Питательная среда HiMedia M395I-100G Глюкозная OF среда предназначена для определения окислительного и ферментативного метаболизма углеводов у грамотрицательных бактерий. Применяется при микробиологическом исследовании пищевых образцов, включая мясо и мясные продукты; приготовленная среда хранится при 2–8 °C.

Назначение и область применения

Глюкозная OF-среда применяется для определения окислительного и ферментативного метаболизма углеводов у грамотрицательных бактерий.

Среда предназначена для:

• таксономических исследований семейства Enterobacteriaceae;
• микробиологического анализа пищевых образцов;
• исследования мяса и мясных продуктов;
• определения характера утилизации глюкозы: окислительного при доступе воздуха и ферментативного при его исключении;
• оценки подвижности бактерий и распределения кислоты, образующейся на поверхности среды.

Состав и критерии эффективности среды соответствуют требованиям ISO 21528-1:2017, ISO 21528-2:2017, ISO/TS 11059 и ISO 11133:2014/Amd.2:2020.

Состав

Состав, г/л:

Триптон эквивалентен ферментативному гидролизату казеина.

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия установленным параметрам эффективности.

Технические характеристики

• Назначение изделия: среда
• Масса: 100 г
• Конечный pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2
• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C

Приготовление среды

1. Суспендируйте 20,38 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Разлейте среду по пробиркам.
4. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин и давлении примерно 0,103 МПа (15 psi).
5. Непосредственно перед использованием прогрейте среду на кипящей водяной бане или в потоке пара в течение 15 мин для удаления кислорода.
6. Быстро охладите среду до температуры инкубации.

Принцип измерения и интерпретация

Среда Hugh и Leifson разработана для изучения окислительного и ферментативного метаболизма углеводов у грамотрицательных бактерий. Этот критерий используется в таксономических исследованиях Enterobacteriaceae. Глюкоза является основным углеводом, применяемым в базовой OF-среде. Глюкозная OF-среда рекомендована комитетом ISO.

Некоторые микроорганизмы могут метаболизировать другие углеводы, даже если они не способны утилизировать декстрозу. Разложение углевода с образованием кислоты определяется по изменению цвета индикатора pH — бромтимолового синего: при подкислении среды индикатор изменяет цвет на жёлтый.

• Окислительная утилизация происходит при контакте среды с воздухом.
• Ферментативная утилизация происходит при исключении контакта с воздухом.

Триптон обеспечивает бактерии необходимыми источниками углерода и азота, витаминами и другими компонентами, требуемыми для роста. Фосфат выполняет функцию буфера. Низкая концентрация агара определяет подвижность бактерий и способствует равномерному распределению кислоты, образующейся на поверхности среды.

Бромтимоловый синий используется как индикатор pH. Низкое содержание агара позволяет определять подвижность и способствует равномерному распределению кислоты, образующейся на поверхности среды.

Подвижность проявляется как диффузная зона распространения роста от линии посева. Неподвижные микроорганизмы растут вдоль линии посева.

Тип образцов

• Пищевые образцы: мясо и мясные продукты.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные действующими руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы предъявляют неодинаковые требования к условиям роста и могут демонстрировать различные характеры роста на этой среде.
2. Для подтверждения результата необходимо выполнить дополнительные биохимические тесты.

Эффективность среды

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно сыпучий порошок от кремового до зеленовато-жёлтого цвета.

Гелеобразование

Полутвёрдая среда, сопоставимая с 0,3%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В пробирках образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель зелёного цвета.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 2,03 % мас./об. при 25 °C:

• pH: 6,8 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,60–7,00

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч. Анаэробные условия создают покрытием среды минеральным маслом.

* Соответствующие номера