HiMedia M549-100G Дифференциальная усиленная клостридиальная среда

Дифференциальная усиленная клостридиальная среда HiMedia M549-100G (производство HiMedia) предназначена для культивирования клостридий из проб воды. Среда используется для выделения сульфитредуцирующих клостридий из пищевых продуктов и их количественного определения в воде методом наиболее вероятного числа (MPN).

Принцип измерения и интерпретация

Среда разработана на основе методики Хирша и Гринстеда для инициации роста при малом объеме посевной дозы и получения более высокого титра клостридий. В дальнейшем данная основа применялась для развития вегетативных клеток Clostridium perfringens.

Компоненты среды выполняют следующие функции:

• Пептон, HM пептон B и экстракт дрожжей: обеспечивают основные питательные вещества для метаболизма бактерий.
• Крахмал и ацетат натрия: поддерживают рост микроорганизмов.
• Глюкоза: ферментируемый углевод, служит источником углерода и энергии.
• L-цистеин гидрохлорид: выступает в роли восстановителя.
• Сульфит натрия и цитрат железа (добавляются перед использованием): служат индикаторами.

Сульфитредуцирующие клостридии восстанавливают сульфит до сульфида, что приводит к образованию черного осадка в среде.

Состав

Состав, г/л:

Конечный pH (при 25 °C): 7,2 ± 0,2.

Методика приготовления и использования

Приготовление основы

1. Растворить 29 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревать до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 фунтов) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.

Добавление индикаторов перед использованием

Непосредственно перед применением в среду добавляют стерилизованный фильтром раствор, приготовленный путем смешивания равных объемов 4% (масса/объем) раствора сульфита натрия и 7% (масса/объем) раствора цитрата железа:

• Для 25 мл среды одинарной концентрации: добавить 0,5 мл раствора.
• Для 10 мл среды двойной концентрации: добавить 0,4 мл раствора.
• Для 50 мл среды двойной концентрации: добавить 2 мл раствора. После добавления тщательно перемешать.

Область применения и работа с образцами

• Тип образца: пробы воды.
• Сбор и обработка: сбор и обработка проб воды должны осуществляться в соответствии с действующими руководствами и местными стандартами.
• Ограничения: для окончательной идентификации микроорганизмов необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: гомогенный свободнотекущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-желтый прозрачный раствор без осадка.
• Реакция: pH 2,9% (масса/объем) водного раствора при 25 °C составляет 7,2 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются в анаэробной атмосфере при добавлении 4% (масса/объем) раствора сульфита натрия и 7% (масса/объем) цитрата железа после инкубации при 30–35 °C в течение 1 недели.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать бутыль для предотвращения образования комков.
• Хранение готовой среды: при температуре 15–25 °C.
• Утилизация: использованные или непригодные препараты подлежат безопасному удалению путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.

Меры предосторожности

• Перед открытием контейнера ознакомиться с этикеткой.
• Использовать средства индивидуальной защиты: защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.