Питательная среда HiMedia M2095I-500G VP среда для листерий — порошковая среда для дифференциации видов Listeria по VP-тесту. Применяется для анализа пищевых продуктов, кормов для животных и образцов окружающей среды в зонах производства и обращения пищевой продукции; хранение продукта — при 10–30 °C.

Назначение

Среда предназначена для дифференциации Listeria от других видов по результатам теста Фогеса—Проскауэра (VP) при исследовании:

• пищевых продуктов;
• кормов для животных;
• образцов окружающей среды в зонах производства и обращения пищевой продукции.

Состав и критерии эффективности среды соответствуют требованиям ISO 11290-1:2017, ISO 11290-2:2017 и ISO 11133:2014 / Amd.2:2020 (E).

Состав

Среда M2095I VP для листерий:

• Конечный pH при 25 °C: 6,9 ± 0,2.
• Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных показателей эффективности.

• Эквивалент ферментативного переваривания тканей животного происхождения.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию из 17,0 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Разлейте среду в пробирки по 3 мл.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.

Принцип и интерпретация

Метиловый красный и тест Фогеса—Проскауэра относятся к биохимическим тестам, применяемым для идентификации бактериальных видов. Первоначально эти тесты были исследованы Фогесом и Проскауэром, а позднее Кларком и Лабсом для дифференциации представителей группы кишечной палочки—аэрогенов. Оба теста основаны на выявлении специфических продуктов распада углеводов в процессе метаболизма.

Среда используется для дифференциации видов Listeria от других бактерий по VP-тесту при анализе пищевых продуктов, кормов для животных и образцов окружающей среды в зонах производства и обращения пищевой продукции.

Функции компонентов:

• Пептон обеспечивает азотистые и углеродистые соединения, аминокислоты с длинной цепью, витамины и другие необходимые для роста питательные вещества.
• Декстроза является ферментируемым углеводом.
• Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды.

Методика проведения VP-теста

1. Разлейте приготовленную среду по 3 мл в пробирки.
2. Инокулируйте среду исследуемой культурой.
3. Инкубируйте при 37 °C в течение 22–26 ч.
4. После инкубации добавьте 0,6 мл реагента Барритта A и 0,2 мл реагента Барритта B.
5. Инкубируйте в течение 15 мин – 1 ч.
6. Сильное красное окрашивание указывает на положительную реакцию.

Положительная реакция также характеризуется образованием розового или ярко-красного слоя в течение 15 мин после добавления требуемых реагентов и встряхивания.

Тип образцов

Используются чистые изоляты, полученные из:

• пищевых продуктов;
• кормов для животных;
• образцов окружающей среды в зонах производства и обращения пищевой продукции.

Отбор и обращение с образцами

При отборе и обработке пищевых продуктов, кормов для животных и образцов окружающей среды необходимо применять соответствующие методы в соответствии с установленными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры предосторожности

• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения метода

Для подтверждения результата необходимо выполнять дополнительные биохимические тесты в комплексе с VP-тестом.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор светло-жёлтого цвета без осадка.
• Реакция: реакция водного раствора концентрацией 1,7 % масс./об. при 25 °C.
• pH: 6,70–7,10.
• Номинальное значение pH: 6,9 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 30–32 °C в течение 18–48 ч.

• • Соответствующие номера WDCM.
• $ После добавления реагента Барритта A и реагента Барритта B.
• $ Образование розового или ярко-красного слоя в течение 15 мин после добавления необходимых реагентов и встряхивания.
• ^ Розовый или ярко-красный слой не образуется.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia.
• Назначение изделия: среда.
• Масса: 500 г.
• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Конечный pH при 25 °C: 6,9 ± 0,2.

Хранение и срок годности

• Храните сухую среду при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Приготовленную среду храните при температуре 2–8 °C.
• Используйте продукт до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте контейнер.
• Эффективность продукта обеспечивается при использовании в течение установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Отличие условий оценки

Методика проведения VP-теста предусматривает инкубацию при 37 °C в течение 22–26 ч, тогда как культуральные характеристики в таблице контроля качества приведены для инкубации при 30–32 °C в течение 18–48 ч.