Питательная среда HiMedia M549I-500G Дифференциальная усиленная клостридиальная среда производства HiMedia представляет собой порошковую среду массой 500 г для культивирования клостридий из проб воды. Среда применяется для выделения и подсчёта сульфитредуцирующих клостридий методом обогащения и наиболее вероятного числа; конечный pH составляет 7,2 ± 0,2.

Назначение и область применения

Среда рекомендована для культивирования клостридий из проб воды. Дифференциальный усиленный клостридиальный бульон применяют для:

• выделения сульфитредуцирующих клостридий из пищевых продуктов;
• подсчёта сульфитредуцирующих клостридий в воде методом многотрубочного посева;
• определения количества сульфитредуцирующих бактерий методом наиболее вероятного числа.

Состав и критерии эффективности среды соответствуют требованиям ISO 6461-1:1986, устанавливающего метод обнаружения и подсчёта спор сульфитредуцирующих анаэробов (клостридий) в воде методом обогащения в жидкой среде.

Тип образца

Образец: вода, пробы воды.

Состав

Состав среды:

Эквивалентен триптическому перевариванию мяса пептоном.

Эквивалентность компонентов

Экстракт HM## эквивалентен мясному экстракту.

Принцип действия и интерпретация

Дифференциальный усиленный клостридиальный агар первоначально был разработан для стимуляции роста из небольшого посевного материала и получения более высокого количества клостридий. Позднее среду применяли для развития вегетативных клеток при исследовании Clostridium perfringens.

Триптоза, экстракт HM, дрожжевой экстракт, крахмал и ацетат натрия обеспечивают микроорганизмы питательными веществами, необходимыми для бактериального метаболизма. Глюкоза является сбраживаемым углеводом и служит источником углерода и энергии. Гидрохлорид L-цистеина выполняет функцию восстановителя.

Сульфит натрия и цитрат железа добавляют в качестве индикаторной системы. Сульфитредуцирующие клостридии образуют сульфид из сульфита, что приводит к почернению среды.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 29,0 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,10 МПа) при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите приготовленную среду до 45–50 °C.
5. Непосредственно перед использованием приготовьте фильтр-стерилизованный раствор, смешав равные объёмы 4%-ного раствора сульфита натрия и 7%-ного раствора цитрата железа, где концентрации указаны в массово-объёмных процентах.
6. Добавьте 0,5 мл приготовленного раствора к 25 мл среды одинарной концентрации.
7. Для среды двойной концентрации добавьте соответственно 0,4 мл раствора к 10 мл среды или 2 мл раствора к 50 мл среды.
8. Тщательно перемешайте.

Методика работы с пробами воды

Согласно ISO 6461/1-1986:

1. Добавьте 50 мл пробы воды к 50 мл полной среды двойной концентрации.
2. Либо внесите 1 мл пробы в 25 мл полной среды одинарной концентрации.
3. Инкубируйте инокулированные флаконы при 37 ± 1 °C в течение 44 ± 4 ч.

Технические характеристики

Основные параметры

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M549I-500G
• Назначение изделия: питательная среда
• Физическая форма: порошок
• Масса: 500 г
• Происхождение: животное
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: ПЭВП (HDPE)
• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,00–7,40
• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 15–30 °C

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Приготовленная среда: прозрачный раствор светло-жёлтого цвета без осадка.

Реакция среды

Реакция определяется для водного раствора с концентрацией 2,9 % масс./об. при 25 °C.

• pH: 7,2 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,00–7,40

Культуральные характеристики

Продуктивность и специфичность оценивают после инкубации в анаэробной атмосфере при 36 ± 1 °C в течение 44 ± 4 ч с добавлением 4%-ного раствора сульфита натрия и 7%-ного раствора цитрата железа.

Продуктивность

Специфичность

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

Для полной идентификации микроорганизмов необходимо дополнительно провести биохимические и серологические исследования.

Эффективность среды ожидается при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных температурных условиях.

Условия хранения и срок годности

• Хранить сухую среду при 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Приготовленную среду хранить при 15–30 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия хранить продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон.
• Защищать порошок от образования комков, связанного с его гигроскопичностью.
• Неправильное хранение может привести к комкованию продукта.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывать ёмкость.
• Наилучшая эффективность среды обеспечивается при использовании в течение установленного срока годности.

Меры предосторожности

Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку. При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности в соответствии с действующими инструкциями. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать автоклавированием и/или сжиганием.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, должны быть обезз