HiMedia M463I-500G Триптонная вода

Порошковая питательная среда HiMedia M463I-500G Триптонная вода с конечным pH 7,5±0,2 при 25 °C. Среда предназначена для выявления продукции индола колиформными бактериями; масса упаковки составляет 500 г, а для полной идентификации микроорганизмов требуется дополнительное биохимическое подтверждение.

Назначение

Триптонная вода применяется для выявления продукции индола колиформными бактериями и как вспомогательная среда для дифференциации микроорганизмов по способности образовывать индол.

Среду используют совместно с 2%-ным желчно-зелёным бульоном Brilliant Green Bile Broth 2% (M121) для определения наиболее вероятного числа (MPN) Escherichia coli в пищевых образцах. Для предварительного теста на E. coli учитывают рост и газообразование в среде M121, а также образование индола в триптонной воде после инкубации обеих сред при 44±1 °C.

Тест на индол рекомендуется применять как вспомогательный метод дифференциации микроорганизмов по продукции индола. Для окончательной идентификации микроорганизмов необходимы дополнительные биохимические подтверждающие исследования.

Состав

• Конечный pH: 7,5±0,2 при 25 °C.
• Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами рабочих характеристик.

Принцип выявления индола

Триптонная вода рекомендована APHA и комитетом ISO для выявления продукции индола колиформными бактериями, что является важным признаком при дифференциации бактерий. Модификация триптонной воды M463I рекомендована комитетом ISO для той же цели.

Метод основан на способности определённых бактерий разлагать аминокислоту триптофан с образованием индола, который накапливается в среде. Ферментативный гидролизат казеина служит субстратом для образования индола благодаря высокому содержанию триптофана. Некоторые микроорганизмы расщепляют триптофан с помощью ферментов, катализирующих образование индола посредством гидролитической активности.

Образовавшийся индол выявляют реактивом Ковача или реактивом Эрлиха. Индол взаимодействует с альдегидом, содержащимся в реактиве, с образованием красного окрашивания в спиртовом слое. Спиртовой слой экстрагирует и концентрирует красный комплекс.

Приготовление среды

1. Растворите 25 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте раствор для полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленную среду по пробиркам.
4. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов и температуре 121 °C в течение 15 мин. Давление 15 фунтов соответствует примерно 0,103 МПа.

Методика определения индола

1. Инокулируйте среду посевным материалом из чистой культуры, выращенной в течение 18–24 ч.
2. Инкубируйте пробирки при 35±2 °C в течение 18–24 ч.
3. Добавьте непосредственно в пробирку 0,5 мл реактива для определения индола R008 и перемешайте.
4. Оставьте пробирки на 5–10 мин.
5. Образование красного кольца в верхней части пробирки указывает на продукцию индола.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Приготовленная среда

Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор жёлтого цвета без осадка.

Реакция: реакция водного раствора концентрацией 2,5 % (м/о) при 25 °C.

pH: 7,30–7,70.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 24 ч. После инкубации в каждую пробирку добавляют 0,2–0,3 мл индольного реактива Ковача R008.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Наименование: Триптонная вода
• Модель/артикул: M463I-500G
• Назначение изделия: среда
• Форма: порошок
• Масса: 500 г
• Происхождение: животное
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Конечный pH: 7,5±0,2 при 25 °C
• Диапазон pH: 7,30–7,70
• Температура хранения сухой среды: ниже 30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Температурный диапазон, указанный в локальных характеристиках: 10–30 °C
• Срок хранения: использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке

Условия хранения

Храните сухую среду в плотно закрытом контейнере при температуре ниже 30 °C. Приготовленную среду храните при 2–8 °C. Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.