HiMedia M614-100G Буферная пептонная вода

Порошкообразная питательная среда HiMedia M614-100G Буферная пептонная вода для предварительного обогащения микробиологических проб, предназначенная для восстановления повреждённых клеток видов Salmonella. Среда применяется при анализе пищевых и молочных образцов, хранится при 10–30 °C и имеет конечный pH 7,2 ± 0,2.

Назначение

Буферная пептонная вода HiMedia M614-100G используется как среда предварительного обогащения для повышения выхода повреждённых клеток видов Salmonella из пищевых продуктов перед селективным обогащением и выделением, а также для анализа образцов.

Типы образцов

• Пищевые образцы.
• Молочные образцы.

Состав

Состав на 1 л среды:

Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Принцип действия и интерпретация

Буферная пептонная вода представляет собой среду предварительного обогащения, предназначенную для восстановления сублетально повреждённых клеток Salmonella перед переносом на селективную среду.

Среда не содержит ингибиторов, обладает высокой буферной ёмкостью и создаёт условия для восстановления клеток, повреждённых процессами консервирования пищевых продуктов. Сублетальное повреждение Salmonella может возникать вследствие воздействия тепла, обезвоживания, высокого осмотического давления, консервантов или изменений pH.

На этапе предварительного обогащения буферная пептонная вода способствует восстановлению повреждённых клеток, чувствительных к низкому pH. Это особенно важно при исследовании овощных образцов, обладающих низкой буферной ёмкостью.

Среда может использоваться для анализа сухих кормов для птицы.

При выделении Salmonella из искусственно контаминированного мяса с сублетально повреждёнными микроорганизмами предварительное обогащение в буферной пептонной воде при 37 °C в течение 18 ч перед селекцией в тетратионатном желчно-зелёном бульоне (M1255) показало более высокие результаты по сравнению с методом прямой селекции. Лактозный бульон часто используют как среду предварительного обогащения, однако он может ухудшать восстановление Salmonella.

Протеозопептон служит источником углерода, азота, витаминов и минеральных веществ. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс, а фосфаты выполняют функцию буфера. Питательный бульон обеспечивает высокую скорость восстановления сублетально повреждённых бактерий и поддерживает интенсивный рост. Фосфатная буферная система предотвращает повреждение бактерий вследствие изменения pH среды.

Методика проведения анализа

1. Внесите 10 г образца в 50 мл буферной пептонной воды.
2. Инкубируйте среду при 35–37 °C в течение 18 ч.
3. Перенесите 10 мл полученной среды в 100 мл тетратионатного бульона (M032).
4. Инкубируйте при 43 °C в течение 24–48 ч.
5. Выполните пересев на селективную плотную среду.
6. Исследуйте чашки на наличие характерных колоний Salmonella.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 20,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Разлейте среду по 50 мл в пробирки или колбы либо в требуемом объёме.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/дюйм² (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. При необходимости в асептических условиях добавьте регидратированное содержимое одного флакона добавки CCV (FD247) к 1000 мл среды для обогащения Escherichia coli O157:H7.

Сбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с установленными методическими руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид порошка: от кремового до жёлтого цвета, однородная сыпучая среда.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность: светло-жёлтый прозрачный раствор без осадка.

Реакция среды

Реакцию определяют для 2,0 % масс./об. водного раствора при 25 °C.

• pH по реакции: 7,2 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч. Восстановление проводят с использованием агара XLD (M031).

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения: в плотно закрытой ёмкости.
• Температура хранения приготовленной среды: 15–30 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрыв флакон, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте ёмкость.
• Для сохранения рабочих характеристик используйте продукт в пределах указанного срока годности.

Предупреждения и меры предосторожности

1. Перед вскрытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой. При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории, стандартные меры предосторожности и требования соответствующих паспортов безопасности.
2. Каждая серия среды протестирована на организмы, указанные в сертификате анализа (COA). Для любого конкретного микроорганизма, не указанного в сертификате анализа, рекомендуется провести валидацию среды с учётом требований пользователя.
3. Для подтверждения результата необходимо выполнить дальнейшее обогащение и выделение.

Оценка эффективности

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с указаниями на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов следуйте установленным лабораторным процедурам. Материалы, контактировавшие с образцом, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

Сравнительный контекст

В отличие от прямой селекции, применение буферной пептонной воды предусматривает предварительное восстановление сублетально повреждённых клеток Salmonella в неингибирующей, хорошо забуференной питательной среде перед переносом на селективную среду.