Среда для выделения тиобацилл HiMedia M615-500G (уп/500 гр)

Элективная питательная среда для выделения тиобацилл HiMedia M615-500G (уп/500 гр) предназначена для выделения, культивирования и обогащения серобактерий. Среда поставляется в виде двойной упаковки частей A и B, рассчитана на приготовление железоокисляющей среды для водных проб и требует ежедневного встряхивания пробирок при инкубации из-за аэробности целевых микроорганизмов.

Назначение и область применения

Среда HiMedia M615-500G применяется для выделения, культивирования и обогащения Thiobacillus ferroxidans из водных проб. В оригинальном описании каталога целевой микроорганизм также обозначен как Thiobacillus ferrooxidans.

Среда предназначена для работы с водными образцами. Применение включает микробиологический контроль воды, исследование микроорганизмов, участвующих в окислении железа и неорганических соединений серы, а также оценку процессов, связанных с кислотным дренажом шахт и биоизвлечением металлов.

• Тип питательной среды: элективный
• Назначение изделия: среда
• Происхождение: химически определённая среда
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: HDPE
• Упаковка: двойная, части A и B
• Масса: 500 г
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709

Состав

Состав компонентов приведён в граммах на литр.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Принцип действия и интерпретация результатов

Thiobacillus ferroxidans отвечает за окисление железа и неорганических соединений серы в таких средах, как отвалы горных разработок и угольные месторождения, где присутствуют соответствующие соединения. Основное значение T. ferroxidans связано с образованием кислотного дренажа шахт.

Микроорганизм обычно рассматривают как облигатно аэробный, однако в анаэробных условиях T. ferroxidans способен расти на элементарной сере, используя трёхвалентное железо как акцептор электронов. Это позволяет рассматривать T. ferroxidans как факультативный анаэроб, участвующий в циклах железа и серы в кислых средах. Способность к росту в условиях дефицита кислорода может иметь значение для процессов биоизвлечения, в которых анаэробные условия встречаются регулярно.

Железоокисляющая среда для Thiobacillus ferroxidans предназначена для выделения, культивирования и обогащения T. ferroxidans. Сульфат магния, сульфат аммония, хлорид калия и нитрат кальция служат источниками ионов, стимулирующих метаболизм микроорганизмов. Дикалий фосфат выполняет буферную функцию.

Приготовленная среда содержит осадок, имеет опалесценцию и зелёную окраску. T. ferroxidans использует сульфат железа(II) как источник энергии. При стерилизации происходит частичное окисление железа.

Количество T. ferroxidans может определяться методом наиболее вероятного числа (MPN). Рост микроорганизма сопровождается снижением pH и увеличением концентрации окисленного железа. При использовании неинокулированных контролей положительные пробирки или колбы с обогащением отличаются от отрицательных усилением интенсивности тёмной оранжево-коричневой окраски.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте часть A: суспендируйте 3,85 г порошка части A, что соответствует массе обезвоженной среды на 1 л, в 700 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 1 мл 10-нормального раствора серной кислоты.
2. Нагрейте раствор части A до кипения для полного растворения среды.
3. Отдельно суспендируйте 44,22 г части B в 300 мл очищенной или дистиллированной воды.
4. При необходимости нагрейте раствор части B для полного растворения среды.
5. Простерилизуйте части A и B раздельно в автоклаве при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,10 МПа) при 121 °C в течение 15 мин.
6. Охладите каждый раствор до 25 °C.
7. В асептических условиях добавьте 300 мл стерилизованного раствора части B к 700 мл раствора части A.
8. Тщательно перемешайте полученную среду.
9. В асептических условиях разлейте среду в стерильные пробирки или колбы.

Требования к образцам и обращению

Тип образца: водные пробы.

Для водных проб необходимо использовать соответствующие методы отбора и обработки образцов в соответствии с действующими руководствами и местными стандартами. После использования загрязнённые материалы перед утилизацией необходимо стерилизовать автоклавированием.

Ограничения применения

Thiobacillus ferroxidans относится к высокоаэробным или строго аэробным микроорганизмам, поэтому пробирки необходимо встряхивать ежедневно в течение инкубации.

Контроль качества

Внешний вид части A

Белый или кремовый однородный легко сыпучий порошок.

Внешний вид части B

От зеленовато-жёлтого до тёмно-зелёного однородный гигроскопичный порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачная или слегка опалесцирующая среда коричневато-жёлтого цвета с осадком.

Реакция

Реакция раствора, приготовленного из 0,39 г части A в 70 мл дистиллированной воды, содержащей 1 мл 10-нормального раствора серной кислоты, и 4,42 г части B в 30 мл дистиллированной воды, при 25 °C:

• pH: 3,3 ± 0,3

Диапазон pH

• pH: 3,00–3,60

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 30 °C в течение не более 5 суток.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухого препарата: 10–30 °C
• Условия хранения сухого препарата: плотно закрытая ёмкость
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке
• Условия хранения: сухое проветриваемое помещение, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить препарат в сухом состоянии для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию препарата. После каждого использования ёмкость следует плотно закрывать. Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Меры предосторожности

Перед открытием контейнера необходимо ознакомиться с этикеткой.

При работе следует использовать:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

При обращении с образцами и культурами необходимо соблюдать надлежащие правила микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности, установленные соответствующими руководствами. Требования безопасности приведены в индивидуальных паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством авт