HiMedia M1936-100G Среда для анализа цистина

Сухая питательная среда HiMedia M1936-100G для анализа цистина, предназначенная для определения концентрации L-цистина микробиологическим методом. Применяется для количественного анализа аминокислот с использованием тест-штамма Pediococcus acidilactici ATCC 8042.

Принцип измерения

Среда M1936 представляет собой химически определенный состав, содержащий все необходимые витамины и питательные вещества для роста Pediococcus acidilactici ATCC 8042, за исключением L-цистина. Поскольку L-цистин является лимитирующим фактором роста, добавление данной аминокислоты в возрастающих концентрациях вызывает пропорциональный рост микроорганизмов. Количественное определение проводится путем измерения интенсивности роста (турбидиметрически или ацидиметрически) и построения стандартной кривой зависимости абсорбции от концентрации L-цистина.

Методика проведения анализа

Подготовка посевного материала

1. Поддержание культуры: Стоковая культура Pediococcus acidilactici ATCC 8042 готовится путем укольного посева в пробирки с агаром для лактобацилл (Lactobacilli Agar AOAC). Инкубация проводится при 35–37 °C в течение 24 часов; хранение стоковых культур — при 2–8 °C.
2. Приготовление инокулята: Субкультивирование проводят в 10 мл бульона для лактобацилл (Lactobacilli Broth AOAC) при 35–37 °C в течение 16–24 часов.
3. Пробоподготовка: После инкубации клетки центрифугируют в асептических условиях, супернатант сливают. Клетки промывают трижды 10 мл стерильного 0,85% раствора NaCl. Затем клетки ресуспендируют в 10 мл 0,85% раствора NaCl и разводят до необходимой концентрации.

Приготовление и использование среды

1. Растворите 10,5 г сухой среды в 100 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов. Тщательно перемешайте для равномерного распределения возможного небольшого осадка.
3. Распределите по пробиркам по 5 мл среды. Добавьте стандарт или исследуемый образец в возрастающих концентрациях, доведя общий объем в каждой пробирке до 10 мл очищенной/дистиллированной водой.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,07 МПа / 15 psi) в течение 10 минут.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от почти белого до желтого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-янтарный прозрачный раствор (допускается наличие небольшого осадка).
• Реакция (pH): 6,7 $\pm$ 0,2 при 25 °C (диапазон 6,50–6,90).

Состав (г/л)

Культуральные характеристики

Микробиологический анализ цистина проводился с использованием Pediococcus acidilactici ATCC 8042 после инкубации при 35–37 °C в течение 16–20 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения: сухая и приготовленная среды должны храниться при температуре 2–8 °C.
• Особенности хранения: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть для предотвращения комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Требования к посуде: для проведения анализа следует использовать идеально чистую стеклянную посуду, очищенную от остатков моющих средств.

Меры предосторожности и утилизация

• Безопасность: при работе использовать защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• Утилизация: все загрязненные материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с локальными стандартами.