HiMedia M814-500G Дифференциальная буферная среда с дрожжевым экстрактом и активированным углем

Дифференциальная буферная среда с дрожжевым экстрактом и активированным углем HiMedia M814-500G предназначена для селективного выделения и дифференциации видов Legionella. Применяется для анализа клинических образцов (респираторных мазков) и проб воды; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения

Среда основана на рецептуре Викерса и модифицированном агаре F-G. Дрожжевой экстракт обеспечивает необходимые питательные вещества для роста бактерий. Пирофосфат железа, L-цистеин гидрохлорид и альфа-кетоглутарат стимулируют рост видов Legionella. Активированный уголь нейтрализует токсичные продукты метаболизма и модифицирует поверхностное натяжение среды.

Дифференциация видов Legionella осуществляется по цвету и морфологии колоний с помощью двух индикаторов: бромкрезолового пурпурного и бромтимолового синего. Буфер ACES (N-2-ацетамидо-2-аминоэтансульфоновая кислота) стабилизирует pH среды. Для подавления сопутствующей микрофлоры в среду добавляют полимиксин B (ингибирует большинство грамотрицательных бацилл) и ванкомицин (подавляет рост большинства грамположительных бактерий).

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. {Susp} Суспендируйте 37,37 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. При необходимости асептически добавьте 50 ед/мл полимиксина B и 1 мг/мл ванкомицина или содержимое одной ампулы добавки V.P. Supplement (FD349).
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Работа с образцами

• Клинические образцы: респираторные мазки (обработка согласно установленным руководствам).
• Пробы воды: сбор и обработка согласно местным стандартам и руководствам.

Ограничения и особенности

• Тестовый образец следует культивировать как можно скорее; мазки можно наносить непосредственно на поверхность агара.
• Рост Legionella обычно становится видимым через 3–4 дня, однако для некоторых видов может потребоваться до 2 недель.
• Для окончательного подтверждения необходимо проведение дополнительных биохимических тестов.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от светло-серого до черного цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5% агаром.
• Цвет и прозрачность: серо-черный непрозрачный гель в чашках Петри.
• Реакция: pH 6,9 ± 0,2 для 3,74% (масса/объем) водного раствора при 25 °C.
• Диапазон pH: 6,70–7,10.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 72–96 ч с добавлением 50 ед/мл полимиксина B и 1 мг/мл ванкомицина.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать бутыль во избежание комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.

Меры предосторожности и утилизация

• Продукт предназначен только для профессионального использования в целях диагностики in vitro.
• При работе использовать защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица.
• Утилизация: загрязненные материалы и использованные среды подлежат обязательному автоклавированию или инсинерации в соответствии с лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.