HiMedia M615-100G Железоокисляющая среда (Twin pack)

Железоокисляющая среда HiMedia M615-100G (Twin pack) предназначена для изоляции, культивирования и обогащения Thiobacillus ferroxidans. Среда используется для анализа проб воды; состав разработан в соответствии со стандартами APHA.

Принцип измерения

Thiobacillus ferrooxidans окисляет железо и неорганические соединения серы, что делает этот микроорганизм ключевым в процессах биовыщелачивания и формирования кислых шахтных стоков. Данный микроорганизм считается облигатно аэробным, однако в анаэробных условиях может расти на элементарной сере, используя железо (III) в качестве акцептора электронов, что характеризует его как факультативного анаэроба.

В среде железоокисляющей (Iron Oxidizing Medium) в качестве источника энергии используется сульфат железа (II). Сульфат магния, сульфат аммония, хлорид калия и нитрат кальция стимулируют метаболизм, а гидрофосфат калия служит буфером. Рост T. ferroxidans проявляется снижением pH и увеличением концентрации окисленного железа: в положительных пробах наблюдается изменение цвета на темно-оранжево-коричневый по сравнению с неинокулированным контролем.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

Среда поставляется в виде двух компонентов (Part A и Part B), которые стерилизуются раздельно.

1. Приготовление части А: 3,85 г сухой среды (эквивалент веса на 1 литр) суспендируют в 700 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 1 мл 10Н серной кислоты. Нагревают до кипения для полного растворения.
2. Приготовление части B: 44,22 г компонента B суспендируют отдельно в 300 мл очищенной или дистиллированной воды. При необходимости нагревают до полного растворения.
3. Стерилизация: Части А и В стерилизуют раздельно в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Смешивание: После охлаждения обоих растворов до 25 °C асептически добавляют 300 мл стерилизованной части B к 700 мл части А. Тщательно перемешивают.
5. Розлив: Асептически распределяют среду по стерильным пробиркам или колбам.

Процедура анализа

Для количественного определения T. ferrooxidans может быть использован метод наиболее вероятного числа (MPN).

Технические характеристики

Состав (г/л)

Контроль качества

Внешний вид

• Часть А: белый или кремовый однородный свободнотекучий порошок.
• Часть B: желто-зеленый или темно-зеленый однородный гигроскопичный порошок.
• Готовая среда: коричнево-желтая, прозрачная или слегка опалесцирующая с осадком.

Культуральные характеристики

Инкубация при 30 °C до 5 суток.

Область применения и ограничения

• Тип образцов: пробы воды.
• Ограничения: микроорганизмы являются строго аэробными, поэтому пробирки необходимо встряхивать ежедневно в течение всего периода инкубации.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать крышку для предотвращения комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
• Утилизация: использованные или непригодные препараты подлежат стерилизации в автоклаве или сжиганию в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.