Среда для изучения ферментативных реакций Neisseriae spp. HiMedia M825-500G (уп/500 гр)

Диагностическая среда для изучения ферментативных реакций Neisseriae spp. HiMedia M825-500G (производство: HiMedia) с сертификатом ФСЗ 2009/03705. Применяется для определения способности видов Neisseria окислять углеводы; поставляется в упаковке 500 г.

Принцип измерения

Среда предназначена для изучения ферментативных реакций требовательных микроорганизмов, таких как нейссерии. Виды Neisseria являются окислительными, то есть производят кислоты из углеводов путем окисления. Поскольку эти виды производят меньше кислоты, чем ферментативные организмы, и одновременно выделяют аммиак из пептонов (который может нейтрализовать кислоты), определение продукции кислоты проводится в среде с низким соотношением белок/углевод и с использованием чувствительного индикатора — фенолового красного.

Данная среда является модификацией состава, первоначально разработанного Верой (Vera).

Интерпретация результатов:

• Окисление углеводов: При окислении добавленных углеводов образуются кислоты, которые меняют цвет индикатора фенолового красного с оранжевого на жёлтый.
• Деградация пептона: Расщепление пептонов приводит к образованию аммиака, что вызывает изменение цвета фенолового красного на розовый.
• Итоговый результат: Если кислотность, образованная в результате метаболизма углеводов, превышает щелочность от распада пептонов, среда остается жёлтой.

Роль компонентов:

• Триптон: источник необходимых азотистых питательных веществ.
• L-цистин: источник аминокислот и восстановитель, который связывает молекулярный кислород, предотвращая накопление пероксидов, летальных для некоторых микроорганизмов.
• Агар: в малом количестве снижает конвекционные потоки в среде, способствуя поддержанию анаэробных условий в глубине пробирок.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс.
• Феноловый красный: pH-индикатор, переходящий в жёлтый цвет в кислой среде.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендировать 29,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Разлить по пробиркам и стерилизовать в автоклаве при 118 °C в течение 15 минут (давление не должно превышать ≈0,08 МПа / 12 lbs).
4. Охладить до 40–45 °C.
5. Добавить стерилизованные через мембранный фильтр растворы сахаров до конечной концентрации 1 % (например, 5 мл 20 % раствора сахара на 100 мл среды).

Процедура анализа

1. Инокулировать среду клиническим образцом (изолированным микроорганизмом).
2. Осматривать инокулированные пробирки каждые 4 часа.
3. Оценка результата:
   • Появление жёлтого цвета по всей среде указывает на окисление углеводов и продукцию кислот.
   • Появление розового цвета указывает на отсутствие окисления углеводов и деградацию только пептонов.
   • Виды Neisseria обычно производят кислоты в области инокуляции (посева/прокола). Если в пробе присутствуют сопутствующие контаминантные организмы, вся среда может окраситься в жёлтый цвет.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от светло-жёлтого до светло-розового цвета.
• Желирование: полутвердый гель, сопоставимый с гелем 0,35 % агара.
• Цвет и прозрачность готовой среды: соломенно-жёлтый, прозрачный или слегка опалесцирующий гель (в пробирках формирует столбик).
• Реакция: pH 7,5 ± 0,1 для 2,95 % (масса/объем) водного раствора при 25 °C.
• Диапазон pH: 7,40–7,60.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при добавлении 1 % декстрозы после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Область применения и ограничения

Применяется для анализа клинических образцов (изолированных микроорганизмов).

Ограничения:

1. Индивидуальные организмы могут иметь различные требования к росту и демонстрировать вариативные паттерны на данной среде.
2. Каждая партия протестирована на микроорганизмы, указанные в сертификате анализа (COA); при необходимости использования для других видов рекомендуется провести валидацию.
3. Виды Neisseria должны быть дополнительно подтверждены с помощью окрашивания по Граму и оксидазного теста.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре 15–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков.

Меры предосторожности и утилизация

• Только для диагностики in vitro и профессионального использования.
• Использовать средства индивидуальной защиты: перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности при работе с клиническими образцами.
• Утилизация: загрязненные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с лабораторными протоколами.