HiMedia M463AI-500G Пептонная вода, не содержащая индол

Питательная микробиологическая среда HiMedia M463AI-500G Пептонная вода, не содержащая индол, массой 500 г. Среда предназначена для выявления и количественного определения предположительных Escherichia coli в пищевых продуктах и кормах, при этом для полной идентификации микроорганизмов требуется дополнительное биохимическое подтверждение.

Назначение

Среда рекомендована для выявления и количественного определения предположительных Escherichia coli. Состав и критерии эффективности соответствуют требованиям ISO 7251:2005 к пептонной воде, не содержащей индол.

Тип образца

• Пищевые продукты
• Корма для животных

Состав

Состав среды соответствует спецификации ISO 7251:2005 для пептонной воды, не содержащей индол.

• Конечный pH после стерилизации: 7,3 ± 0,2
• Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.
• Триптон: ферментативный перевар казеина.

Принцип измерения и интерпретация

Пептонная вода применяется для выявления образования индола кишечными колиформными бактериями. Образование индола является важным признаком при дифференциации бактерий.

Метод основан на способности некоторых бактерий разлагать аминокислоту триптофан с образованием индола, который накапливается в питательной среде. Триптон служит субстратом для образования индола благодаря высокому содержанию триптофана. Ферменты некоторых микроорганизмов катализируют гидролитическое расщепление триптофана с образованием индола.

Образовавшийся индол выявляют с помощью реактива Ковача или реактива Эрлиха. Индол взаимодействует с альдегидом, содержащимся в реактиве, с образованием красного окрашивания в спиртовом слое. Спиртовой слой экстрагирует и концентрирует красный окрашенный комплекс.

Триптонная вода используется совместно с бульоном 2 % (M1271) для определения наиболее вероятного числа (MPN) E. coli в пробах воды и пищевых продуктов. Пробирки, в которых наблюдаются непрозрачность, помутнение или образование газа в жидкой селективной обогатительной среде, а субкультуры которых образовали газ в бульоне EC и индол в пептонной воде при 44 °C, считают содержащими предположительные Escherichia coli.

Методика проведения анализа

Выявление индола

1. Инокулируйте среду культурой из чистой культуры, выращенной в течение 18–24 ч.
2. Инкубируйте пробирки при температуре 35 ± 2 °C в течение 18–24 ч.
3. Добавьте непосредственно в пробирку 0,5 мл реактива для выявления индола (R008).
4. Перемешайте содержимое пробирки.
5. Выдержите пробирку в течение 1 мин.
6. Образование красного кольца в верхней части пробирки указывает на образование индола.

Исследование индола рекомендуется использовать как вспомогательный метод дифференциации микроорганизмов по способности образовывать индол.

Подготовка и стерилизация среды

1. Растворите 15 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте раствор для полного растворения среды.
3. Разлейте среду в пробирки или колбы в требуемом объёме.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.

Контроль качества

Внешний вид

Кремовый или жёлтый однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Жёлтый прозрачный раствор без осадка.

Реакция среды

• Условия определения: водный раствор концентрацией 1,5 % масс./об. при 25 °C.
• pH: 7,3 ± 0,2.

Диапазон pH

• pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 44 °C в течение 48 ч ± 2 ч. После инкубации в каждую пробирку добавляют 0,5 мл индольного реактива Ковача (R008).

• *: соответствующие номера WDCM.
• #: ранее — Enterobacter aerogenes.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам и местным стандартам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

Для полной идентификации микроорганизмов необходимо дополнительное биохимическое подтверждение.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения сухой среды: плотно закрытая ёмкость.
• Температура хранения приготовленной среды: 15–25 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить в сухом виде для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Ненадлежащее хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухая проветриваемая зона, защищённая от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования ёмкость необходимо плотно закрывать.
• Для сохранения рабочих характеристик среду следует использовать в течение установленного срока годности.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные соответствующими руководствами.
• Требования безопасности приведены в индивидуальных паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M463AI-500G
• Назначение изделия: питательная микробиологическая среда
• Форма выпуска: сухой сыпучий порошок
• Масса: 500 г
• Рабочая концентрация при приготовлении: 15 г/л
• Конечный pH после стерилизации: 7,3 ± 0,2
• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 15–25 °C
• Метод стерилизации: автоклавирование при 121 °C в течение 15 мин
• Давление при автоклавировании: 15 фунтов (≈0,103 МПа)
• Объём растворителя для приготовления: 1000 мл очищенной или дистиллированной воды на 15 г среды

Отличие по назначению

В отличие от универсальных пептонных сред, M463AI-500G предназначена для выявления образования индола и применяется в схеме определения наиболее вероятного числа E. coli в воде и пищевых продуктах.