Среда для идентификации Vibrio spp. HiMedia M1879-500G (уп/500 гр)

Диагностическая питательная среда «Среда для идентификации Vibrio spp. HiMedia M1879-500G (уп/500 гр)» представляет собой порошковый препарат массой 500 г. Среда применяется для идентификации бактерий рода Vibrio в пищевых и молочных образцах, включая подготовку культур для иммунологических исследований холерного токсина.

Назначение и область применения

Среда AKI M1879 предназначена для идентификации Vibrio в соответствии с FDA BAM, 1998.

Тип образца

• Пищевые образцы.
• Молочные образцы.

Состав

Состав, г/л:

• Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2.
• Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Принцип и интерпретация

V. cholerae, типовой вид рода Vibrio, является возбудителем вспышек и эпидемий холеры. Холерный энтеротоксин (CT) представляет собой основной фактор вирулентности этих микроорганизмов.

Большинство штаммов V. cholerae, выделенных из пищевых продуктов или объектов окружающей среды, не продуцируют холерный токсин и не считаются вирулентными. Для характеристики вида используют различные биохимические свойства и антигенные типы.

V. mimicus связывают с диареей после употребления сырых или недостаточно термически обработанных морепродуктов. Поэтому выделенные штаммы Vibrio следует исследовать на продукцию CT или наличие гена CTX.

Среда AKI используется для серологической идентификации CT у этих микроорганизмов в соответствии с FDA BAM, 1998. После этапов обогащения, высева и скрининга подтверждение токсинов может выполняться с помощью анализа на клетках надпочечников мыши Y-1 и иммунологических методов.

• Пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают необходимые питательные вещества.
• Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды.

Методика пробоподготовки и анализа

1. Гомогенизируйте исследуемый пищевой образец с щелочной пептонной водой APW в соответствующем соотношении.
2. Инкубируйте образец в соответствии с рекомендациями FDA BAM.
3. Для выделения чистых культур из APW выполните посев петлёй инокулята на агар TCBS.
4. Разделите скученные колонии с использованием триптон-солевого агара с 1 % NaCl, M1877.
5. Для иммунологических анализов внесите исследуемые культуры в среду AKI.
6. Инкубируйте культуры при 35 ± 2 °C в течение 18 ч при встряхивании со скоростью 100 об/мин.
7. Центрифугируйте 5–7 мл культуры при 8 000 × g в течение 10 мин.
8. Стерилизуйте фильтрованием надосадочную жидкость через фильтр с размером пор 0,2 мкм или используйте надосадочную жидкость без фильтрования для иммунологических анализов на наличие холерного токсина CT.

Приготовление среды

1. Взвесьте 24,0 г сухой среды и суспендируйте в 970 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин и давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (ориентировочно 0,103 МПа).
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Добавьте 30 мл свежеприготовленного гидрокарбоната натрия NaHCO₃, стерилизованного фильтрованием, и перемешайте.
6. Скорректируйте конечный pH до 7,4 ± 0,2.
7. Асептически разлейте среду в пробирки с завинчивающимися крышками.

Контроль качества

Внешний вид

• Внешний вид сухого препарата: однородный свободно текучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор светло-жёлтого цвета без осадка.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 2,4 % масс./об. при 25 °C.
• pH реакции: 7,4 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

1. Для идентификации требуется дальнейший высев на селективные среды.
2. Некоторые изоляты могут демонстрировать слабый рост из-за различий в пищевых потребностях.

Требования к образцам и обращению

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры безопасности

• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с действующими руководствами.
• Для получения дополнительных сведений по безопасности используйте паспорта безопасности отдельных материалов.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого препарата: 10–30 °C.
• Условия хранения: в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения приготовленной среды: 15–25 °C.
• Срок применения: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрыв флакон.
• Препарат обладает гигроскопичностью; неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в пределах указанного срока годности и соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Утили