МП-5 среда HiMedia M596-500G (уп/500 гр)

Питательная среда МП-5 HiMedia M596-500G (уп/500 гр) для выявления пектинолитических микроорганизмов, особенно продуцирующих полигалактуроназу, с pH 5,5 ± 0,5 при 25 °C. Применяется для микробиологического анализа сельскохозяйственного сырья и почвы; приготовленная среда образует жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Назначение

МП-5 среда используется для выявления пектинолитических микроорганизмов, особенно продуцирующих полигалактуроназу. Большинство микроорганизмов, разрушающих пектин, связано с необработанными сельскохозяйственными продуктами и почвой.

Среда рекомендована APHA для выявления пектинолитических микроорганизмов. Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Состав

Содержание компонентов указано в г/л.

Технические характеристики

• Тип продукта: стандартный
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: ПЭВП (полиэтилен высокой плотности)
• Происхождение компонентов: без компонентов животного происхождения, растительная основа
• Конечный pH при 25 °C: 5,5 ± 0,5
• Диапазон pH: 5,00–6,00
• Концентрация водного раствора для реакции: 3,32 % масс./об.
• Внешний вид: однородный, свободно текучий порошок от кремового до жёлтого цвета
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаровым гелем
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель в чашках Петри
• Фасовка: 500 г
• Регистрационное обозначение: ФСЗ 2009/03705

Приготовление среды

1. Суспендируйте 33,2 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Из-за наличия различных неорганических солей при нагревании может образовываться небольшой осадок. Перед разливом в стерильные чашки Петри тщательно встряхните приготовленную среду.

Приготовление раствора осадителя полисахарида

Растворите 1,0 г бромида гексадецилтриметиламмония в 100 мл воды. При необходимости раствор стерилизуйте в автоклаве.

Для выявления пектинолитической активности используется 1,0 % водный раствор бромида гексадецилтриметиламмония.

Принцип измерения и интерпретация

Пектин является важным компонентом клеточных стенок высших растений и обеспечивает склеивание растительных клеток. Пектинолитическая активность микроорганизма выявляется одним из двух способов:

• по углублению геля вокруг колонии в зоне разрушения субстрата;
• после заливания поверхности чашки раствором осадителя полисахарида.

Среда МП-5 предназначена для выявления пектинолитических микроорганизмов, особенно продуцирующих полигалактуроназу. Для определения полигалактуроназы методом посева на чашки pH среды снижают до 6 и ниже. В таких условиях полигалактуроназа сохраняет активность, а пектатлиазы становятся неактивными.

Кислый pH среды МП-5 является основным параметром, позволяющим отличать продуценты полигалактуроназы от продуцентов пектатлиазы. Для наблюдения пектинолитической активности необходим высокий уровень фосфатов в среде.

Методика выявления пектинолитической активности

1. Засейте приготовленную среду исследуемым микроорганизмом.
2. Инкубируйте чашки в течение 2–3 суток при 30–35 °C.
3. Налейте раствор осадителя полисахарида на поверхность среды, не допуская смещения колоний.
4. Наблюдайте зоны гидролиза пектина; обычно они становятся видимыми в течение нескольких минут.
5. Оценивайте зоны на тёмном фоне для облегчения визуального обнаружения.

Раствор осадителя вызывает осаждение неповреждённого пектина в среде. В непрозрачной среде рост пектинолитических микроорганизмов окружён прозрачным ореолом, соответствующим зоне гидролиза пектина.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 2–3 суток.

Хранение и срок годности

• Условия хранения сухой среды: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытой ёмкости
• Условия хранения приготовленной среды: при 2–8 °C
• Использование: до истечения срока годности, указанного на этикетке

Документы и назначение изделия

• Назначение изделия: питательная среда
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705