Питательная среда HiMedia M1881-500G Агар с дихлораном, розовым бенгальским и хлорамфениколом производства HiMedia для селективного выделения дрожжей и плесневых грибов из пищевых продуктов. Среда применяется для микробиологического контроля пищевых и кормовых образцов, а розовый бенгал, дихлоран и хлорамфеникол ограничивают рост бактерий и быстрорастущих плесневых грибов; прямое освещение не допускается.

Назначение

HiMedia M1881-500G — сухая селективная питательная среда для выделения значимых с точки зрения порчи пищевых продуктов дрожжей и плесневых грибов. Состав и показатели эффективности соответствуют ISO 21527-1 и ISO 11133:2014 (E) / Amd. 1:2020.

Состав

Состав на 1 л среды:

* Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с показателями эффективности.
Пептон эквивалентен ферментативному гидролизату тканей животного и растительного происхождения.

Принцип действия и интерпретация

Агар с дихлораном, розовым бенгалом и хлорамфениколом (DRBC-агар) представляет собой модификацию агара с розовым бенгалом и хлорамфениколом, дополнительно содержащую дихлоран. Среда предназначена для селективного выделения дрожжей и плесневых грибов, особенно из пищевых продуктов и кормов для животных.

Компоненты среды выполняют следующие функции:

• Пептон обеспечивает азотистые соединения, углерод, длинноцепочечные аминокислоты, витамины и другие необходимые для роста питательные вещества.
• Декстроза (глюкоза) является источником углеводов.
• Фосфат буферизует среду.
• Сульфат магния обеспечивает двухвалентные катионы и сульфат-ионы.
• Дихлоран действует как противогрибковый компонент и уменьшает диаметр колоний распространяющихся плесневых грибов.
• Розовый бенгал проявляет повышенную ингибирующую активность при pH 5,6, поэтому конечный pH среды поддерживается на уровне 5,6 для подавления распространяющихся плесневых грибов.
• Розовый бенгал подавляет рост бактерий и ограничивает размер колоний быстрорастущих плесневых грибов.
• Хлорамфеникол подавляет рост бактерий, присутствующих в образцах окружающей среды и пищевых продуктах.
• Подавление бактерий и ограничение распространения быстрорастущих плесневых грибов облегчает выделение медленно растущих грибов, предотвращая их перерастание быстрорастущими видами.
• Колонии дрожжей и плесневых грибов поглощают розовый бенгал, что облегчает их распознавание и подсчёт.

Среду нельзя подвергать воздействию прямого света: розовый бенгал подвергается фотодеградации с образованием токсичных для грибов химических веществ.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию из 31,63 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Образцы

Среда применяется для следующих пищевых и кормовых образцов:

• яйца;
• мясо;
• молочные продукты, кроме сухого молока;
• фрукты;
• овощи;
• свежие пасты;
• корма для животных.

Сбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов необходимо применять соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам и методикам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M1881-500G
• Назначение изделия: питательная среда
• Физическая форма: порошок
• Масса: 500 г
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: ПЭВП (полиэтилен высокой плотности)
• Происхождение: животное
• Температура хранения сухой среды: 15–25 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• pH после стерилизации при 25 °C: 5,6 ± 0,2
• Диапазон pH: 5,40–5,80
• Концентрация водного раствора для определения реакции: 3,16 % масс./об.
• Время автоклавирования: 15 мин
• Температура автоклавирования: 121 °C
• Давление автоклавирования: 15 фунтов, ≈0,103 МПа

Контроль качества

Внешний вид и физические свойства

• Внешний вид: светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется розовый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 3,16 % масс./об. при 25 °C; pH 5,6 ± 0,2.
• pH: 5,40–5,80.

Культуральные характеристики

Продуктивность: культуральные характеристики оценивают после инкубации при 25 ± 1 °C в течение 5 суток. За 100 % восстановления принимают рост грибов на референсной среде — агаре Сабуро с декстрозой.

Селективность: культуральные характеристики оценивают после инкубации при 25 ± 1 °C в течение 5 суток.

* Соответствующие номера WDCM.
$ Ранее обозначался как Bacillus subtilis subsp. spizizenii.

Ранее обозначался как Aspergillus niger.

Ограничения применения

1. Отдельные организмы отличаются требованиями к условиям роста и могут демонстрировать различные характеры роста на данной среде.
2. Для подтверждения требуется дополнительная биохимическая идентификация.
3. Среду нельзя подвергать воздействию прямого света из-за фотодеградации розового бенгала и образования токсичных для грибов соединений.

Условия хранения и срок годности

Храните сухую среду при температуре 15–25 °C в плотно закрытом контейнере. Приготовленную среду храните при температуре 2–8 °C. Используйте продукт до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к образованию комков. Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте контейнер. Показатели среды сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Меры предосторожности

Перед открытием контейнера прочитайте этикетку. При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики. При обращении с образцами необходимо соблюдать стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты среды необходимо безопасно утилизировать автоклавированием и/или сжиганием. Соблюдайте установленные лабораторные процедуры обращения с инфекционными материалами. Материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Отличие состава от агара с розовым бенгалом и хлорамфениколом

DRBC-агар отличается от агара с розовым бенгалом и хлорамфениколом дополнительным содержанием дихлорана, который уменьшает диаметр колоний распространяющихся плесневых грибов.

Стандарты и методические основы

• ISO 21527-1:2008 — горизонтальный метод подсчёта дрожжей и плесневых грибов в пищевых продуктах и кормах для животных при активности