HiMedia M463I-500G Триптонная вода

Сухая питательная среда HiMedia M463I-500G Триптонная вода для выявления продукции индола колиформными бактериями. Применяется для дифференциации микроорганизмов и определения наиболее вероятного числа (MPN) E. coli в пищевых продуктах; вес упаковки 500 г.

Принцип измерения

Триптонная вода используется для определения способности бактерий расщеплять аминокислоту триптофан до индола, который накапливается в среде. Ферментативный гидролизат казеина служит подходящим субстратом благодаря высокому содержанию триптофана.

Обнаружение индола осуществляется с помощью реагента Ковача или Эриха: индол взаимодействует с альдегидом, присутствующим в реагенте, образуя комплекс красного цвета в спиртовом слое. Спиртовой слой экстрагирует и концентрирует этот комплекс, что позволяет визуально зафиксировать положительную реакцию.

Область применения

Среда рекомендована стандартами ISO и APHA для дифференциации бактерий. В частности, Триптонная вода используется совместно с 2 % желчно-зелёным бульоном (M121) для определения наиболее вероятного числа (MPN) E. coli в пробах пищевых продуктов. Основанием для предварительного теста на E. coli служит рост и газообразование в среде M121, а также продукция индола в Триптонной воде после инкубации обеих сред при температуре 44 ± 1 °C.

Методика проведения анализа

1. Приготовление среды: растворить 25 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. При необходимости нагреть до полного растворения.
2. Стерилизация: разлить по пробиркам и стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа) в течение 15 минут.
3. Посев: инокулировать среду посевной дозой чистой культуры, выращенной в течение 18–24 часов.
4. Инкубация: выдержать пробирки при температуре 35 ± 2 °C в течение 18–24 часов.
5. Детекция: добавить непосредственно в пробирку 0,5 мл реагента на индол (R008) и перемешать.
6. Интерпретация: оставить пробирки в покое на 5–10 минут. Образование красного кольца в верхней части пробирки свидетельствует о продукции индола.

Технические характеристики

Состав, г/л:

• Конечный pH (при 25 °C): 7,5 ± 0,2
• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до жёлтого цвета
• Цвет и прозрачность готовой среды: жёлтый прозрачный раствор без осадка
• pH водного раствора (2,5 % мас./об. при 25 °C): 7,30–7,70

Дополнительные параметры:

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 24 часов с последующим добавлением 0,2–0,3 мл реагента Ковача (R008) в каждую пробирку.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухого вещества: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.