HiMedia M1936-100G Среда для анализа цистина

Питательная микробиологическая среда HiMedia M1936-100G Среда для анализа цистина — химически определённая порошкообразная среда. Среду применяют для определения концентрации цистина микробиологическим методом; хранение обезвоженной и приготовленной среды — при 2–8 °C.

Назначение

Среда предназначена для определения концентрации цистина микробиологическим методом анализа с использованием Pediococcus acidilactici ATCC 8042. Тип образца: выделенный микроорганизм.

Состав

Концентрация компонентов указана в г/л, если не приведены другие единицы измерения.

Конечный pH при 25 °C: 6,7 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип измерения

Pediococcus acidilactici — грамположительный микроорганизм, используемый в качестве пробиотика. Среда для анализа цистина содержит все необходимые факторы роста для Pediococcus acidilactici ATCC 8042, за исключением L-цистина.

Добавление аминокислоты в возрастающих концентрациях вызывает соответствующий рост культуры, который используется для микробиологического анализа. Для микробиологического анализа аминокислот применяют три типа сред:

• поддерживающую среду для хранения исходной культуры;
• инокуляционную среду для приготовления инокулята;
• аналитическую среду для количественного определения исследуемой аминокислоты — L-цистина.

Среда для анализа цистина приготовлена по рецептуре Steel и соавт. Она содержит все остальные витамины и питательные вещества, необходимые для роста Pediococcus acidilactici ATCC 8042, кроме исследуемой аминокислоты L-цистина.

Ростовой отклик измеряют турбидиметрически или ацидиметрически. Стандартную кривую строят как зависимость оптической плотности от концентрации L-цистина. Концентрацию L-цистина в исследуемой пробе рассчитывают по стандартной кривой.

Приготовление среды и проведение анализа

1. Суспендируйте 10,5 г обезвоженной среды в 100 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Тщательно перемешайте для равномерного распределения небольшого количества осадка.
4. Разлейте среду порциями по 5 мл в каждую пробирку для анализа, содержащую возрастающие количества стандарта или исследуемой пробы.
5. Доведите общий объём в каждой пробирке до 10 мл добавлением очищенной или дистиллированной воды.
6. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует приблизительно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 10 мин.

Следует принимать особые меры предосторожности для предотвращения загрязнения среды и стеклянной посуды, используемых при анализе. Используйте чистую стеклянную посуду, не содержащую следов моющих средств.

Подготовка культуры и инокулята

1. Исходную культуру Pediococcus acidilactici ATCC 8042 приготовьте посевом уколом в пробирки с агаром для лактобацилл AOAC.
2. Инкубируйте культуры при 35–37 °C в течение 24 ч.
3. Храните исходные культуры при 2–8 °C.
4. Для приготовления инокулята выполните пересев в 10 мл бульона для лактобацилл AOAC.
5. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 16–24 ч.
6. После инкубации асептически центрифугируйте клетки и слейте жидкий супернатант.
7. Трижды промойте клетки стерильными порциями по 10 мл стерильного 0,85%-ного раствора NaCl.
8. Ресуспендируйте клетки в 10 мл 0,85%-ного раствора NaCl.
9. Разбавьте суспензию в соответствии с назначением.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M1936-100G
• Назначение изделия: среда для микробиологического анализа
• Тип продукта: стандартный
• Физическая форма: порошок
• Химический состав: химически определённый
• Масса: 100 г
• Упаковка: стеклянный флакон
• Конечный pH при 25 °C: 6,7 ± 0,2
• Диапазон pH 10,5%-ного водного раствора: 6,50–6,90
• Температура хранения: 2–8 °C

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от почти белого до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор светло-янтарного цвета, который может содержать небольшое количество осадка.

Реакция

Реакция 10,5%-ного водного раствора при 25 °C: pH 6,7 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Микробиологический анализ цистина проводили с использованием Pediococcus acidilactici ATCC 8042 после инкубации при 35–37 °C в течение 16–20 ч.

Работа с образцами

Для выделенного микроорганизма используйте надлежащие методы отбора и обработки образцов в соответствии с действующими руководствами и местными стандартами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Условия хранения и срок годности

Храните обезвоженную и приготовленную среду при 2–8 °C. Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия плотно закрывайте флакон и храните продукт в сухом состоянии, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию.

Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Меры предосторожности

• Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.