Индол-нитратная среда HiMedia M364-500G (уп/500 гр)

Диагностическая индол-нитратная среда HiMedia M364-500G (триптон-нитратная среда) производства HiMedia для идентификации микроорганизмов. Применяется для определения способности бактерий восстанавливать нитрат и образовывать индол; сертификат ФСЗ 2009/03705.

Принцип измерения

Среда благодаря своему питательному составу поддерживает рост аэробов, микроаэрофилов, а также факультативных и облигатных анаэробов. Она служит для одновременного обнаружения продукции индола и восстановления нитратов у широкого спектра микроорганизмов.

Триптон содержит триптофан, который под воздействием определенных микроорганизмов расщепляется с образованием индола. Нитрат калия выступает в качестве субстрата для определения способности микроорганизмов восстанавливать нитраты.

Область применения

Среда используется для анализа следующих типов образцов:

• клинические образцы;
• образцы пищевых продуктов и молочной продукции;
• пробы воды.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Суспендируйте 25,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Разлейте среду по пробиркам или колбам.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
5. Перед использованием среду в пробирках следует прокипятить в течение 2 минут и охладить без перемешивания.

Процедура тестирования

Для анализа используют дубликаты пробирок с индол-нитратной средой, которые инокулируют и инкубируют в течение необходимого времени.

Определение восстановления нитратов:

1. В пробу добавляют по 0,5 мл сульфаниловой кислоты (R015) и $\alpha$-нафтиламина (R009).
2. Появление розового окрашивания указывает на восстановление нитрата (реакция обусловлена наличием нитрита, образовавшегося в результате восстановления нитрата).
3. Если окрашивание не появилось, в пробирку добавляют щепотку цинковой пыли.
4. Появление розового цвета после добавления цинка указывает на то, что нитрат не был восстановлен.
5. Если после добавления цинка цвет не изменился, нитрат был восстановлен до аммиака.

Определение продукции индола:

1. В пробу добавляют реагент Ковакса (R008) или реагент Эрлиха (R005).
2. После осторожного перемешивания образование ярко-красного кольца в слое реагента свидетельствует о положительном результате теста на индол.

Ограничения применения

• Для анализа должны использоваться изолированные микроорганизмы в возрасте 18–24 часа.
• Индол-нитратная среда не рекомендуется для определения продукции индола у колиформных и других энтеробактерий, так как они восстанавливают нитрат до нитрита, что препятствует обнаружению индола.
• Среду не следует использовать для определения продукции индола представителями семейства Enterobacteriaceae.

Технические характеристики

• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до желтого цвета
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-янтарный, прозрачный или слегка опалесцирующий гель (в пробирках формируется в виде столбика)
• pH готовой среды (при 25 °C): 7,2 $\pm$ 0,2
• Диапазон pH: 7,00–7,40
• Желирование: полутвердый гель, сопоставим с 0,1% агаровым гелем
• Происхождение компонентов: животное
• Форма выпуска: порошок
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)

Состав (г/л)

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухого порошка: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение приготовленной среды: при температуре 15–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

• Только для профессионального использования в диагностике in vitro.
• При работе использовать защитные перчатки, спецодежду и средства защиты глаз/лица.
• Соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности при работе с клиническими образцами и культурами.
• Утилизация: использованные среды и материалы, контактировавшие с клиническими образцами, подлежат деконтаминации путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с лабораторными регламентами.