Пептонная вода, забуференная HiMedia M614-500G (уп/500 гр)

Питательная микробиологическая среда Пептонная вода, забуференная HiMedia M614-500G (уп/500 гр) — сухая среда для предварительного обогащения образцов. Среда предназначена для повышения высеваемости повреждённых видов Salmonella из пищевых и молочных продуктов перед селективным обогащением и выделением.

Назначение и область применения

Забуференная пептонная вода используется как среда предварительного обогащения для восстановления сублетально повреждённых клеток Salmonella перед переносом на селективную среду. Применяется при исследовании пищевых и молочных образцов, включая сухие корма для птицы.

Среда предназначена для повышения высеваемости повреждённых сальмонелл из пищевых продуктов перед селективным обогащением и выделением. Применение также указано для образцов другого типа. Методика связана с ISO 6579:1993; в российской документации указано соответствие ГОСТ Р 52814-2007.

Типы образцов

• Пищевые продукты.
• Молочные продукты.

Состав

Состав среды на 1 л:

Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Принцип действия и интерпретация

Забуференная пептонная вода не содержит ингибирующих компонентов, обладает высокой буферной ёмкостью и создаёт условия для восстановления клеток, повреждённых при консервировании пищевых продуктов.

Сублетальное повреждение Salmonella может возникать вследствие:

• нагревания;
• высушивания;
• воздействия высокого осмотического давления;
• действия консервантов;
• изменения pH.

В период предварительного обогащения среда способствует восстановлению повреждённых клеток, чувствительных к низкому pH. Это особенно важно при исследовании овощных образцов, обладающих низкой буферной ёмкостью.

Протеозный пептон служит источником углерода, азота, витаминов и минеральных веществ. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс, а фосфаты выполняют буферную функцию. Богатая питательными веществами жидкая среда обеспечивает высокую скорость восстановления сублетально повреждённых бактерий и поддерживает интенсивный рост. Фосфатная буферная система предотвращает повреждение бактерий вследствие изменения pH среды.

При исследовании мяса, искусственно контаминированного сублетально повреждёнными микроорганизмами, предварительное обогащение в забуференной пептонной воде при 37 °C в течение 18 ч перед селекцией в тетратионатном желчно-зелёном бульоне (M1255) показало более высокую эффективность по сравнению с непосредственной селекцией. Лактозный бульон также часто применяют как среду предварительного обогащения, однако он может снижать восстановление Salmonella.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Суспендируйте 20,0 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Разлейте среду порциями по 50 мл в пробирки или колбы либо используйте другой необходимый объём.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.

Предварительное обогащение и селективное выделение

1. Внесите 10 г образца в 50 мл подготовленной среды.
2. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 18 ч.
3. Перенесите 10 мл полученной суспензии в 100 мл тетратионатного бульона (M032).
4. Инкубируйте при 43 °C в течение 24–48 ч.
5. Выполните пересев на селективную плотную среду.
6. Исследуйте чашки на наличие характерных колоний Salmonella.

Для обогащения Escherichia coli O157:H7 при необходимости асептически добавьте регидратированное содержимое одного флакона добавки CCV (FD247) к 1000 мл среды.

Сбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим методическим рекомендациям. После использования контаминированные материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

• Внешний вид сухой среды: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: светло-жёлтый прозрачный раствор без осадка.
• Реакция: реакция водного раствора с массовой концентрацией 2,0 % при 25 °C.
• pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч. Восстановление проводят с использованием агара XLD (M031).

* Соответствующие номера WDCM.

Эффективность среды ожидается при применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных условиях.

Предупреждения и меры предосторожности

1. Перед открытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой. При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики, стандартные меры предосторожности и требования соответствующих паспортов безопасности.
2. Каждая серия среды проверена на организмы, указанные в сертификате анализа. При необходимости применения среды для микроорганизма, не указанного в сертификате анализа, пользователь должен самостоятельно валидировать среду с учётом конкретных требований.
3. Для подтверждения результата необходимо выполнить дальнейшее обогащение и выделение.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 15–30 °C.
• Условия хранения: в плотно закрытом контейнере, в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После вскрытия: хранить в сухом виде, плотно закрывая флакон.
• Защита от влаги: обязательна, поскольку гигроскопичность продукта может привести к образованию комков.
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при применении в течение установленного срока годности и соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Утилизация

Использованные или непригодные к применению препараты необходимо утилизировать безопасным способом с предварительным автоклавированием и/или сжиганием.

Материалы, контактировавшие с образцами, следует обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными процедурами обращения с инфекционными материалами.

Т