HiMedia M1977-100G Модифицированная среда для определения лизина, индола и подвижности

HiMedia·Арт.: 0049573·Арт. произв.: M1977-100G

HiMedia M1977-100G Модифицированная среда для определения лизина, индола и подвижности

Name: HiMedia M1977-100G Модифицированная среда для определения лизина, индола и подвижности
Brand: HiMedia
SKU: 0049573
Price: 3671 RUB
Availability: PreOrder

Под заказ3 671 руб.

Модифицированная среда для определения лизина, индола и подвижности HiMedia M1977-100G используется для идентификации представителей семейства Enterobacteriaceae. Дифференциация микроорганизмов проводится на основании активности лизиндекарбоксилазы, продукции индола и подвижности.

Описание

Область применения

Среда предназначена для дифференциации бактерий группы Enterobacteriaceae. В качестве исследуемого материала используются изоляты из гнойных экссудатов.

Принцип измерения

Модифицированная среда для определения лизина, индола и подвижности представляет собой полужидкокий агар.

Питательные компоненты: пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают организм аминокислотами и сложными азотистыми веществами; декстроза (глюкоза) служит источником энергии.
Определение подвижности: небольшое количество агара позволяет визуализировать подвижность микроорганизмов вдоль линии посева (прокола). Подвижные организмы растут за пределами линии посева, неподвижные — только вдоль неё.
Лизиндекарбоксилаза: при ферментации декстрозы образуются кислоты, которые снижают pH, и индикатор бромкрезоловый фиолетовый меняет цвет с фиолетового на жёлтый. Кислая среда стимулирует активность фермента декарбоксилазы. Организмы, обладающие специфической декарбоксилазой, расщепляют лизин с образованием кадаверина. Это приводит к повышению pH, и нижняя часть среды в пробирке снова становится фиолетовой. Верхняя часть остаётся кислой (жёлтой) из-за более высокого парциального давления кислорода. Если декарбоксилаза отсутствует, среда остаётся жёлтой по всей длине или жёлтой с фиолетовой/красной реакцией у поверхности.
Продукция индола: организмы, обладающие ферментом триптофаназой, расщепляют триптофан с образованием индола. Индол обнаруживается при добавлении реагента Ковакса к поверхности агара, в результате чего образуется красный комплекс (взаимодействие индола с п-диметиламинобензальдегидом).

Методика проведения анализа

Приготовление среды: 30,02 г порошка суспендируют в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды. Нагревают до кипения для полного растворения.
Розлив: среду разливают по пробиркам по 5 мл.
Стерилизация: стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
Охлаждение: пробирки охлаждают в вертикальном положении.
Посев: проводят инокуляцию методом прокола.
Инкубация: инкубируют при 37 °C в течение 18–24 часов.
Интерпретация: сначала оценивают подвижность и реакцию на лизиндекарбоксилазу. Только после этого добавляют реагент Ковакса для определения индола, так как реагент меняет цвет среды на жёлтый, что может привести к ошибочной интерпретации положительной реакции декарбоксилазы как отрицательной.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Компонент	г/л
Пептон	12,800
Дрожжевой экстракт	3,000
L-Триптофан	0,500
L-Лизин	10,000
Декстроза (глюкоза)	1,000
Бромкрезоловый фиолетовый	0,020
Агар	2,700

Конечный pH (при 25 °C): 6,7 $\pm$ 0,2.

Общие параметры

Вес: 100 г
Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до зеленовато-жёлтого цвета
Свойства геля: полужидкий, сопоставим с гелем 0,27 % агара
Цвет и прозрачность готовой среды: красно-фиолетовый прозрачный или слегка опалесцирующий гель (в виде столбика в пробирке)
Диапазон pH: 6,50–6,90
Происхождение компонентов: животное
Тип продукта: регулярный
Физическая форма: порошок
Тип упаковки: ПНД (HDPE)

Культуральные характеристики

Результаты наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Организм	Подвижность	Продукция индола	Лизиндекарбоксилаза
Klebsiella aerogenes ATCC 13048	положительная, рост за пределами линии посева	отрицательная реакция	положительная реакция, фиолетовый цвет
Escherichia coli ATCC 25922	положительная, рост за пределами линии посева	положительная, красное кольцо на границе раздела сред при добавлении реагента Ковакса	положительная реакция, фиолетовый цвет
Klebsiella pneumoniae ATCC 13883	отрицательная, рост вдоль линии посева	эпизодическая реакция	положительная реакция, фиолетовый цвет
Proteus mirabilis ATCC 25933	положительная, рост за пределами линии посева	отрицательная реакция	отрицательная реакция
Proteus hauseri ATCC 13315	положительная, рост за пределами линии посева	положительная, красное кольцо на границе раздела сред при добавлении реагента Ковакса	отрицательная реакция
Salmonella Enteritidis ATCC 13076	положительная, рост за пределами линии посева	отрицательная реакция	положительная реакция, фиолетовый цвет
Shigella flexneri ATCC 12022	отрицательная, рост вдоль линии посева	эпизодическая реакция	отрицательная реакция

Ограничения и предостережения

Среда имеет общее назначение и может не поддерживать рост требовательных (fastidious) микроорганизмов.
Тест на лизиндекарбоксилазу может быть неверно интерпретирован из-за воздействия реагента Ковакса.
Только для диагностики in vitro и профессионального использования.
При работе с клиническими образцами следует соблюдать стандартные меры предосторожности и правила микробиологической безопасности.

Условия эксплуатации и хранения

Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, защищённом от экстремальных температур и источников возгорания.
Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
Особенности: продукт гигроскопичен; неправильное хранение может привести к образованию комков.
Утилизация: загрязнённые материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией.