Среда для изучения подвижности и нитратредуктазной активности забуференная HiMedia M630-500G (уп/500 гр)

Диагностическая забуференная среда для изучения подвижности и нитратредуктазной активности HiMedia M630-500G (уп/500 г). Применяется для выделения и идентификации Clostridium perfringens на основании их неподвижности и способности восстанавливать нитраты.

Принцип измерения и интерпретация

Среда разработана в соответствии с методиками FDA и APHA для обнаружения C. perfringens.

• Питательная основа: Пептон и HM-пептон B обеспечивают организм аминокислотами и сложными азотистыми веществами.
• Определение подвижности: Агар в концентрации 0,3 % создает полужидкостный гель. Подвижные организмы распространяются от линии инокуляции, создавая помутнение. Неподвижные организмы (C. perfringens) растут только вдоль линии посева, при этом окружающая среда остается прозрачной.
• Нитратный тест: Нитрат калия служит субстратом для восстановления. При добавлении нитратных реагентов образование красного или оранжевого окрашивания указывает на восстановление нитрата до нитрита.
• Дополнительные компоненты: Глицерин (0,5 %) и галактоза (0,5 %) добавлены для повышения стабильности реакции восстановления нитратов у различных штаммов.

Интерпретация результатов

1. Подвижность: Оценивается по помутнению, выходящему за пределы линии посева. Через 3–8 часов инкубации может наблюдаться небольшое «облако» подвижности вокруг линии инокуляции. При отсутствии явного результата рекомендуется повторная инкубация в течение 24–48 часов с последующим сравнением с контрольной (непосеянной) пробиркой. Отрицательные реакции подтверждаются методом «висячей капли».
2. Восстановление нитратов: Появление розового или красного цвета после добавления реагентов свидетельствует о наличии нитрита (произошло восстановление нитрата). Если окрашивание отсутствует, добавляют небольшое количество цинковой пыли:
   • Появление розового цвета после цинка $\rightarrow$ восстановление нитрата не произошло.
   • Отсутствие окрашивания $\rightarrow$ нитраты полностью восстановлены до аммиака.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Растворить 19,5 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 5 мл глицерина.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Разлить в пробирки, заполняя их наполовину.
4. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx 0,1$ МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
5. Быстро охладить под проточной водой и оставить среду затвердевать в вертикальном положении.

Процедура посева и подтверждения

1. Внесите 2 г образца продукта в 15–20 мл бульона из измельченной печени (M606) или бульона на триптоне, глюкозе и дрожжевом экстракте (M952).
2. После инкубации при 35–37 °C в течение 20–24 часов проведите изоляцию на агаре для перфингенса (M837).
3. Подозрительные колонии C. perfringens подтверждают биохимически, инокулируя их в забуференную среду M630 для проверки подвижности и восстановления нитратов.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры

• Тип среды: Диагностическая
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705
• Внешний вид: Гомогенный свободнотекущий порошок от кремового до желтого цвета
• Свойства геля: Полужидкий, сопоставим с 0,3 % агаровым гелем
• Цвет и прозрачность готовой среды: Светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель
• Диапазон pH: 7,20–7,60

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Дополнительная информация

Область применения

Используется для анализа изолированных микроорганизмов из проб пищевых продуктов и воды. При работе с молочными и пищевыми образцами следует руководствоваться соответствующими стандартами сбора и обработки проб.

Ограничения и предостережения

• Из-за вариативности питательных свойств некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост.
• При работе с культурами соблюдайте стандартные меры микробиологической безопасности.
• Загрязненные материалы перед утилизацией должны быть стерилизованы в автоклаве.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом помещении.
• Хранение готовой среды: при температуре 15–25 °C.
• Особенности: Продукт гигроскопичен; после вскрытия плотно закрывайте крышку во избежание образования комков.

Спецификации производителя