HiMedia M681-100G Модифицированная среда NNN (Twin Pack)

Модифицированная питательная среда NNN (Twin Pack) HiMedia M681-100G для культивирования лейшманий и трипаносом. Применяется в диагностических целях для выделения простейших семейства Trypanosomatidae из клинического материала; представлена в виде двухфазной системы (твердая основа и жидкий слой).

Принцип измерения

Среда NNN (модифицированная) представляет собой двухфазную систему, состоящую из питательного агара с кровью (Часть А) и раствора Локкса (Часть B). Высокопитательная основа (Часть А) поддерживает рост требовательных микроорганизмов, таких как Leishmania и Trypanosoma. Посев образцов производится в жидкую фазу (Часть B), что способствует развитию организмов, имитируя условия в организме насекомого-переносчика: амастиготы трансформируются в промастиготы примерно за 24 часа.

Область применения

Среда рекомендована для культивирования:

• Leishmania (лейшмании);
• Trypanosoma (трипаносомы).

Типы образцов

Для анализа используются клинические образцы: образцы тканей, аспираты из очагов поражения и другие соответствующие материалы.

Состав

Состав компонентов, г/л:

Методика приготовления и использования

Приготовление Части А

1. Суспендируйте 31 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C и асептически добавьте 10 % стерильной дефибринированной крови кролика или человека (предварительно инактивированной при 56 °C в течение 30 мин).
5. Тщательно перемешайте и разлейте по пробиркам (по 5 мл) или колбам (по 25 мл).
6. Пробирки с whoever средой оставить остывать в наклонном положении.

Приготовление Части B

1. Суспендируйте 11,2 г порошка Части B в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Добавьте примерно 2 мл (в пробирки) или 10–15 мл (в колбы) поверх застывшей среды Части А.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: Часть А — от кремового до коричневого однородного свободнотекущего порошка; Часть B — от белого до кремового однородного свободнотекущего порошка.
• Желирование: плотное, сопоставимо с 1,5 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность:
  • Базовая среда: светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
  • После добавления крови: красный непрозрачный гель.
  • Часть B: бесцветная прозрачная жидкость.
• Реакция (pH при 25 °C): 3,1 % водный раствор Части А — 7,3 ± 0,2; 1,12 % водный раствор Части B — 7,0 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 21–26 °C в течение 48–72 ч с добавлением стерильной дефибринированной крови кролика или человека.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения: от +10 до +30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура готовой среды: от +20 до +30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и предостережения

• Только для диагностики in vitro. Только для профессионального использования.
• Индивидуальные организмы могут иметь различные требования к росту и демонстрировать вариативность паттернов роста на данной среде.
• Для полной идентификации возбудителя требуются дополнительные серологические и биохимические тесты.
• При работе с клиническими образцами необходимо соблюдать стандартные меры предосторожности и правила микробиологической безопасности.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты подлежат безопасному удалению путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с установленными лабораторными процедурами по утилизации инфекционных материалов.