HiMedia M871-100G Глюкозная среда Хью-Лейфсона

Глюкозная среда Хью-Лейфсона HiMedia M871-100G предназначена для дифференциации стафилококков (Staphylococci) от микрококков (Micrococci) на основе их способности к анаэробной ферментации глюкозы. Среда содержит высокую концентрацию углеводов и соли, что позволяет идентифицировать патогенные и галофильные организмы.

Принцип измерения

Среда основана на методе Хью и Лейфсона и используется для разделения бактерий по типу метаболизма углеводов: ферментативному (брожение) или окислительному.

Особенности состава:

• Высокая концентрация углеводов и низкое содержание пептона предотвращают возможность использования аэробными организмами пептона, что исключает образование щелочной среды, способной нейтрализовать слабую кислотность, создаваемую окислительными организмами.
• Концентрация агара позволяет определять подвижность микроорганизмов и способствует равномерному распределению кислоты по всей высоте пробирки.
• Высокое содержание соли делает среду пригодной для работы с галофильными и патогенными штаммами.

Область применения

Среда используется для анализа следующих типов образцов:

• Клинические образцы: мазки из полости рта, слизистых оболочек, ротоглотки и верхних дыхательных путей.
• Образцы пищевых продуктов и молочной продукции.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Суспендировать 45,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Разлить среду в пробирки в двух экземплярах (для аэробной и анаэробной ферментации).
4. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
5. Охладить пробирки в вертикальном положении.

Процедура и интерпретация

1. В две пробирки с одной и той же средой внести исследуемую культуру, используя длинную проволочную петлю (метод «посева в глубину» — stabbing).
2. Поверхность агара в одной из двух пробирок покрыть слоем стерильного жидкого парафина толщиной около 25 мм. Примечание: Пробирки с парафином должны быть подвергнуты сухой стерилизации при 160–170 °C в течение 2 часов; влажная стерилизация под давлением для этой цели недостаточна.
3. Инкубировать обе пробирки при 37 °C.
4. Оценить изменение цвета среды (индикатор — бромкрезоловый пурпурный): переход от пурпурного к жёлтому свидетельствует о производстве кислоты.

Интерпретация результатов:

• Стафилококки (Staphylococci): производят кислоту путем ферментации по всей глубине среды как в анаэробной пробирке (с парафином), так и в аэробной (без парафина).
• Микрококки (Micrococci): либо не производят кислоту вовсе, либо производят её только путем окисления в верхней части аэробной пробирки.
• Окислительные организмы: производят кислоту в открытой пробирке (при слабом росте или без него), но не производят её в закрытой (с парафином).

Технические характеристики

Состав, г/л:

Дополнительные параметры:

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от светло-жёлтого до сизо-серого цвета.
• Желирование: полутвердый гель, сопоставимый с 0,3 % раствором агара.
• Цвет и прозрачность готовой среды: пурпурный цвет, прозрачный или слегка опалесцирующий гель в форме столбика в пробирке.
• Реакция: pH 7,4 ± 0,2 для 4,55 % (масс./об.) водного раствора при 25 °C.
• Диапазон pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом помещении, защищенном от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре 15–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков.

Меры предосторожности и утилизация

• Только для профессионального использования в целях диагностики in vitro.
• При работе использовать средства индивидуальной защиты: перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности при работе с клиническими образцами.
• Утилизация: использованные или непригодные препараты подлежат безопасному удалению путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.