HiMedia M378-100G MIO среда (Подвижность-Индол-Орнитин)

Дифференциально-диагностическая среда HiMedia M378-100G MIO (Подвижность-Индол-Орнитин) для идентификации семейства Enterobacteriaceae. Позволяет одновременно определить подвижность микроорганизмов, активность орнитиндекарбоксилазы и продукцию индола в одной пробирке.

Область применения

Среда рекомендуется для идентификации бактерий семейства Enterobacteriaceae на основании анализа их подвижности, способности к декарбоксилированию орнитина и синтезу индола. Применяется для анализа изолированных микроорганизмов из клинических и неклинических образцов.

Принцип измерения и интерпретация

MIO (Motility Indole Ornithine Medium) объединяет три биохимических теста в одной пробирке:

1. Подвижность: определяется макроскопически по диффузному распространению роста от линии инокуляции (помутнение среды) или микроскопически (метод «висячей капли»).
2. Продукция индола: оценивается способность организма расщеплять триптофтофан до индола с помощью фермента триптофаназы. При добавлении реагента Ковакса индол вступает в реакцию с красителем в спиртовом слое, образуя красное кольцо.
3. Декарбоксилирование орнитина: если микроорганизм обладает специфическим ферментом декарбоксилазы, орнитин превращается в путресцин (амин). Это приводит к повышению pH среды (защелачиванию), в результате чего индикатор бромкрезоловый пурпурный меняет цвет с желтого на пурпурный.

Особенности интерпретации:

• Организм ферментирует декстрозу с образованием кислоты $\rightarrow$ индикатор меняет цвет с пурпурного на желтый.
• Положительная реакция на орнитиндекарбоксилазу $\rightarrow$ цвет среды меняется с желтого на пурпурный по всему объему.
• Отрицательная реакция на декарбоксилазу $\rightarrow$ среда остается желтой или желтой с пурпурной полосой у поверхности.
• Важно: результаты по подвижности и декарбоксилированию считываются до добавления реагента Ковакса, так как последний окрашивает среду в желтый цвет, что может привести к ошибочной интерпретации положительного теста на декарбоксилазу (пурпурный цвет) как отрицательного.

Состав

Состав, г/л:

Конечный pH (при 25 °C): 6,5 $\pm$ 0,2.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендировать 31,02 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Разлить по пробиркам по 5 мл.
4. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
5. Охладить пробирки в вертикальном положении.

Процедура анализа

Тест-культуры инокулируют в столбик среды (stab-inoculation). Инкубация проводится при температуре 35–37 °C в течение 40–48 часов.

Технические характеристики

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать бутылку для предотвращения комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре 15–30 °C.
• Требования: хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и меры предосторожности

• Из-за вариаций в питательном составе некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост.
• Только для профессионального использования в лабораторной диагностике in vitro.
• При работе с клиническими образцами соблюдать стандартные меры предосторожности и правила микробиологической безопасности.
• Контаминированные материалы перед утилизацией подлежат обязательному автоклавированию или сжиганию.