HiMedia M837-100G Триптозо-сульфит-циклосериновая среда (T.S.C.)

Питательная микробиологическая среда HiMedia M837-100G Триптозо-сульфит-циклосериновая среда (T.S.C.) — порошковая основа для предполагаемой идентификации и количественного определения Clostridium perfringens. Применяется для анализа клинических образцов и пищевых продуктов, при этом окончательная идентификация требует дополнительных биохимических и серологических исследований.

Назначение

Основа агара Перфрингенс с селективными добавками и обогащающими компонентами применяется для предполагаемой идентификации и количественного определения Clostridium perfringens.

Тип образца:

• Клинические образцы: кал, содержимое абсцессов.
• Образцы пищевых продуктов.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Пептон HM B эквивалентен мясному экстракту.

Принцип действия и интерпретация

Триптозо-сульфит-циклосериновый агар (TSC) первоначально разработан Harmon и соавторами для количественного определения Clostridium perfringens в пищевых продуктах. Среда TSC предназначена для количественного выделения Clostridium perfringens с подавлением роста других факультативных анаэробов.

Основа агара TSC с селективной добавкой FD014 и основа агара SFP с селективной добавкой FD013 сопоставимы по эффективности выделения Clostridium perfringens. Основа агара Перфрингенс также рекомендована APHA. Селективность среды обеспечивается:

• добавлением D-циклосерина FD014;
• либо добавлением канамицина и полимиксина B FD013.

Триптоза, соевый пептон, дрожжевой экстракт и пептон HM B обеспечивают азотистые соединения, углерод, серу, витамины группы B и микроэлементы, необходимые для роста клостридий.

Метабисульфит натрия и цитрат аммония и железа служат индикаторами восстановления сульфита; процесс сопровождается образованием колоний чёрного цвета.

D-циклосерин FD014, канамицин и полимиксин B FD013 обеспечивают селективное выделение Clostridium perfringens за счёт подавления сопутствующей микрофлоры.

Эмульсия яичного желтка служит источником лецитина, используемого Clostridium perfringens.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 23,5 г порошка в 475 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Добавьте 25 мл эмульсии яичного желтка FD045.
6. Добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки S.F.P. FD013 или селективной добавки T.S.C. FD014.
7. Если требуется флуорогенное обнаружение, вместо FD013 или FD014 добавьте восстановленное содержимое селективной добавки CMF FD243.
8. Тщательно перемешайте среду перед разливом в стерильные чашки Петри.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для пищевых образцов используйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с установленными руководствами.

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с утверждёнными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• При необходимости обращайтесь к паспортам безопасности отдельных веществ.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы имеют индивидуальные требования к росту и могут демонстрировать различные варианты роста на данной среде.
2. Для дальнейшей идентификации необходимо провести дополнительные биохимические и серологические исследования.
3. Каждая серия среды протестирована на микроорганизмы, указанные в сертификате анализа. Для любого конкретного микроорганизма, не указанного в сертификате анализа, пользователю рекомендуется самостоятельно валидировать среду с учётом специфических требований применения.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно сыпучий порошок от светло-жёлтого до коричневато-жёлтого цвета.

Гелеобразование

Прочный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Основная среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель янтарного цвета.
• После добавления эмульсии яичного желтка FD045: в чашках Петри образуется непрозрачный гель жёлтого цвета.

Реакция

Реакция 4,7%-ного водного раствора при 25 °C.

pH: 7,6 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,40–7,80.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют в анаэробных условиях с добавлением селективной добавки T.S.C. FD014, селективной добавки S.F.P. FD013 или селективной добавки CMF FD243 и эмульсии яичного желтка FD045 после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Paeniclostridium sordellii ранее был известен как Clostridium sordellii.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения сухого продукта: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжи