HiMedia M549I-500G Дифференциальная усиленная клостридиальная среда

Дифференциальная усиленная клостридиальная среда HiMedia M549I-500G (производство HiMedia) предназначена для культивирования клостридий из проб воды. Состав и критерии эффективности среды соответствуют стандарту ISO 6461-1:1986.

Область применения

Среда используется для выделения сульфитредуцирующих клостридий из пищевых продуктов и для их количественного определения в воде методом множественных пробирок (MPN). Применяется в микробиологических лабораториях при анализе качества воды.

Принцип измерения

Среда разработана для инициации роста при малом количестве посевного материала и получения высокого титра клостридий.

Триптоза, экстракт HM, дрожжевой экстракт, крахмал и ацетат натрия обеспечивают необходимые питательные вещества для метаболизма бактерий. Глюкоза служит источником углерода и энергии (ферментируемый углевод). L-цистеина гидрохлорид выступает в роли восстановителя. В качестве индикаторов добавляются сульфит натрия и цитрат железа. Сульфитредуцирующие клостридии восстанавливают сульфит до сульфида, что приводит к образованию чёрного осадка в среде.

Состав

Состав и критерии эффективности среды соответствуют спецификациям ISO 6461-1:1986.

Конечный pH (при 25 °C): 7,2 ± 0,2.

Методика приготовления и анализа

Приготовление среды

1. Растворить 29,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. Непосредственно перед использованием добавить стерилизованный фильтром раствор, приготовленный путем смешивания равных объемов 4% (масс./об.) раствора сульфита натрия и 7% (масс./об.) раствора цитрата железа:
   • 0,5 мл раствора на 25 мл среды одинарной концентрации;
   • 0,4 мл и 2 мл соответственно на 10 мл и 50 мл среды двойной концентрации.
6. Тщательно перемешать.

Процедура анализа (согласно ISO 6461/1-1986)

1. Добавить 50 мл пробы воды к 50 мл полной среды двойной концентрации ИЛИ 1 мл пробы к 25 мл полной среды одинарной концентрации.
2. Инкубировать инокулированные флаконы при температуре 37 ± 1 °C в течение 44 ± 4 часов.

Технические характеристики

Контроль качества

Продуктивность

Культуральный ответ наблюдался после инкубации в анаэробной атмосфере при 36 ± 1 °C в течение 44 ± 4 часов с добавлением 4% (масс./об.) раствора сульфита натрия и 7% (масс./об.) раствора цитрата железа.

Специфичность

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 15–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и меры предосторожности

• Для полной идентификации микроорганизмов необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.
• При работе с образцами и культурами следует соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, защитная одежда, защита глаз и лица).
• Утилизация: использованные препараты и материалы, контактировавшие с пробами, должны быть подвергнуты автоклавированию или инсинерации в соответствии с лабораторными регламентами по обращению с инфекционными материалами.