Питательная среда для изучения подвижности энтеробактерий продукции индола и лизиндекарбоксилазной активности HiMedia M847-500G (уп/500 гр) — сухая микробиологическая среда с четырьмя дифференциальными реакциями в одной пробирке. HiMedia M847-500G применяется для идентификации энтеробактерий по подвижности, декарбоксилированию и дезаминированию лизина, а также образованию индола; готовая среда хранится при 20–30 °C.

Назначение и область применения

HiMedia M847-500G предназначена для идентификации представителей семейства Enterobacteriaceae по подвижности, лизиндекарбоксилазной активности, лизиндезаминазной активности и продукции индола.

Среда применяется для работы с выделенными микроорганизмами из клинических и неклинических образцов, включая предварительную идентификацию представителей семейства Enterobacteriaceae в фекальных образцах.

Среду рекомендуется использовать совместно с трёхсахарным железным агаром TSI (M021) и мочевинным агаром (M112).

• Тип питательной среды: элективный
• Назначение изделия: среда
• Регистрационное обозначение: ФСЗ 2009/03705
• Форма выпуска: 500 г

Состав

Состав указан для приготовления 1 л среды:

Принцип действия и интерпретация

MIL-среда приготовлена по рецептуре Reller и Merrett и позволяет выявлять четыре дифференциальные реакции в одной культуральной пробирке: подвижность микроорганизма, продукцию индола, дезаминирование лизина и декарбоксилирование лизина.

Пептон, триптон и дрожжевой экстракт поставляют аминокислоты и другие сложные азотистые соединения. Декстроза служит источником энергии. Небольшое количество агара обеспечивает возможность выявления подвижности вдоль линии посева уколом:

• подвижные микроорганизмы растут за пределами линии посева;
• неподвижные микроорганизмы растут только вдоль линии посева.

Бромкрезоловый пурпурный используется как индикатор pH.

При посеве микроорганизма, ферментирующего декстрозу, образуются кислоты, снижающие pH и изменяющие цвет среды с пурпурного на жёлтый. Кислая реакция среды одновременно стимулирует активность ферментов-декарбоксилаз.

Микроорганизмы, обладающие специфической декарбоксилазой, разрушают соответствующую аминокислоту, содержащуюся в среде, с образованием амина. При декарбоксилировании лизина образуется кадаверин. Образование аминов повышает pH и вызывает возврат среды в нижней части пробирки к пурпурному цвету.

Среда в верхней части пробирки остаётся кислой из-за более высокого содержания кислорода. Если исследуемый микроорганизм не продуцирует необходимую декарбоксилазу, среда остаётся жёлтой, то есть кислой, по всему объёму либо сохраняет жёлтую окраску с пурпурной или красной реакцией в верхней части.

Дезаминирование лизина вызывает изменение цвета в верхней части среды. При окислительном дезаминировании лизина образуется соединение, которое реагирует с цитратом аммонийного железа с образованием бордово-красной или красно-коричневой окраски в верхнем сантиметре среды; нижняя часть среды остаётся кислой.

Реакцию дезаминирования можно выявить только при отсутствии продукции лизиндекарбоксилазы, что характерно для видов родов Proteus, Morganella и Providencia.

Индол образуется микроорганизмами, обладающими ферментом триптофаназой. Триптофаназа расщепляет триптофан, содержащийся в казеиновом пептоне, с образованием индола. Для выявления индола на поверхность агара добавляют реактив Ковача. Индол взаимодействует с п-диметиламинобензальдегидом реактива Ковача с образованием красного комплекса.

Культуры инокулируют уколом и инкубируют при 37 °C в течение 18–24 ч. Реакции подвижности, дезаминирования лизина и декарбоксилирования лизина считывают до проверки реакции на индол, поскольку добавление реактива Ковача вызывает изменение цвета среды на жёлтый. Поэтому положительная реакция лизиндекарбоксилазы может быть ошибочно интерпретирована как отрицательная.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 36,52 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Разлейте среду в пробирки порциями по 5 мл.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите пробирки до 45–50 °C в вертикальном положении.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Тип образца: выделенный микроорганизм из клинических и неклинических образцов.

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными методическими рекомендациями. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Proteus vulgaris — прежнее обозначение Proteus hauseri.

(#) Enterobacter aerogenes — прежнее обозначение Klebsiella aerogenes.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный свободно текучий порошок кремового или зеленовато-жёлтого цвета.

Гелеобразование

Полутвёрдая среда, сопоставимая с 0,2%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В пробирках в виде столбиков образуется прозрачный или слегка опалесцир