HiMedia M826-100G Среда Хью-Лейфсона

Питательная микробиологическая среда HiMedia M826-100G Среда Хью-Лейфсона содержит 10,000 г/л декстрозы (глюкозы) и имеет конечный pH 6,8 ± 0,2. Среда предназначена для выявления аэробного и анаэробного расщепления глюкозы по изменению окраски в герметичной и негерметичной пробирках; температура хранения составляет 10–30 °C.

Назначение

Среда Хью-Лейфсона предназначена для выявления аэробного и анаэробного расщепления глюкозы изолированными микроорганизмами. Метод основан на дифференциации ферментативного и окислительного метаболизма углеводов, что применяется для различения некоторых бактерий.

Тип образца: изолированный микроорганизм.

Состав

Формула рассчитана и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип измерения и интерпретация

Среда Хью-Лейфсона разработана Hugh и Leifson. Исследователи описали таксономическое значение ферментативного и окислительного метаболизма углеводов у грамотрицательных кишечных бактерий.

Микроорганизмы используют углеводы двумя способами:

• ферментативным, то есть в результате брожения;
• окислительным.

Это свойство может использоваться для дифференциации некоторых бактерий.

Среда содержит высокую концентрацию углеводов и низкую концентрацию пептона. Такое соотношение снижает вероятность того, что аэробный организм будет использовать пептон с образованием щелочной реакции, нейтрализующей слабую кислотность, образуемую окислительным организмом.

Гидрофосфат дикалия способствует ферментации и выполняет функцию буфера, регулирующего pH. Концентрация агара обеспечивает возможность определения подвижности микроорганизмов и способствует распространению по пробирке кислоты, образуемой на поверхности среды. Бромтимоловый синий используется как индикатор pH.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 19,35 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте при частом перемешивании.
3. Доведите до кипения для полного растворения среды.
4. Разлейте среду в пробирки в двух экземплярах для проведения аэробной и анаэробной ферментации.
5. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин и ориентировочном избыточном давлении 0,103 МПа, соответствующем 15 фунтам на квадратный дюйм.
6. Охладите пробирки со средой в вертикальном положении.

Проведение анализа

Пробирки для аэробной и анаэробной ферментации инокулируют исследуемым микроорганизмом. Поверхность агара в одной пробирке из пары покрывают слоем стерильного жидкого парафинового масла толщиной около 25 мм. Пробирки инкубируют при 37 °C.

• Окислительные микроорганизмы образуют кислоту в незапечатанной пробирке при слабом росте или его отсутствии; в запечатанной пробирке образование кислоты отсутствует.
• Ферментативные микроорганизмы образуют кислоту как в запечатанной, так и в незапечатанной пробирке.
• При образовании кислоты окраска всей среды изменяется с зеленовато-синей на жёлтую.

Жидкий парафин, используемый для покрытия пробирок, необходимо стерилизовать сухим способом при 160–170 °C в течение 2 ч. Влажная стерилизация под высоким давлением для этой цели недостаточна.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

Обозначения: * соответствующие номера WDCM; # ранее название Enterobacter aerogenes.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до голубовато-зелёного цвета.

Гелеобразование

Гелеобразование: полутвёрдая среда, сопоставимая с 0,2%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность: в пробирках в виде столбика формируется прозрачный или слегка опалесцирующий гель зелёно-синего цвета.

Реакция среды

Реакция: для водного раствора с концентрацией 1,94 % масс./об. при 25 °C значение pH составляет 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH: 6,60–7,00.

Ограничения применения

Для подтверждения результата необходимо проводить дополнительные биохимические тесты в комплексе с исследованием на среде Хью-Лейфсона.

Условия эксплуатации, хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 15–30 °C.
• Состояние контейнера: плотно закрытый.
• Срок применения: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия контейнер необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухая проветриваемая зона, защищённая от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение указанного срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Требования безопасности

• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте надлежащие правила микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов среды посредством автоклавирования и/или сжигания