HiMedia M717-100G Щелочная среда Хофера

Питательная микробиологическая среда HiMedia M717-100G «Щелочная среда Хофера» с конечным pH 11,0 ± 0,2 предназначена для селективного выделения видов Agrobacterium из образцов почвы. Среда подавляет рост видов Rhizobium и применяется в микробиологических лабораториях для анализа почвенных образцов.

Назначение

Среда рекомендована для селективного выделения видов Agrobacterium из образцов почвы с одновременным подавлением роста видов Rhizobium.

Состав

Формула на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Agrobacterium — род бактерий, вызывающих опухоли у растений. Большинство штаммов Agrobacterium являются фитопатогенами; естественная среда их обитания — корни и подземные стебли восприимчивых растений, а также почва вокруг них.

Наиболее изученный вид рода — Agrobacterium tumefaciens. Способность Agrobacterium переносить ДНК между бактериальными клетками и растениями используется в генетической инженерии растений.

Щелочная среда Хофера приготовлена по составу, описанному Subba Rao, и применяется для выращивания видов Agrobacterium при подавлении видов Rhizobium в почвенных образцах. Селективное действие основано на высоком щелочном pH: бактерии рода Agrobacterium растут при повышенной щёлочности, тогда как ризобии не растут в щелочной среде.

Функции компонентов среды:

• Маннитол используется как углеводный или углеродный источник.
• Дрожжевой экстракт обеспечивает азотистые питательные вещества.
• Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды.
• Фосфат дикалия буферизует среду.
• Тимоловый синий служит индикатором pH и сохраняет синюю окраску при высоком щелочном pH.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию из 26,8 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения компонентов среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/дюйм² (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Тщательно перемешайте приготовленную среду.
5. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Образцы

Тип образца

• Образцы почвы.

Отбор и обращение с образцами

Для почвенных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с установленными руководствами и местными стандартами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

• Индивидуальные микроорганизмы различаются по требованиям к условиям роста и могут демонстрировать неодинаковые характеристики роста на данной среде.
• Для дальнейшей идентификации необходимо провести дополнительные биохимические и серологические исследования.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-зелёного цвета.

Гелеобразование

Прочный гель, сопоставимый с гелем 1,5%-ного агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель синего цвета.

Реакция

Реакция 2,68%-ного водного раствора, приготовленного массово-объёмным методом, при 25 °C:

• pH: 11,0 ± 0,2.

Диапазон pH

• pH: 10,80–11,20.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 25–28 °C в течение не более 5 суток.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в пределах установленного срока годности.

Безопасность при работе

Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку. При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.

При обращении с образцами необходимо соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов путём автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими методами лабораторной работы.

Технические характеристики

Область применения

Щелочная среда Хофера используется для селективного выделения Agrobacterium из почвенных образцов в микробиологических и биохимических лабораториях. Тестирование на среде не заменяет дополнительные биохимические и серологические методы идентификации микроорганизмов.