HiMedia M681-500G Модифицированная среда NNN (Twin Pack)

Модифицированная питательная среда NNN (Twin Pack) HiMedia M681-500G для культивирования лейшманий и трипаносом. Применяется в диагностических целях для выделения жгутиковых простейших из клинических образцов; представлена в виде двухкомпонентной системы (твердая фаза и жидкий слой).

Принцип измерения

Среда NNN (Novy-McNeal-Nicolle) представляет собой двухфазную систему, состоящую из питательного агара с добавлением крови (Часть А) и раствора Локкеса (Часть B). Питательный слой (база) обеспечивает рост требовательных микроорганизмов, таких как Leishmania и Trypanosoma. При инокуляции образца в жидкую фазу создаются условия, способствующие развитию организмов, имитируя среду в переносчике-насекомом; трансформация амастигот в промастигот происходит примерно за 24 часа.

Состав

Состав, г/л:

Методика приготовления и использования

Приготовление Части А

1. Суспендируйте 31 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C и асептически добавьте 10 % стерильной дефибринированной крови кролика или человека (предварительно инактивированной при 56 °C в течение 30 мин).
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте по 5 мл в пробирки или по 25 мл в колбы. Пробирки с средой следует охлаждать в наклонном положении.

Приготовление Части B

1. Суспендируйте 11,2 г порошка Части B в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Добавьте примерно 2 мл в пробирки или 10–15 мл в колбы поверх уже затвердевшей среды Части А.

Область применения

Среда предназначена для работы с клиническими образцами: образцами тканей, аспиратами из очагов поражения и другими биоматериалами.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: Часть А — однородный свободно текущий порошок от кремового до коричневого цвета; Часть B — однородный свободно текущий порошок от белого до кремового цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаром.
• Цвет и прозрачность:
  • Базовая среда: светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
  • После добавления крови: красный непрозрачный гель.
  • Часть B: бесцветная прозрачная жидкость.
• Реакция (pH при 25 °C): 3,1 % водный раствор Части А: 7,3 ± 0,2; 1,12 % водный раствор Части B: 7,0 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Наблюдаются после инкубации при 21–26 °C в течение 48–72 часов (с добавлением стерильной дефибринированной крови кролика или человека).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом помещении, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков.

Ограничения и меры предосторожности

• Среда предназначена только для диагностики in vitro и профессионального использования.
• Различные организмы могут демонстрировать разные паттерны роста.
• Для полной идентификации требуется проведение дополнительных серологических и биохимических тестов.
• При работе с клиническими образцами необходимо соблюдать стандартные меры предосторожности и использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица).
• Контаминированные материалы подлежат обязательному автоклавированию перед утилизацией.