Среда для идентификации Vibrio spp. HiMedia M1879-500G (уп/500 гр)

Диагностическая среда для идентификации Vibrio spp. HiMedia M1879-500G (уп/500 г) производства HiMedia. Применяется для серологической идентификации холерного токсина (CT) в соответствии с методикой FDA BAM (1998).

Область применения

Среда предназначена для анализа проб пищевых продуктов и молочной продукции. Используется для выращивания культур Vibrio с целью последующего выявления холерного токсина (CT) или гена CTX методами иммуноанализа или с помощью анализа клеток надпочечников мыши Y-1.

Принцип метода

Пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают необходимый набор питательных веществ, а хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды. Среда AKI позволяет получить биомассу микроорганизмов, необходимую для проведения иммунологических тестов на наличие холерного токсина, который является основным фактором вирулентности V. cholerae.

Методика проведения анализа

1. Подготовка пробы: Пищевой образец смешивают с щелочной пептонной водой (APW) в соответствующем соотношении и инкубируют согласно рекомендациям FDA BAM.
2. Изоляция: Чистые культуры выделяют из APW, высевая петлю инокулята на агар TCBS. При необходимости разделения скученных колоний используют триптон-солевой агар с 1 % NaCl (M1877).
3. Культивирование в среде AKI: Тестовые культуры инокулируют в среду AKI и инкубируют при температуре 35 ± 2 °C в течение 18 ч при перемешивании со скоростью 100 об/мин.
4. Подготовка супернатанта: 5–7 мл культуры центрифугируют при 8 000 × g в течение 10 мин. Супернатант подвергают стерилизации через фильтр с порами 0,2 мкм или используют без фильтрации для проведения иммунологических анализов на наличие холерного токсина (CT).

Приготовление и стерилизация

1. Растворить 24,0 г порошка в 970 мл очищенной или дистиллированной воды. При необходимости нагреть до полного растворения.
2. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
3. Охладить до 45–50 °C.
4. Добавить 30 мл свежеприготовленного, фильтр-стерилизованного раствора NaHCO₃, тщательно перемешать.
5. Довести конечное значение pH до 7,4 ± 0,2.
6. Асептически разлить по пробиркам с завинчивающимися крышками.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Конечное значение pH (при 25 °C): 7,4 ± 0,2.

Дополнительные параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текучий порошок от кремового до желтого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-желтый прозрачный раствор без осадка.
• Реакция: pH 2,4% водного раствора при 25 °C составляет 7,4 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Ограничения и предостережения

• Для окончательной идентификации требуется дополнительный изоляционный посев на селективные среды.
• Некоторые изоляты могут демонстрировать слабый рост из-за вариаций в составе питательных веществ.
• При работе с образцами и культурами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности.
• Загрязненные материалы после использования подлежат стерилизации в автоклаве перед утилизацией.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом помещении, защищенном от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре 15–25 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков.