HiMedia M630I-500G Буферная нитратная среда для определения подвижности

Буферная нитратная среда для определения подвижности HiMedia M630I-500G (производство HiMedia) предназначена для изоляции и детектирования Clostridium perfringens. Состав и критерии эффективности среды соответствуют спецификациям стандарта ISO 7937:2004.

Область применения

Среда рекомендуется для выявления Clostridium perfringens на основании теста на подвижность и восстановления нитратов. Применяется при анализе продуктов питания (особенно готового мяса и птицы), молочных продуктов и проб воды.

Принцип измерения

Среда представляет собой полужидкий гель, позволяющий определить подвижность микроорганизмов вдоль линии инокуляции.

• Определение подвижности: подвижные организмы распространяются от линии посева, создавая помутнение. Неподвижные организмы растут только в зоне инокуляции.
• Восстановление нитратов: калийный нитрат служит субстратом. При добавлении нитратных реагентов появление красного или оранжевого окрашивания указывает на восстановление нитрата до нитрита.
• Дополнительный анализ: если окрашивание отсутствует, добавляют небольшое количество цинковой пыли. Розовый цвет после этого указывает на отсутствие восстановления нитратов, бесцветная реакция — на полное восстановление нитратов до аммиака.

Для улучшения согласованности реакции восстановления нитратов у различных штаммов в состав включены глицерин и галактоза (по 0,5 %).

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Растворить 19,5 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 5 мл глицерина.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Разлить в пробирки, заполнив их наполовину.
4. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
5. Быстро охладить под проточной водой и оставить среду затвердеть в вертикальном положении.

Процедура посева и интерпретация

1. Первичный этап: 2 г образца продукта помещают в 15–20 мл бульона с измельчённой печенью (M606) или бульона с триптоном, глюкозой и дрожжевым экстрактом (M952).
2. Инкубация: 20–24 часа при 35–37 °C.
3. Изоляция: пересев на агар Perfringens (TSC/SFP Agar Base, M837).
4. Подтверждение: предполагаемые колонии C. perfringens инокулируют в буферную нитратную среду.
5. Оценка:
   • Через 3–8 часов инкубации может наблюдаться небольшое «облако» подвижности вокруг линии посева.
   • Если результат неясен, пробирки инкубируют повторно в течение 24–48 часов и сравнивают помутнение с неинокулированной пробиркой.
   • Отрицательные реакции по подвижности подтверждают методом «висячей капли».

Технические характеристики

Состав (согласно ISO 7937:2004)

Состав (модель M630I)

Общие параметры

• Вес: 500 г
• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до жёлтого цвета
• Свойства геля: полужидкий, сопоставим с 0,3% агаровым гелем
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель
• Диапазон pH: 6,90–7,30
• Происхождение компонентов: животное
• Форма выпуска: порошок
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)

Культуральные характеристики

Результаты после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов:

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 15–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия плотно закрывать крышку для предотвращения образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и меры предосторожности

• Для окончательного подтверждения результатов необходимо проведение других биохимических тестов.
• При работе с образцами следует соблюдать стандартные микробиологические правила безопасности, использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Загрязнённые материалы перед утилизацией должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации.