Среда для Rhizobium spp. HiMedia M408-500G (уп/500 гр)

Питательная микробиологическая среда «Среда для Rhizobium spp. HiMedia M408-500G (уп/500 гр)» с конечным pH 6,8 ± 0,2. Среда предназначена для выделения и культивирования маннитол-положительных видов Rhizobium, включая крупномасштабное производство препаратов для бобовых растений, с инкубацией при 25–30 °C до 4 суток.

Назначение и область применения

Среда HiMedia M408 используется для:

• выделения Rhizobium из корневых клубеньков бобовых растений;
• культивирования маннитол-положительных видов Rhizobium;
• поддержания культур Rhizobium с добавлением дополнительного 1 % маннитола согласно требованиям ATCC;
• получения посевного материала для крупномасштабного производства препаратов для бобовых растений;
• переноса инокулята из агаровых скошенных культур в колбы-инокуляторы и последующего культивирования в малом посевном ферментёре.

Состав

Состав, г/л:

Конечный pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных параметров эксплуатационных характеристик среды.

Принцип действия и интерпретация

Среда содержит фосфатные и хлоридные соли, обеспечивающие буферирование изменений pH и осмотических изменений.

• Дрожжевой экстракт обеспечивает азотистые питательные вещества.
• Маннитол служит источником энергии.
• Сульфат магния обеспечивает необходимые ионы.

Инокулят переносят со скошенных агаровых поверхностей в колбы-инокуляторы, содержащие среду для Rhizobium. После 4 суток роста культуру из колб-инокуляторов переносят в малый посевной ферментёр. На этой стадии среда используется для крупномасштабного производства.

Методика выделения Rhizobium из корневых клубеньков

1. Выберите здоровый розоватый клубенёк на стержневом корне бобового растения.
2. Осторожно вырежьте клубенёк.
3. Проведите поверхностную стерилизацию клубенька в течение 5 мин.
4. Промойте клубенёк растворителями, такими как этанол, и другими аналогичными средствами.
5. Раздавите клубенёк стерильной стеклянной палочкой в небольшом объёме стерильной воды.
6. Выполните последовательные серийные разведения для получения разреженных проб с отдельными различимыми колониями.
7. Нанесите разведения на среду для Rhizobium.
8. Инкубируйте посевы при 25–30 °C до 4 суток.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 31,8 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин; давление при стерилизации — 15 фунтов, примерно 0,103 МПа.
4. Тщательно перемешайте приготовленную среду.
5. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный легко сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 2,0 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель жёлтого цвета.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 3,18 % масс./об. при 25 °C.
• pH реакционной среды: 6,8 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 25–30 °C в течение не более 4 суток.

Технические характеристики

• Назначение изделия: среда.
• Фасовка: 500 г.
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709.
• Конечный pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2.
• Расход среды: 31,8 г на 1000 мл воды.

Условия хранения и срок годности

• Условия хранения сухой среды: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Условия хранения приготовленной среды: при 2–8 °C.
• Срок использования: до истечения срока годности, указанного на этикетке.

Техническое отличие от аналогичных сред

Среда сочетает маннитол как источник энергии, дрожжевой экстракт как источник азотистых питательных веществ и буферную систему на основе фосфатных и хлоридных солей; для выделения Rhizobium применяется инкубация при 25–30 °C до 4 суток.