Питательная среда для изучения подвижности энтеробактерий продукции индола и лизиндекарбоксилазной активности HiMedia M847-500G (уп/500 гр)

Элективная питательная среда HiMedia M847-500G для изучения подвижности энтеробактерий, продукции индола и лизиндекарбоксилазной активности. Применяется для идентификации представителей семейства Enterobacteriaceae на основе анализа четырех дифференциальных реакций в одной пробирке; сертификат ФСЗ 2009/03705.

Принцип измерения

Среда MIL (Motility-Indole-Lysine) разработана по методике Реллера и Мерретта. Она позволяет одновременно определить четыре характеристики микроорганизма:

1. Подвижность: благодаря низкому содержанию агара (2 г/л) подвижные организмы распространяются от линии посева, в то время как неподвижные растут строго вдоль неё.
2. Ферментация глюкозы и лизиндекарбоксилация: при ферментации декстрозы (глюкозы) образуются кислоты, которые переводят индикатор бромкрезоловый пурпурный из пурпурного в жёлтый цвет. Кислая среда стимулирует активность фермента декарбоксилазы. Организмы, обладающие специфической декарбоксилазой лизина, расщепляют лизин с образованием кадаверина. Это приводит к повышению pH, и нижняя часть среды возвращается к пурпурному цвету. Если декарбоксилаза отсутствует, среда остается жёлтой по всей длине или жёлтой с пурпурным/красным оттенком у поверхности.
3. Лизиндезаминирование: окислительное дезаминирование лизина приводит к образованию соединения, которое реагирует с цитратом аммония-железа(III), окрашивая верхний сантиметр среды в бордово-красный или красно-коричневый цвет (при этом нижняя часть остается кислой). Данная реакция выявляется только при отсутствии лизиндекарбоксилазы (характерно для видов Proteus, Morganella и Providencia).
4. Продукция индола: организмы, обладающие ферментом триптофаназой, расщепляют триптофан (из казеинового пептона) до индола. Индол обнаруживается путем добавления реагента Ковакса на поверхность агара, что приводит к образованию красного комплекса.

Методика проведения анализа

1. Приготовление среды: суспендировать 36,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды. Нагреть до кипения для полного растворения.
2. Розлив: распределить по пробиркам по 5 мл.
3. Стерилизация: автоклавировать при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охлаждение: охлаждать пробирки в вертикальном положении до 45–50 °C.
5. Посев: произвести укольный посев изолированного микроорганизма.
6. Инкубация: инкубировать при 37 °C в течение 18–24 часов.
7. Оценка результатов: сначала оценить подвижность, дезаминирование и декарбоксилирование лизина, и только затем провести тест на индол.

Важное ограничение: тест на индол проводится в последнюю очередь, так как добавление реагента Ковакса вызывает изменение цвета среды на жёлтый, что может привести к ошибочной интерпретации положительной реакции декарбоксилазы как отрицательной.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры:

Контроль качества:

• Внешний вид: однородный свободно текучий порошок от кремового до зеленовато-жёлтого цвета.
• Желирование: полутвердый гель, сопоставимый с 0,2% агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: прозрачный или слегка опалесцирующий гель красно-пурпурного цвета.
• pH (водного раствора 3,65% при 25 °C): 6,40–6,80.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Область применения

Среда предназначена для работы с изолированными микроорганизмами из клинических и неклинических образцов. Рекомендуется использовать в сочетании с тройным сахарным железным агаром (TSI) |M021| и мочевинным агаром |M112| для предварительной идентификации представителей Enterobacteriaceae в фекальных пробах.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования.

Меры предосторожности и утилизация

• Только для диагностики in vitro и профессионального использования.
• При работе использовать защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица.
• Загрязненные материалы и использованные среды подлежат обязательной стерилизации в автоклаве или сжиганию перед утилизацией в соответствии с лабораторными протоколами работы с инфекционными материалами.