HiMedia M615-100G Железоокисляющая среда (Twin pack)

Двухкомпонентная питательная среда HiMedia M615-100G Железоокисляющая среда (Twin pack) — сухая химически определённая среда для выделения, культивирования и обогащения Thiobacillus ferroxidans. Среда предназначена для анализа проб воды и хранится при температуре 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости.

Назначение

Среда рекомендована для выделения, культивирования и обогащения Thiobacillus ferroxidans из проб воды.

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с рабочими параметрами.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 3,85 г части A — эквивалентное количество обезвоженной среды на 1 л — в 700 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 1 мл 10 N серной кислоты.
2. Нагрейте раствор до кипения для полного растворения среды.
3. Отдельно суспендируйте 44,22 г части B в 300 мл очищенной или дистиллированной воды.
4. При необходимости нагрейте раствор части B для полного растворения среды.
5. Стерилизуйте части A и B по отдельности автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
6. Охладите каждый раствор до 25 °C.
7. В асептических условиях добавьте 300 мл стерилизованного раствора части B к 700 мл раствора части A.
8. Тщательно перемешайте.
9. В асептических условиях разлейте среду в стерильные пробирки или колбы.

Принцип действия и интерпретация результатов

Thiobacillus ferrooxidans отвечает за окисление железа и неорганических соединений серы в областях, где такие соединения присутствуют в больших количествах, включая отвалы горных разработок и залежи угля. Основное значение T. ferrooxidans связано с образованием кислого шахтного дренажа.

Обычно T. ferrooxidans рассматривают как облигатно аэробный микроорганизм, однако в анаэробных условиях его можно культивировать на элементарной сере с использованием железа(III) в качестве акцептора электронов. Эти результаты указывают, что T. ferrooxidans может рассматриваться как факультативный анаэроб, играющий важную роль в циклах железа и серы в кислых средах. Способность микроорганизма расти в средах с недостатком кислорода может иметь значение для процессов биовыщелачивания, в которых часто возникают анаэробные условия.

Железоокисляющая среда для Thiobacillus ferroxidans сформулирована в соответствии с APHA и применяется для выделения, культивирования и обогащения T. ferroxidans. Сульфат магния, сульфат аммония, хлорид калия и нитрат кальция служат источниками ионов, стимулирующих метаболизм. Дикалийфосфат выполняет буферную функцию.

Приготовленная среда содержит осадок, имеет опалесценцию и зелёную окраску. T. ferroxidans использует сульфат железа(II) как источник энергии. Во время стерилизации происходит некоторое окисление железа. Количественное определение T. ferroxidans может выполняться методом наиболее вероятного числа.

Рост микроорганизма проявляется снижением pH и увеличением концентрации окисленного железа. При использовании неинокулированных контролей в положительных обогатительных пробирках или колбах по сравнению с отрицательными пробами наблюдается усиление тёмной оранжево-коричневой окраски.

Тип образца

Тип образца: пробы воды.

Отбор и обращение с образцами

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

Микроорганизмы характеризуются высокой или строгой аэробностью, поэтому пробирки следует встряхивать ежедневно во время инкубации.

Меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Контроль качества

Внешний вид части A

Белый или кремовый однородный сыпучий порошок.

Внешний вид части B

Однородный гигроскопичный порошок от зеленовато-жёлтого до тёмно-зелёного цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачная или слегка опалесцирующая среда коричневато-жёлтого цвета с осадком.

Реакция

Реакция раствора 0,39 г части A в 70 мл дистиллированной воды, содержащей 1 мл 10 N серной кислоты, с добавлением 4,42 г части B в 30 мл дистиллированной воды при 25 °C.

pH: 3,3 ± 0,3.

Значение pH

pH: 3,00–3,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 30 °C в течение до 5 суток.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения: плотно закрытая ёмкость.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Срок использования: до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия плотно закройте флакон и храните продукт в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухая вентилируемая зона, защищённая от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение указанного срока годности и при соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

Совместимость и область применения

Среда используется для работы с пробами воды при выделении, культивировании, обогащении и возможном количественном определении Thiobacillus ferroxidans и Thiobacillus ferrooxidans. При приготовлении необходимы очищенная или дистиллированная вода и 10 N сер