Среда Хью-Лейфсона HiMedia M826-500G (уп/500 гр)

Питательная диагностическая среда Среда Хью-Лейфсона HiMedia M826-500G (уп/500 гр) производства HiMedia для определения аэробного и анаэробного расщепления глюкозы. Среда применяется для дифференциации микроорганизмов по ферментативному и окислительному метаболизму углеводов, включая исследование изолированных культур при 37 °C.

Назначение

Среда Хью-Лейфсона предназначена для выявления аэробного и анаэробного расщепления глюкозы. Исследуемый материал — изолированный микроорганизм.

Среда используется для дифференциации некоторых бактерий по способу утилизации углеводов:

• ферментативные микроорганизмы образуют кислоту в герметичной и негерметичной пробирках;
• окислительные микроорганизмы образуют кислоту в негерметичной пробирке при небольшом росте или его отсутствии и не образуют кислоту в герметичной пробирке.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Среда Хью-Лейфсона разработана Hugh и Leifson для определения таксономической значимости ферментативного и окислительного метаболизма углеводов у грамотрицательных кишечных бактерий.

Микроорганизмы используют углеводы двумя способами:

• ферментация;
• окисление.

Это свойство может использоваться для дифференциации некоторых бактерий.

Особенности состава:

• высокая концентрация углевода и низкая концентрация пептона уменьшают вероятность того, что аэробный микроорганизм будет использовать пептон с образованием щелочной среды, нейтрализующей слабую кислотность, образованную окислительным микроорганизмом;
• дикалий фосфат стимулирует ферментацию и действует как буфер, регулирующий pH;
• концентрация агара позволяет определять подвижность микроорганизмов и способствует распределению по пробирке кислоты, образованной на поверхности среды;
• бромтимоловый синий используется как индикатор pH.

При образовании кислоты цвет среды изменяется с зеленовато-синего на жёлтый по всему объёму.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 19,35 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте при частом перемешивании.
3. Доведите до кипения для полного растворения среды.
4. Разлейте среду в пробирки в двух экземплярах для определения аэробной и анаэробной ферментации.
5. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин; давление при таком режиме составляет приблизительно 0,10 МПа (15 фунтов на кв. дюйм).
6. Охладите пробирки с приготовленной средой в вертикальном положении.

Методика инокуляции и проведения анализа

1. Инокулируйте пробирки для определения аэробной и анаэробной ферментации.
2. В одной из двух пробирок покройте поверхность агара слоем стерильного жидкого парафинового масла толщиной около 25 мм. Эта пробирка используется для создания анаэробных условий.
3. Инкубируйте пробирки при 37 °C.
4. Для стерилизации жидкого парафинового масла используйте сухожаровую стерилизацию при 160–170 °C в течение 2 ч. Влажная стерилизация под высоким давлением для этой цели недостаточна.
5. Интерпретируйте результат по росту и изменению цвета среды в герметичной и негерметичной пробирках:
   • окислительные микроорганизмы дают образование кислоты в негерметичной пробирке при небольшом росте или его отсутствии; в герметичной пробирке кислота не образуется;
   • ферментативные микроорганизмы дают образование кислоты в обеих пробирках;
   • образование кислоты определяется по изменению цвета среды с зеленовато-синего на жёлтый по всей пробирке.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно текучий порошок от светло-жёлтого до голубовато-зелёного цвета.

Гелеобразование

Полутвёрдый гель, сопоставимый с 0,2 % агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В пробирках в виде столбика образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель зелёно-синего цвета.

Реакция

Реакция 1,94 % масс./об. водного раствора при 25 °C: pH 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

# Ранее обозначался как Enterobacteraerogenes.

Хранение и срок годности

• Условия хранения сухой среды: от 10 до 30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Условия хранения приготовленной среды: от 15 до 30 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия плотно закройте флакон и храните продукт в сухом состоянии.
• Гигроскопичность продукта может привести к образованию комков при ненадлежащем хранении.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Меры предосторожности

• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила работы микробиологической лаборатории.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Для подтверждения результата необходимо выполнять дополнительные биохимические тесты в комплексе с исследованием на среде Хью-Лейфсона.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды ожидаются при использовании в соответствии с указаниями на этикетке, в течение срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованной или непригодной среды с помощью автоклавирования и/или сжигания.

Материалы, содержащие инфекционные компоненты, а также материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками и установленными процедурами обращения с инфекционными отходами.