HiMedia M2087I-500G Солевая пептонная вода с 6% NaCl

Питательная микробиологическая среда HiMedia M2087I-500G Солевая пептонная вода с 6% NaCl представляет собой порошок для приготовления среды с содержанием хлорида натрия 60,000 г/л. Среда применяется для определения устойчивости видов Vibrio к соли в пищевых продуктах, кормах для животных и пробах из производственной окружающей среды; масса упаковки — 500 г.

Назначение и область применения

Среда предназначена для проведения теста на солеустойчивость видов Vibrio в пищевых продуктах, кормах для животных и пробах из окружающей среды на предприятиях пищевого производства и в сфере обращения с пищевой продукцией.

Состав и критерии эффективности среды соответствуют требованиям ISO 21872-1:2017 для выявления потенциально энтеропатогенных видов Vibrio.

Типы образцов

• Пищевые продукты.
• Корма и кормовое сырьё для животных.
• Пробы из окружающей среды в зонах пищевого производства и обращения с пищевой продукцией.

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Принцип действия и интерпретация

Виды Vibrio сравнительно легко выделяются из пищевых продуктов, кормов для животных и проб окружающей среды в зонах пищевого производства и обращения с пищевой продукцией.

Среда применяется для селективного обогащения и дифференциации Vibrio parahaemolyticus, Vibrio vulnificus и Vibrio alginolyticus от других видов Vibrio на основании устойчивости к хлориду натрия.

Vibrio furnissii является негалофильным видом Vibrio: микроорганизм не способен расти в средах с концентрацией хлорида натрия более 5–6 % и способен расти в средах без NaCl. Все остальные виды Vibrio, за исключением Vibrio furnissii и Vibrio mimicus, способны расти в этой среде.

Пептон обеспечивает бактерии необходимыми соединениями азота, углеродом, витаминами и некоторыми микроэлементами, требуемыми для роста. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды и действует как селективный и ингибирующий агент для других микроорганизмов.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 70,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленную среду в пробирки или колбы в требуемом объёме.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.

Методика анализа по ISO 21872-1:2017

Первичное селективное обогащение

Внесите 25 г или 25 мл исследуемой пробы в 225 мл щелочной пептонной воды с солью (ASPW).

Инкубируйте в течение 6 ч ± 1 ч. Температура зависит от целевого вида Vibrio и состояния продукта, включая глубокую заморозку или свежесть:

• для Vibrio parahaemolyticus и Vibrio furnissii — 41,5 ± 1 °C для свежих пищевых продуктов;
• для Vibrio parahaemolyticus и Vibrio furnissii — 37 ± 1 °C для глубоко замороженных, сушёных или солёных продуктов;
• для Vibrio vulnificus — 37 ± 1 °C независимо от состояния продукта.

Вторичное селективное обогащение

Перенесите 1 мл культуры из первичного обогатительного бульона в 10 мл ASPW. Перед отбором аликвоты образец не перемешивайте.

Инкубируйте ASPW при 41,5 °C ± 1 °C и/или 37 °C ± 1 °C в течение 18 ч ± 1 ч.

Выделение и идентификация

Перенесите культуры, полученные в ASPW, на агар с тиосульфатом, цитратом, желчными солями и сахарозой (TCBS), среда M189.

Инкубируйте при 37 °C ± 1 °C в течение 24 ч ± 3 ч для формирования хорошо изолированных колоний.

Во второй селективной среде исследуйте наличие колоний, которые по своим характеристикам могут рассматриваться как возможные изоляты Vibrio parahaemolyticus, Vibrio vulnificus и/или Vibrio furnissii.

Подтверждение

Подтверждение проводят с помощью молекулярной полимеразной цепной реакции (ПЦР) и/или биохимических методов.

Для биохимического исследования выбранные колонии инокулируйте на поверхность чашек с солевым питательным агаром M2086I. Инкубируйте при 37 °C ± 1 °C в течение 24 ч ± 3 ч.

Из изолированных колоний выполняют посевы в:

• солевой бульон с аргининдигидролазой M1644I;
• и/или солевой бульон с L-лизиндекарбоксилазой (LDC) M1778I;
• и/или солевую пептонную воду с 6 % NaCl M2087I.

Инкубируйте посевы при 37 °C ± 1 °C в течение 24 ч ± 3 ч.

Контроль качества

Внешний вид порошка

Внешний вид: однородный, свободно сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Внешний вид приготовленной среды

Цвет и прозрачность приготовленной среды: от бесцветного до бледно-жёлтого цвета; прозрачный раствор в пробирках.

Реакция среды

Реакция 7,0 % мас./об. водного раствора при 25 °C:

• pH: 7,5 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,30–7,70.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

• Назначение изделия: питательная микробиологическая среда.
• Физическая форма: порошок.
• Содержание пептона: 10,000 г/л.
• Содержание хлорида натрия: 60,000 г/л.
• Концентрация среды для контроля реакции: 7,0 % мас./об.
• Конечный pH после стерилизации при 25 °C: 7,5 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,30–7,70.
• Масса: 500 г.
• Тип продукта: стандартный.
• Тип упаковки: ПНД (HDPE).

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Срок хранения: использовать до даты истечения срока годности,