Среда Хью-Лейфсона для теста ОФ HiMedia M395-500G (уп/500 гр)

Дифференциальная питательная среда Хью-Лейфсона для теста ОФ HiMedia M395-500G (уп/500 г). Применяется для дифференциации грамотрицательных бактерий из клинических и неклинических образцов на основе их ферментативного и окислительного метаболизма углеводов; соответствует ГОСТ Р 52814-2007.

Принцип измерения и интерпретация

Среда разработана для изучения окислительного и ферментативного метаболизма углеводов грамотрицательными бактериями, что является важным критерием при таксономическом исследовании семейства Enterobacteriaceae.

Триптон обеспечивает необходимые углерод, азот и витамины для роста бактерий. Фосфат служит буфером, а низкая концентрация агара позволяет определять подвижность микроорганизмов и способствует равномерному распределению вырабатываемой кислоты на поверхности среды. Бромтимоловый синий выступает в роли pH-индикатора: при расщеплении углеводов до кислоты цвет среды меняется с зеленого на желтый.

Интерпретация результатов: Для анализа используют две пробы с одним и тем же углеводом: одна трубка остается открытой (аэробные условия), вторая перекрывается стерильным минеральным маслом для исключения кислорода (анаэробные условия).

• Ферментативный метаболизм: кислая реакция (пожелтение) наблюдается в обеих трубках (открытой и закрытой).
• Окислительный метаболизм: кислая реакция наблюдается только в открытой трубке; в закрытой трубке отмечается слабый рост без изменения цвета.
• Отсутствие метаболизма: в закрытой трубке цвет не меняется, в открытой может наблюдаться щелочная реакция.

Подвижность микроорганизмов определяется по диффузной зоне распространения от линии инокуляции; неподвижные организмы растут строго вдоль линии посева.

Методика проведения анализа

1. Приготовление базовой среды:
   • Растворить 9,38 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
   • Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
   • Разлить по 100 мл в емкости и стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
2. Добавление углеводов:
   • В первую порцию 100 мл стерильной базовой среды асептически добавить 10 мл стерильного 10 % раствора декстрозы.
   • Во вторую порцию 100 мл добавить 10 мл стерильного 10 % раствора лактозы.
   • В третью порцию 100 мл добавить 10 мл стерильного 10 % раствора сахарозы.
3. Посев:
   • Перемешать и асептически разлить по 5 мл в стерильные пробирки (в двух экземплярах для каждой пробы).
   • Произвести инокуляцию методом укольного посева.
4. Инкубация:
   • Одну из двух пробирок с каждым углеводом перекрыть 2 мл стерильного минерального масла.
   • Инкубировать при температуре 35–37 °C в течение 18–48 часов или более.
   • Считывать результаты через 48 часов.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 6,8 $\pm$ 0,2
• Внешний вид: порошок от кремового до зеленовато-желтого цвета, однородный, свободно текущий
• Свойства геля: полутвердый (сопоставим с 0,2 % агаровым гелем)
• Цвет и прозрачность готовой среды: зеленый, прозрачный или слегка опалесцирующий гель
• Диапазон pH: 6,60–7,00
• Происхождение компонентов: животное
• Тип продукта: регулярный
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)

Культуральные характеристики

Результаты наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 часов.

Область применения и ограничения

Среда используется для анализа изолированных микроорганизмов из клинических и неклинических проб.

Ограничения и дополнения:

• Поскольку среда зависит от pH, необходимо контролировать этот параметр.
• Для обеспечения роста некоторых требовательных организмов среду можно дополнить 2 % сыворотки или 0,1 % экстракта дрожжей.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухого порошка: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков.
• Утилизация: использованные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации.

Дополнительная информация

• Сертификат: ФСЗ 2009/03705
• Назначение: дифференциальная среда для микробиологического анализа.