Среда ISP №2 HiMedia M424-500G (уп/500 гр)

Питательная среда Среда ISP №2 HiMedia M424-500G (уп/500 гр) — сухая порошкообразная среда в упаковке из полиэтилена высокой плотности для выделения и культивирования дрожжей, плесневых грибов и других кислотоустойчивых микроорганизмов. Среда применяется для клинических, пищевых и молочных образцов; рабочий диапазон pH составляет 6,00–6,40, а для повышения селективности среду подкисляют до pH 3,0–4,0.

Назначение и область применения

Среда ISP №2 HiMedia M424-500G, также обозначаемая как солодово-дрожжевой агар (YM Agar), предназначена для выделения и культивирования:

• дрожжей;
• плесневых грибов;
• других кислотоустойчивых микроорганизмов.

Тип образцов:

• клинические образцы, включая соскобы кожи;
• пищевые образцы;
• молочные образцы.

Среда разработана по формуле Wickerham для выделения и культивирования дрожжей, плесневых грибов и других кислотоустойчивых микроорганизмов. Методика также рекомендована Американской ассоциацией общественного здравоохранения (APHA) для микробиологического исследования пищевых продуктов.

Состав

Содержание компонентов приведено в г/л.

Конечный pH при 25 °C: 6,2 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных эксплуатационных параметров.

Принцип действия и интерпретация

Фунгистатические компоненты, включая пропионат натрия и дифенил, добавляют в солодово-дрожжевой агар для подавления плесневых грибов. Это позволяет проводить количественный учёт дрожжей в смешанной микробной популяции.

Компоненты среды выполняют следующие функции:

• пептон служит источником углерода, азота, аминокислот с длинной углеродной цепью и других необходимых питательных веществ;
• дрожжевой экстракт обеспечивает поступление витаминов группы B и других факторов роста;
• солодовый экстракт служит дополнительным источником углерода;
• декстроза является источником углеводов и энергии.

Для повышения селективности среду можно подкислять стерильной 10%-ной молочной кислотой, 10%-ной соляной кислотой, винной кислотой или 10%-ной лимонной кислотой. В качестве альтернативы допускается добавление антибиотиков: пенициллина в концентрации 20 ЕД/мл или стрептомицина до конечной концентрации 40 мкг/мл.

Подкисленную агаризованную среду нельзя повторно нагревать.

Методика приготовления

1. Приготовьте суспензию из 20,5 г сухой среды в 490 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Для приготовления селективной среды асептически подкислите среду до pH 3,0–4,0, добавив содержимое 1 флакона 10%-ного раствора молочной кислоты FD095.
5. После добавления кислоты не нагревайте среду.
6. Охладите среду до 45–50 °C.
7. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Обогащение и выделение дрожжей

Для обогащения дрожжей Wickerham рекомендовал использовать дрожжевой солодовый бульон M425. На поверхность инокулированного бульона наносят слой стерильного парафинового масла толщиной около 1 см. После появления роста культуру пересевают штриховым методом на солодово-дрожжевой агар для получения изолированных колоний ферментативных видов.

Для выделения как ферментативных, так и окислительных штаммов подкисленный дрожжевой солодовый бульон M425 помещают на ротационный шейкер на 1–2 сут. Такой режим способствует развитию дрожжевых клеток и предотвращает споруляцию плесневых грибов. После этого дрожжи выделяют штриховым посевом на солодово-дрожжевой агар.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок кремового или бежевого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 2,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.

Реакция среды

Реакция 4,1%-ного водного раствора при 25 °C: pH 6,2 ± 0,2.

Диапазон pH: 6,00–6,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 25–30 °C в течение 40–72 ч.

Обозначения:

• # — ранее организм был известен как Aspergillus niger;
• * — соответствующие номера WDCM.

Обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными методическими рекомендациями.

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с действующими рекомендациями.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

• Разные микроорганизмы имеют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать неодинаковые характеристики роста на этой среде.
• Каждая серия среды проверена на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа.
• При использовании среды для конкретного микроорганизма, не указанного в сертификате анализа, пользователю рекомендуется самостоятельно валидировать пригодность среды с учётом специфических требований задачи.

Эксплуатационные характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных температурных условиях.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде в плотно закрытом флаконе.
• Плотно закрывайте флакон после каждого использования для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности продукта.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• Эксплуатационные характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Требования безопасности

Среда предназначена для применения in vitro и только для профессионального использования.

При работе соблюдайте следующие требования:

• перед открытием контейнера прочитайте маркировку;
• используйте защитные перчатки;
• носите защитную одежду;
• применяйте средства защиты глаз и лица;
• соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами;
• при работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным рекомендациям;
• требования безопасности уточняйте в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов среды посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Комплект поставки

• Среда ISP №2 HiMedia M424-500G, 500 г.

Сравнительный контекст

В отличие от некислых вариантов дрож