HiMedia M463AI-500G Пептонная вода, не содержащая индол

Сухая питательная среда HiMedia M463AI-500G Пептонная вода, не содержащая индол, предназначенная для выявления и количественного определения предполагаемой Escherichia coli. Состав и критерии эффективности среды соответствуют спецификациям стандарта ISO 7251:2005.

Принцип измерения

Пептонная вода рекомендуется комитетом ISO для определения способности колиформ производить индол, что является ключевым признаком при дифференциации бактерий. Метод основан на способности некоторых микроорганизмов расщеплять аминокислоту триптофан до индола, который накапливается в среде.

Триптон служит эффективным субстратом для продукции индола благодаря высокому содержанию триптофана. Определенные организмы расщепляют триптофан с помощью ферментов, которые посредством гидролитической активности инициируют образование индола. Образовавшийся индол обнаруживается с помощью реагента Ковача или Эрилиха: индол взаимодействует с альдегидом, присутствующим в реагенте, образуя красный комплекс в спиртовом слое, который экстрагирует и концентрирует краситель.

Область применения

Среда используется для анализа следующих типов образцов:

• Пищевые продукты.
• Корма для животных.

Пептонная вода применяется совместно с 2 % бульоном (M1271) для определения наиболее вероятного числа (MPN) E. coli в пробах воды и пищевых продуктов.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Растворите 15 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости прогрейте раствор для полного растворения компонентов.
3. Разлейте среду в пробирки или колбы.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа) в течение 15 минут.

Процедура определения индола

1. Инокулируйте среду посевной дозой чистой культуры, выращенной в течение 18–24 часов.
2. Инкубируйте пробирки при температуре 35 $\pm$ 2 °C в течение 18–24 часов.
3. Добавьте непосредственно в пробирку 0,5 мл реагента на индол (R008) и перемешайте.
4. Выдержите пробирки в состоянии покоя в течение 1 минуты.
5. Результат: образование красного кольца в верхней части пробирки указывает на продукцию индола.

Технические характеристики

Состав (согласно ISO 7251:2005)

Состав, г/л:

Конечный pH (после стерилизации): 7,3 $\pm$ 0,2.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: прозрачный раствор желтого цвета без осадка.
• Реакция: pH 7,3 $\pm$ 0,2 (для 1,5 % водного раствора при 25 °C).
• Диапазон pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Характеристики определяются после инкубации при 44 °C в течение 48 $\pm$ 2 ч с последующим добавлением 0,5 мл реагента Ковача (R008).

* Соответствующие номера WDCM. Примечание: Klebsiella aerogenes ранее именовалась Enterobacter aerogenes.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 15–25 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания.

Ограничения и меры предосторожности

• Для полной идентификации микроорганизмов требуется дополнительное биохимическое подтверждение.
• При работе с образцами и культурами следует соблюдать стандартные правила микробиологической лабораторной практики.
• Использовать средства индивидуальной защиты: защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица.
• Контаминированные материалы перед утилизацией должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации.