Среда Эдварда для стрептококков модифицированная HiMedia M748-500G (уп/500 гр)

Дифференциальная питательная среда Среда Эдварда для стрептококков модифицированная HiMedia M748-500G (уп/500 гр) предназначена для селективного и быстрого выделения стрептококков. Среда применяется для обнаружения Streptococcus agalactiae и других стрептококков, связанных с маститом крупного рогатого скота, с дифференциацией по признаку утилизации эскулина и гемолизу.

Назначение

Среда Эдварда модифицированная рекомендована для селективного и быстрого выделения Streptococcus agalactiae и других стрептококков, связанных с маститом крупного рогатого скота.

Тип питательной среды: дифференциальная
Назначение изделия: питательная среда
Сертификат: ФСЗ 2009/03705
Форма выпуска: 500 гр

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.
Пептон HM B эквивалентен мясному экстракту.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 41,33 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при 115 °C в течение 20 мин. Указанный режим соответствует давлению 10 фунтов на квадратный дюйм — примерно 0,069 МПа или 0,69 бар.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 5–7 % об./об. стерильной крови овцы.
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Стрептококки представляют собой грамположительные факультативно-анаэробные бактерии, входящие в состав нормальной условно-комменсальной микрофлоры ротовой полости, кожи, кишечника и верхних дыхательных путей человека. Стрептококки группы B являются важной причиной системных инфекций у младенцев и в отдельных случаях бактериального эндокардита.

Мастит крупного рогатого скота вызывается, в частности, микроорганизмом Streptococcus agalactiae, который относится к стрептококкам группы B по классификации Lancefield.

Наиболее распространённые селективные агенты для выделения стрептококков — кристаллический фиолетовый и соли таллия. Среда с кристаллическим фиолетовым использовалась Haxthausen для выделения кожных стрептококков. Позднее было установлено, что стрептококки из молока способны расти на кровяном агаре с генциановым фиолетовым, тогда как другие сапрофитные бактерии молока на этой среде подавляются. Эдвард применял кровяной агар с эскулином и кристаллическим фиолетовым для выделения возбудителя мастита. Для выделения возбудителя мастита также использовалась аналогичная среда с ацетатом таллия.

Пептон и пептон HM B служат источниками углерода, азота и других необходимых питательных веществ. Эскулин позволяет дифференцировать эскулин-положительные микроорганизмы, включая стрептококки группы D, и эскулин-отрицательные микроорганизмы, включая S. agalactiae. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды. Кристаллический фиолетовый и сульфат таллия являются селективными агентами для стрептококков.

Добавление крови обеспечивает дополнительные питательные вещества и одновременно служит индикатором гемолиза. Стрептококки, вызывающие мастит, демонстрируют α-, β- или γ-гемолиз.

Эскулин позволяет различать эскулин-положительные стрептококки группы D, образующие чёрные колонии, и эскулин-отрицательные Streptococcus agalactiae, образующие колонии от синих до бесцветных. Центрифугированную пробу исследуемого молока непосредственно высевают на поверхность чашки со средой. Эскулин-отрицательные организмы S. agalactiae с колониями от синих до бесцветных дополнительно пересевают для проведения идентификационных тестов.

Типы образцов

• Клинические образцы: фекалии, вагинальные мазки.
• Молочные образцы.

Отбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.

Для молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Меры безопасности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• При необходимости обращайтесь к требованиям безопасности, указанным в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

• Отдельные микроорганизмы имеют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать на среде неодинаковый характер роста.
• Каждая партия среды протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа. При использовании среды для конкретного микроорганизма, не указанного в сертификате анализа, пользователю рекомендуется самостоятельно валидировать среду с учётом специфических требований.
• Для полной идентификации необходимо дополнительно выполнить биохимические и серологические тесты.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при соблюдении указаний на этикетке, использовании среды до истечения срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: гель янтарного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.
• После добавления 5–7 % об./об. стерильной дефибринированной крови овцы: в чашках Петри образуется непрозрачный гель вишнёво-красного цвета.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 4,13 % масс./об. при 25 °C.

pH: 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч на среде с добавлением 5–7 % об./об. стерильной дефибринированной крови овцы.

* Соответствующие номера WDCM.

Хранение и срок годности

• Хранить при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Приготовленную среду хранить при температуре 20–30 °C.
• Использовать до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия хранить