HiMedia M622-100G Среда для выделения железобактерий

Питательная среда HiMedia M622-100G для выделения железобактерий имеет химически определённый состав. Среда предназначена для анализа проб воды, включая выделение бактерий группы Sphaerotilus–Leptothrix, и требует последующей биохимической и серологической идентификации изолятов.

Назначение

Среда рекомендована для выделения железобактерий, особенно относящихся к группе Sphaerotilus–Leptothrix. Тип исследуемого образца: пробы воды.

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Бактерии группы Sphaerotilus–Leptothrix являются нитчатыми микроорганизмами, образующими чехол. Бактерии с чехлом способны откладывать на нём гидроксид железа(III), а иногда и диоксид марганца. Специфическое отложение ионов железа на чехле S. discophorus — также относящегося к видам Leptothrix — было продемонстрировано в исследованиях Rogers и Anderson.

Железобактерии получают энергию за счёт окисления железа из двухвалентного состояния в трёхвалентное. Некоторые бактерии, не окисляющие ионы двухвалентного железа, могут растворять или косвенно осаждать железо. В процессе роста такие микроорганизмы либо высвобождают железо, используя органические радикалы, с которыми железо связано, либо изменяют условия окружающей среды таким образом, чтобы обеспечить осаждение железа.

Среда для выделения железобактерий рекомендована Американской ассоциацией общественного здравоохранения (APHA) для выделения железобактерий, особенно группы Sphaerotilus–Leptothrix. Среда применяется для идентификации различных групп нитчатых микроорганизмов, включая железобактерии.

Функции компонентов среды:

• сульфат магния, сульфат аммония, хлорид калия и нитрат кальция являются источниками ионов, стимулирующих метаболизм;
• глюкоза служит источником углерода;
• фосфат дикалия буферизует среду;
• бактериям родов Sphaerotilus и Leptothrix необходим витамин B₁₂ как фактор роста;
• некоторым штаммам Leptothrix дополнительно необходим тиамин как фактор роста.

Приготовление среды

1. Приготовьте суспензию 10,88 г обезвоженной среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте суспензию только до кипения.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов (примерно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные пробирки.

Из-за присутствия карбоната кальция приготовленная среда образует опалесцирующий раствор с белым осадком.

Посев и обращение с образцами

1. Приготовьте агаровые скосы из среды.
2. С соблюдением правил асептики внесите пипеткой 3 мл исследуемой пробы воды на поверхность скосов.
3. Инокулируйте пробирки.
4. Инкубируйте пробирки при комнатной температуре до появления мутного роста в жидком слое.

После использования контаминированные материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный легко сыпучий порошок кремового или бежевого цвета.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в пробирках со скосами образуется гель жёлтого цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 22–25 °C в течение не более 5 суток.

• Leptothrix discophora ATCC 43182: рост хороший–обильный.
• Sphaerotilus natans ATCC 13338: рост хороший–обильный.
• Ferrobacillus ferrooxidans: рост хороший–обильный.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

Храните сухую среду при температуре 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости. Приготовленную среду храните при температуре 20–30 °C.

• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия плотно закрывайте флакон и храните продукт в сухом состоянии.
• Гигроскопичная природа продукта может приводить к образованию комков.
• Неправильное хранение может стать причиной комкования.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте ёмкость.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Ограничения применения

Для окончательной идентификации необходимо выполнить дополнительные биохимические и серологические тесты.

Меры предосторожности

Перед открытием контейнера прочитайте этикетку. При работе с образцами и культурами используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики. При обращении с образцами применяйте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными методическими рекомендациями. Требования безопасности могут быть указаны в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов среды с помощью автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, соприкасавшиеся с образцом, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.