HiMedia M2088I-500G Солевая пептонная вода с 10% NaCl

Питательная микробиологическая среда HiMedia M2088I-500G Солевая пептонная вода с 10% NaCl с содержанием хлорида натрия 100,00 г/л. Среда предназначена для определения устойчивости к соли и селективного обогащения видов Vibrio в пищевых продуктах, кормах для животных и пробах из производственной среды; хранение — при 10–30 °C.

Назначение

Среда рекомендована для проведения теста на солеустойчивость видов Vibrio, выделяемых из пищевых продуктов, кормов для животных и проб окружающей среды в области производства и обращения пищевой продукции. Состав и показатели эффективности среды соответствуют требованиям ISO 21872-1:2017.

Состав

Конечный pH после стерилизации при 25 °C: 7,5 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с установленными показателями эффективности.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 110,0 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Разлейте среду в пробирки или колбы в требуемом объёме.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов, ориентировочно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.

Принцип действия и интерпретация

Виды Vibrio относительно легко выделяются из пищевых продуктов, кормов для животных и проб окружающей среды в области производства и обращения пищевой продукции.

Среда предназначена для селективного обогащения и дифференциации Vibrio parahaemolyticus, Vibrio vulnificus и Vibrio alginolyticus среди других видов Vibrio на основании устойчивости к хлориду натрия.

Vibrio furnissii — негалофильный вид Vibrio, который не способен расти в средах с концентрацией хлорида натрия более 5–6 % и может расти в средах без NaCl. Все остальные виды Vibrio, за исключением Vibrio furnissii и Vibrio mimicus, способны расти в этой среде.

Пептон обеспечивает бактерии необходимыми азотистыми соединениями, углеродом, витаминами и некоторыми микроэлементами, необходимыми для роста. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды и действует как селективный и ингибирующий компонент для других микроорганизмов.

Типы исследуемых образцов

• Пищевые продукты.
• Корма для животных.
• Пробы окружающей среды из зон производства и обращения пищевой продукции.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых продуктов, кормов для животных и проб окружающей среды из зон производства и обращения пищевой продукции применяйте соответствующие методы отбора и подготовки образцов согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Методика анализа по ISO 21872-1:2017

Первичное селективное обогащение

Внесите 25 г или 25 мл исследуемой порции в 225 мл щелочной солевой пептонной воды (ASPW). Температура инкубации зависит от целевого вида Vibrio и состояния продукта, включая глубокозамороженные или свежие продукты. Инкубируйте в течение 6 ч ± 1 ч:

• для Vibrio parahaemolyticus и Vibrio cholerae: при 41,5 ± 1 °C для свежих продуктов и при 37 ± 1 °C для глубокозамороженных, высушенных или солёных продуктов;
• для Vibrio vulnificus: при 37 ± 1 °C независимо от состояния продукта.

Вторичное селективное обогащение

Перенесите 1 мл культуры из среды первичного обогащения в 10 мл ASPW. Перед отбором аликвоты образец не перемешивайте.

Инкубируйте ASPW при 41,5 °C ± 1 °C и/или 37 °C ± 1 °C в течение 18 ч ± 1 ч.

Выделение и идентификация

Перенесите культуры, полученные в ASPW, на тиосульфат-цитрат-жёлчно-сахарозный агар (TCBS, M189). Инкубируйте при 37 °C ± 1 °C в течение 24 ч ± 3 ч для формирования хорошо изолированных колоний.

На второй селективной среде исследуйте наличие колоний, которые по своим характеристикам могут рассматриваться как возможные изоляты Vibrio parahaemolyticus, Vibrio vulnificus и/или Vibrio cholerae.

Подтверждение

Подтверждение выполняют методами молекулярной полимеразной цепной реакции (ПЦР) и/или биохимическими методами.

Для биохимического исследования выбранные колонии инокулируйте на поверхность чашек с солевым питательным агаром (M2086I). Инкубируйте при 37 °C ± 1 °C в течение 24 ч ± 3 ч.

Из выделенных колоний выполняют посев в солевой бульон с аргининдигидролазой (M1644I) и/или солевой бульон с L-лизиндекарбоксилазой (LDC, M1778I), а также/или в солевую пептонную воду с 10 % NaCl (M2088I). Инкубируйте при 37 °C ± 1 °C в течение 24 ч ± 3 ч.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид сухой среды: порошок от грязно-белого до жёлтого цвета, однородный, сыпучий.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет приготовленной среды: бесцветный или бледно-жёлтый.

Прозрачность: прозрачный или слегка опалесцирующий раствор.

Реакция среды

Реакция 11,1 % масс./об. водного раствора при 25 °C: pH 7,5 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,30–7,70.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

1. Для полной дифференциации указанных видов между собой и от непатогенных видов Vibrio требуются дополнительные биохимические исследования.
2. Разные микроорганизмы имеют индивидуальные требования к условиям роста и могут демонстрировать на среде различающиеся картины роста.
3. Каждая партия среды протестирована на микроорганизмы, указанные в сертификате анализа (COA). Для любого конкретного микроорганизма, не указанного в COA, рекомендуется провести валидацию среды с учётом требований пользователя.

Ожидаемые показатели эффективности

Показатели эффективности среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах установленного срока годности и при хранении в рекомендованных условиях.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °