HiMedia M2088I-500G Солевая пептонная вода с 10% NaCl

Сухая питательная среда HiMedia M2088I-500G «Солевая пептонная вода с 10% NaCl» для проведения тестов на солеустойчивость видов Vibrio. Применяется для селективного обогащения и дифференциации V. parahaemolyticus, V. vulnificus и V. alginolyticus в образцах пищевых продуктов, кормов для животных и проб окружающей среды; состав и критерии эффективности соответствуют стандарту ISO 21872-1:2017.

Принцип измерения

Среда предназначена для выделения видов Vibrio из пищевых и экологических проб. Благодаря высокой концентрации хлорида натрия среда позволяет дифференцировать V. parahaemolyticus, V. vulnificus и V. alginolyticus от других видов Vibrio на основании их способности переносить высокую соленость.

• Пептон: обеспечивает необходимые азотсодержащие соединения, углерод, витамины и микроэлементы, необходимые для роста бактерий.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс среды и выступает в роли селективного ингибирующего агента для других микроорганизмов.

Большинство видов Vibrio способны расти в данной среде, за исключением Vibrio furnissii (негалофильный вид, не растущий при концентрации NaCl более 5–6 %) и Vibrio mimicus.

Состав

Состав, г/л:

Конечный pH после стерилизации (при 25 °C): 7,5 ± 0,2.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 110,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте до полного растворения компонентов.
3. Разлейте среду по пробиркам или колбам.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа / 15 lbs) в течение 15 минут.

Процедура анализа согласно ISO 21872-1:2017 (E)

1. Первичное селективное обогащение: 25 г или 25 мл исследуемой порции помещают в 225 мл солевой пептонной воды (ASPW). Время инкубации — 6 $\pm$ 1 ч. Температурный режим зависит от целевого вида Vibrio и состояния продукта:
   • Для V. parahaemolyticus и V. cholerae: 41,5 $\pm$ 1 °C (свежие продукты) или 37 $\pm$ 1 °C (глубокозамороженные, сухие или соленые продукты).
   • Для V. vulnificus: 37 $\pm$ 1 °C для всех типов продуктов.
2. Вторичное селективное обогащение: Перенесите 1 мл культуры из первичного бульона в 10 мл ASPW (без перемешивания пробы перед отбором аликвоты). Инкубируйте при 41,5 $\pm$ 1 °C и/или 37 $\pm$ 1 °C в течение 18 $\pm$ 1 ч.
3. Изоляция и идентификация: Перенесите культуры из ASPW на агар TCBS (M189), инкубируйте при 37 $\pm$ 1 °C в течение 24 $\pm$ 3 ч до появления изолированных колоний.
4. Подтверждение: Проводится с помощью ПЦР или биохимических методов. Для биохимического тестирования колонии инокулируют на поверхность пластин солевого питательного агара (M2086I), инкубируют при 37 $\pm$ 1 °C в течение 24 $\pm$ 3 ч. Затем изолированные колонии инокулируют в солевой бульон с аргининдигидролазой (M1644I), солевой бульон с L-лизин-декарбоксилазой (LDC) (M1778I) и/или солевую пептонную воду с 10 % NaCl (M2088I), инкубируют при 37 $\pm$ 1 °C в течение 24 $\pm$ 3 ч.

Технические характеристики

• Вес: 500 г
• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от белого до желтоватого цвета
• Цвет и прозрачность готового раствора: бесцветный или бледно-желтый, от прозрачного до слегка опалесцирующего
• Диапазон pH: 7,30–7,70
• Реакция 11,1 % водного раствора при 25 °C: pH 7,5 $\pm$ 0,2

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 37 $\pm$ 1 °C в течение 24 $\pm$ 3 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Область применения

Рекомендуется для анализа пищевых продуктов, кормов для животных и проб окружающей среды в зонах производства и обработки пищевой продукции.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и предостережения

• Для полного разграничения данных видов между собой и от непатогенных видов Vibrio требуются дополнительные биохимические тесты.
• Индивидуальные организмы могут проявлять вариативность в требованиях к росту и паттернах роста на среде.
• При работе с образцами и культурами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности, использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Контаминированные материалы перед утилизацией должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации.