HiMedia M681-500G Модифицированная среда NNN (Twin Pack)

Питательная микробиологическая среда HiMedia M681-500G Модифицированная среда NNN (Twin Pack) производства HiMedia — двухкомпонентная сухая среда в порошке для культивирования простейших. HiMedia M681-500G предназначена для выращивания Leishmania и Trypanosoma из клинических образцов в двухфазной системе «кровяной агар — жидкая среда» при хранении при 10–30 °C.

Назначение

Модифицированная среда NNN рекомендуется для культивирования представителей родов Leishmania и Trypanosoma, включая работу с клиническими образцами: тканями, аспиратами поражённых участков и другими материалами.

Среда предназначена только для диагностики in vitro и профессионального применения.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик. Компонент HM extract эквивалентен мясному экстракту.

Принцип действия и интерпретация

Семейство простейших Trypanosomatidae включает представителей родов Leishmania и Trypanosoma — жгутиковых организмов, обитающих в крови и тканях человека.

Среда NNN была разработана Novy и McNeal, а затем модифицирована Nicolle. Модифицированная среда NNN состоит из двух фаз:

• кровяного агара — части A;
• раствора Локка — части B.

Среда включает основу из кровяного агара и наложенную жидкую среду. Кровяная агаровая основа является высокопитательной и поддерживает рост требовательных микроорганизмов, включая Leishmania и Trypanosoma. Образцы вносят в жидкую фазу двухфазной среды и инкубируют. Такие условия способствуют развитию организмов, характерному для насекомого-переносчика. Примерно через 24 ч амастиготы трансформируются в промастиготы.

Методика приготовления

Часть A

1. Суспендируйте 31 г части A в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Асептически добавьте 10 % стерильной дефибринированной кроличьей или человеческой крови после инактивации крови при 56 °C в течение 30 мин.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте по 5 мл в пробирки или по 25 мл в колбы.
8. Охладите среду в пробирках в наклонном положении.

Часть B

1. Суспендируйте 11,2 г части B в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Добавьте примерно 2 мл в пробирки или 10–15 мл в колбы поверх затвердевшей среды части A.

Тип образца

Тип образца: клинические образцы — тканевые образцы, аспираты поражённых участков и другие аналогичные материалы.

Сбор и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным лабораторным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы имеют индивидуальные требования к условиям роста и могут демонстрировать различный характер роста на этой среде.
2. Каждая серия среды протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). Для любого конкретного микроорганизма, не указанного в COA, рекомендуется валидировать среду с учётом специфических требований пользователя.
3. Для полной идентификации требуются дополнительные серологические и биохимические исследования.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды ожидаются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

• Часть A: однородный сыпучий порошок от кремового до желтовато-коричневого цвета.
• Часть B: однородный сыпучий порошок от белого до кремового цвета.

Гелеобразование

Гель плотный, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: прозрачный гель от светло-янтарного до слегка опалесцирующего.
• После добавления стерильной дефибринированной кроличьей или человеческой крови: непрозрачный гель красного цвета.
• Часть B: бесцветная прозрачная жидкость.

Реакция среды

• Часть A: реакция водного раствора с концентрацией 3,1 % масс./об. при 25 °C; pH: 7,3 ± 0,2.
• Часть B: реакция водного раствора с концентрацией 1,12 % масс./об. при 25 °C; pH: 7,0 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 21–26 °C в течение 48–72 ч с добавлением стерильной дефибринированной кроличьей или человеческой крови.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

• Храните продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Приготовленную среду храните при температуре 20–30 °C.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде; плотно закрывайте флакон для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности продукта.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.