Среда Хью-Лейфсона HiMedia M826-500G (уп/500 гр)

Диагностическая питательная среда Хью-Лейфсона HiMedia M826-500G (упаковка 500 г) для определения ферментации глюкозы в аэробных и анаэробных условиях. Применяется для дифференциации грамотрицательных кишечных бактерий на основе их способности к окислению или ферментации углеводов.

Принцип измерения

Среда Хью-Лейфсона разработана для разделения микроорганизмов по типу метаболизма углеводов: окислительному и ферментативному. Высокая концентрация углеводов при низком содержании пептона предотвращает ситуацию, когда аэробный организм использует пептон и создает щелочную среду, которая могла бы нейтрализовать слабую кислотность, создаваемую окислительным организмом.

Дигидрофосфат калия выступает в роли pH-контролирующего буфера и стимулирует ферментацию. Низкая концентрация агара позволяет определять подвижность микроорганизмов и способствует равномерному распределению кислоты по всей высоте пробирки. В качестве индикатора pH используется бромтимоловый синий.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Растворить 19,35 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревать при постоянном перемешивании до полного кипения для полного растворения компонентов.
3. Разлить среду в пробирки в двух экземплярах (для аэробного и анаэробного тестов).
4. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
5. Охладить пробирки в вертикальном положении.

Процедура и интерпретация

1. Внести изолированный микроорганизм в обе пробирки.
2. Поверхность агара в одной из пробирок (для анаэробного теста) покрыть слоем стерильного жидкого парафина толщиной около 25 мм.
3. Инкубировать при температуре 37 °C.
4. Оценка результатов:
   • Окислительные организмы: вырабатывают кислоту в открытой пробирке (при этом рост может быть слабым или отсутствовать), но не вырабатывают кислоту в закрытой (с парафином) пробирке.
   • Ферментативные организмы: вырабатывают кислоту в обеих пробирках (и в открытой, и в закрытой парафином).
   • Индикация: образование кислоты характеризуется изменением цвета среды с зеленовато-синего на жёлтый по всему объёму.

Примечание: пробирки с жидким парафином должны проходить сухую стерилизацию при 160–170 °C в течение 2 часов; влажная стерилизация под давлением для этой цели недостаточна.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Дополнительные параметры:

Контроль качества:

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от светло-жёлтого до сине-зелёного цвета.
• Желирование: полутвердый гель, сопоставимый с 0,2 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность готовой среды: зеленовато-синий, прозрачный или слегка опалесцирующий гель в форме столбика.
• Реакция: pH 6,8 $\pm$ 0,2 для 1,94 % (масса/объём) водного раствора при 25 °C.
• Диапазон pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 часов.

Область применения и ограничения

Среда используется для идентификации изолированных микроорганизмов. Для окончательного подтверждения результатов необходимо проведение других биохимических тестов в совокупности.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре 15–30 °C.
• Особенности: из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание комкования.

Меры безопасности и утилизация

При работе со средой и культурами следует использовать защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица, соблюдая правила микробиологической безопасности. Утилизация использованных или непригодных препаратов осуществляется путём автоклавирования и/или сжигания в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.

Дополнительная информация

• Сертификат: ФСЗ 2009/03705.
• Тип питательной среды: диагностическая.