Среда Геммеса HiMedia M775-500G (уп/500 гр)

Дифференциальная питательная среда Геммеса HiMedia M775-500G (уп/500 г) для биохимической дифференциации видов Salmonella и Shigella. Применяется для скринингового исследования на основе анализа семи реакций: ферментации глюкозы, лактозы, сахарозы, продукции сероводорода, активности уреазы, образования индола и подвижности микроорганизмов.

Принцип измерения и интерпретация

Среда Геммеса (также известная как Hemmes-7 Medium Base) предназначена для дифференциации грамотрицательных факультативно-анаэробных неспорообразующих палочек семейства Enterobacteriaceae, в частности Salmonella и Shigella. Данные микроорганизмы часто трудно отличить биохимически от Escherichia coli.

Дифференциация основана на следующих показателях:

• Ферментация углеводов: Salmonella и Shigella дают красный скос и жёлтый столбик за счёт ферментации глюкозы.
• Подвижность и газообразование: определяются благодаря точно подобранной концентрации агара.
• Образование индола: возможно благодаря наличию триптона в составе.
• Уреазная активность: определяется по появлению вишнёвого (cerise) окрашивания.

Компоненты среды:

• Триптон и дрожжевой экстракт: источники углерода, азота, витаминов и минералов.
• Сульфат железа, тиосульфат натрия и хлорид натрия: обеспечивают необходимые ионы.
• Глюкоза (декстроза), лактоза и сахароза: используются для изучения ферментации.

Состав

Состав, г/л:

Методика приготовления и проведения анализа

Приготовление среды

1. Суспендируйте 42,95 г порошка в 950 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Разлейте по 95 мл в колбы и стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 50–55 °C и в асептических условиях добавьте по 5 мл стерильного 40 % раствора мочевины (FD048) на каждые 95 мл базовой среды.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные пробирки.
6. Оставьте среду застывать в наклонном положении так, чтобы высота столбика составляла не менее 3 см, а скоса — 2 см.

Процедура анализа

1. Посев: из изолированных колоний на чашках Петри произведите посев штрихом на скос и уколом в столбик среды.
2. Инкубация: выдерживайте при температуре 37 °C в течение ночи.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают с добавлением 40 % раствора мочевины (FD048) после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

*Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

• Тип питательной среды: дифференциальный агар
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705
• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от светло-жёлтого до розового цвета
• Свойства геля: полутвердый, сопоставим с 0,55 % агаровым гелем
• Цвет и прозрачность готовой среды: красный, прозрачный или слегка опалесцирующий гель
• Значение pH (4,3 % водный раствор при 25 °C): 7,2 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,00–7,40

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Ограничения: необходимо использовать только хорошо изолированные чистые колонии.

Меры предосторожности и утилизация

При работе со средой и культурами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности: использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица. Загрязнённые материалы и использованные среды подлежат обязательной стерилизации в автоклаве или сжиганию перед утилизацией.