HiMedia M1862-500G HiCrome M-модифицированная селективная среда для E. coli O157:H7

Селективная среда HiMedia M1862-500G HiCrome M-модифицированная для выделения Escherichia coli O157:H7. Рекомендуется для предварительного количественного определения E. coli O157:H7 в образцах пищевых продуктов методом мембранной фильтрации.

Принцип измерения и интерпретация

Среда предназначена для изоляции энтеропатогенных штаммов Escherichia coli O157:H7, относящихся к группе энтерогеморрагических E. coli (EHEC), которые являются значимыми пищевыми патогенами. Дифференциация основана на трёх биохимических реакциях: декарбоксилировании лизина (положительно для типичных штаммов EHEC O157), ферментации сорбитола и активности $\beta$-глюкуронидазы.

Механизм работы компонентов:

• Питательные вещества: пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают азот, углерод, длинноцепочечные аминокислоты и витамины.
• Осмотическое давление: поддерживается хлоридом натрия.
• Индикация pH: бактерии сначала ферментируют декстрозу. После её исчерпания сорбитозоположительные бактерии начинают ферментировать сорбитол, что приводит к снижению pH среды. Феноловый красный (индикатор) окрашивает такие колонии в жёлтый цвет.
• Хромогенная реакция: $\beta$-глюкуронидаза-положительные E. coli расщепляют X-Gluc, образуя нерастворимый синий осадок в колонии. В сочетании с индикатором pH это дает зелёный цвет колоний (для сорбитозоположительных или лизин-отрицательных бактерий).
• Лизин-декарбоксилаза: лизин-положительные организмы декарбоксилируют лизин, что повышает pH среды и приводит к образованию розовых колоний.
• Селективность: достигается за счёт добавления монензина (ингибирует грамположительные бактерии) и инкубации при температуре 44–44,5 °C (ингибирует большинство грамотрицательных бактерий). Другие организмы, способные расти на данной среде, обычно образуют жёлтые колонии.

Область применения

Среда рекомендуется для анализа следующих типов образцов:

• Мясо и мясопродукты;
• Птица;
• Молочные продукты;
• Детские смеси;
• Жидкие яйца;
• Майонез;
• Яблочный сидр.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендировать 62,82 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. ВНИМАНИЕ: Автоклавирование запрещено.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. Асептически добавить содержимое одного флакона селективной добавки MSN (артикул FD295).
6. Тщательно перемешать и разлить по стерильным чашкам Петри.

Сбор и обработка проб

Для пищевых и молочных образцов следует использовать стандартные методы сбора и подготовки проб согласно отраслевым руководствам. Загрязнённые материалы после использования должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,2 ± 0,2.

Физико-химические свойства и контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5 % агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: красный, прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• pH водного раствора (6,28 % w/v при 25 °C): 7,00–7,40.

Дополнительные параметры

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при использовании селективной добавки MSN (FD295) после инкубации при 44–44,5 °C в течение 18–24 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 15–25 °C в сухом проветриваемом месте, вдали от источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть во избежание комкования.

Ограничения и предостережения

1. Возможны незначительные вариации цвета колоний в зависимости от штамма.
2. Некоторые виды могут демонстрировать слабый рост из-за различий в трофических потребностях.
3. При работе с образцами и культурами соблюдайте стандартные правила микробиологической безопасности: используйте защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.