HiMedia M1862-100G HiCrome M-модифицированная селективная среда для E. coli O157:H7

Селективная среда HiMedia M1862-100G HiCrome M-модифицированная для выделения Escherichia coli O157:H7. Рекомендуется для предварительного количественного определения E. coli O157:H7 в образцах пищевых продуктов методом мембранной фильтрации.

Принцип измерения и интерпретация

Среда предназначена для изоляции энтеропатогенных штаммов Escherichia coli O157:H7, относящихся к группе энтерогеморрагических E. coli (EHEC), которые являются значимыми пищевыми патогенами.

Дифференциация основана на трёх биохимических реакциях:

1. Декарбоксилирование лизина: типичные штаммы EHEC O157 дают положительную реакцию, что приводит к повышению pH среды и окрашиванию колоний в розовый цвет.
2. Ферментация сорбитола: бактерии, способные ферментировать сорбитол, снижают pH среды, что вызывает пожелтение колоний (индикатор — феноловый красный).
3. Активность $\beta$-глюкуронидазы: положительные по $\beta$-глюкуронидазе E. coli расщепляют X-Gluc, что приводит к образованию нерастворимого синего осадка в колонии. В сочетании с индикатором pH это дает зеленые колонии (для сорбитоло-положительных или лизин-отрицательных бактерий).

Селективность обеспечивается добавлением монензина, который подавляет рост грамположительных бактерий, а также инкубацией при температуре 44–44,5 °C, что ингибирует большинство грамотрицательных бактерий. Другие микроорганизмы, способные расти на данной среде, обычно образуют желтые колонии.

Область применения

Среда рекомендуется для анализа следующих типов образцов:

• Мясные и птицеводческие продукты;
• Молочные продукты и детские смеси;
• Жидкие яйца и майонез;
• Яблочный сидр.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендировать 62,82 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревать до кипения для полного растворения компонентов.
3. ВНИМАНИЕ: Не автоклавировать.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавить содержимое одного флакона селективной добавки MSN (FD295) после её регидратации.
6. Тщательно перемешать и разлить по стерильным чашкам Петри.

Сбор и обработка проб

Для пищевых и молочных образцов следует использовать стандартные методы сбора и подготовки проб согласно установленным руководствам. После использования все контаминированные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,2 $\pm$ 0,2

Общие параметры

Контроль качества

Внешний вид и свойства

• Вид порошка: однородный свободнотекущий порошок от светло-желтого до розового цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5 % агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: красный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция: pH 7,00–7,40 (для 6,28 % водного раствора при 25 °C).

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при использовании селективной добавки MSN (FD295) после инкубации при 44–44,5 °C в течение 18–24 часов.

Ограничения и предостережения

• Возможны незначительные вариации цвета колоний в зависимости от штамма.
• Некоторые виды могут демонстрировать слабый рост из-за вариаций в питательных потребностях.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте стандартные правила микробиологической безопасности. Используйте средства индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 15–25 °C в сухом вентилируемом месте, вдали от источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия плотно закрывайте бутылку для предотвращения образования комков.