализовать слабую кислотность, образуемую окисляющим микроорганизмом;
• агар в концентрации, позволяющей определять подвижность микроорганизмов и способствующей распределению кислоты по всей толще среды от поверхности, где она образуется.

Высокая концентрация соли позволяет использовать среду для идентификации патогенных и галофильных микроорганизмов, а также для исследования аэробного и анаэробного расщепления глюкозы стафилококками и микрококками.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию из 45,52 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Разлейте среду в пробирки парами: одна пробирка предназначена для аэробной, вторая — для анаэробной ферментации.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов, что соответствует примерно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите среду в пробирках, установив их в вертикальное положение.

Типы исследуемых образцов

• Клинические образцы: мазки из полости рта, слизистых оболочек, ротоглотки и верхних дыхательных путей.
• Пищевые образцы.
• Молочные образцы.

Посев и проведение исследования

1. Засейте культуру, подлежащую исследованию, в две пробирки со средой методом прокалывания по всей длине среды длинной бактериологической петлёй.
2. Поверхность среды в одной пробирке из пары покройте слоем стерильного жидкого парафинового масла толщиной около 25 мм. Вторая пробирка остаётся незапечатанной для аэробной ферментации.
3. Инкубируйте обе пробирки при 37 °C.
4. Жёлтое окрашивание расценивайте как признак образования кислоты из глюкозы.

Для стерилизации жидкого парафинового масла используйте сухой метод при 160–170 °C в течение 2 ч. Влажная стерилизация под высоким давлением для этой цели недостаточна.

Интерпретация результатов

• Окисляющие микроорганизмы образуют кислоту в незапечатанной пробирке; при этом рост слабый или отсутствует, а в запечатанной пробирке кислота не образуется.
• Ферментирующие микроорганизмы образуют кислоту в обеих пробирках — запечатанной и незапечатанной.
• Образование кислоты выявляют по изменению окраски среды с пурпурной на жёлтую по всей толще.
• Стафилококки образуют кислоту в результате ферментации по всей глубине среды как в анаэробной пробирке, запечатанной парафином, так и в аэробной незапечатанной пробирке.
• Микрококки либо не образуют кислоту ни в одной из пробирок, либо образуют её только в результате окисления в верхней части аэробной пробирки.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или голубовато-серый однородный сыпучий порошок без комков.

Гелеобразование

Полутвёрдая среда, сопоставимая с 0,3%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В пробирках в виде столбиков формируется прозрачный или слегка опалесцирующий гель пурпурного цвета.

Реакция

Реакция 4,55 % (масса/объём) водного раствора при 25 °C: pH 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

Условия хранения и срок годности

• Храните продукт в плотно закрытой упаковке при температуре 10–30 °C.
• Приготовленную среду храните при температуре 15–30 °C.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте упаковку.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение указанного срока годности и при соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Меры предосторожности

• Перед вскрытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила микробиологической безопасности.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с действующими лабораторными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.
• Среда предназначена только для диагностики in vitro и профессионального использования.

Ограничения применения

Влажная стерилизация под высоким давлением недостаточна для стерилизации жидкого парафинового масла, используемого при постановке теста.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов среды автоклавированием и/или сжиганием.

Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методами обращения с инфекционными материалами.