МП-7 среда HiMedia M597-500G (уп/500 гр)

Диагностическая питательная среда МП-7 среда HiMedia M597-500G (уп/500 гр) — порошковая среда для культивирования пектинолитических микроорганизмов. МП-7 применяется для выявления микроорганизмов, продуцирующих пектатлиазу, в частности при исследовании сельскохозяйственного сырья и почвы.

Назначение

МП-7 предназначена для культивирования и выявления пектинолитических микроорганизмов, особенно продуцирующих пектатлиазу. Среда рекомендована Американской ассоциацией общественного здравоохранения (APHA) для обнаружения пектинолитических микроорганизмов.

Пектин является важным компонентом клеточных стенок высших растений и обеспечивает соединение растительных клеток. Большинство микроорганизмов, разрушающих пектин, связано с необработанным сельскохозяйственным сырьём и почвой.

Принцип выявления пектинолитической активности

Пектинолитические микроорганизмы продуцируют ферменты, разрушающие пектин, включая пектинлиазу и пектатлиазу. Пектинолитическую активность выявляют одним из двух способов:

• по углублению или разрушению геля вокруг колонии в зоне, где субстрат подвергся деградации;
• после заливания поверхности чашки раствором осадителя, который осаждает неповреждённый пектин в среде.

При наличии пектинолитического роста вокруг колонии в непрозрачной среде формируется прозрачный ореол. Высокое содержание фосфатов в среде необходимо для наблюдения пектинолитической активности.

Состав

Содержание компонентов приведено для приготовления 1 л среды.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих характеристик.

Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 33,2 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 psi (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Тщательно перемешайте среду и разлейте её в стерильные чашки Петри.

Из-за наличия различных неорганических солей после нагревания может образоваться небольшой осадок. Перед разливом в стерильные чашки Петри тщательно встряхните среду.

Раствор осадителя полисахарида

Растворите 1,0 г бромида гексадецилтриметиламмония в 100 мл воды. При необходимости раствор можно стерилизовать автоклавированием.

Методика выявления пектинолитической активности

1. Засейте приготовленные чашки Петри исследуемым микроорганизмом.
2. Инкубируйте чашки в течение 2–3 суток при температуре 30–35 °C.
3. Налейте на поверхность среды 1,0 % водный раствор бромида гексадецилтриметиламмония, не допуская смещения колоний.
4. Оцените зоны гидролиза пектина. Обычно они становятся видимыми через несколько минут.
5. Для повышения контрастности наблюдайте чашку на тёмном фоне.

Реагент осаждает неповреждённый пектин в среде, тогда как зона вокруг пектинолитического роста остаётся прозрачной и формирует ореол в непрозрачной среде.

Выявление полигалактуроназы

Пластинчатый метод определения полигалактуроназы обычно проводят при снижении pH среды, предназначенной для выявления пектатлиазы, то есть МП-7, до 6 или ниже. В таких условиях полигалактуроназа сохраняет активность, а пектатлиазы становятся неактивными.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при температуре 35–37 °C в течение 3–5 суток.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель жёлтого цвета.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 3,32 % масса/объём при 25 °C; pH 7,2 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,00–7,40.

Технические характеристики

• Полное название: МП-7 среда HiMedia M597-500G (уп/500 гр).
• Производитель: HiMedia.
• Тип питательной среды: диагностический.
• Назначение изделия: среда.
• Форма выпуска: порошок.
• Происхождение компонентов: без компонентов животного происхождения, вегетарианская.
• Тип продукта: стандартный.
• Тип упаковки: HDPE.
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705.
• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,00–7,40.
• Масса упаковки: 500 г.

Хранение и срок годности

• Условия хранения сухой среды: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытой упаковке.
• Условия хранения приготовленной среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.