Порошкообразная питательная среда HiMedia M1851-100G Буферная пептонная вода с пируватом с конечным pH 7,2 ± 0,2. Среда предназначена для выделения энтерогеморрагической E. coli (EHEC) из клинических и пищевых образцов; процедура предусматривает инкубацию при 37 ± 1 °C в течение 5 ч и последующее обогащение с селективной добавкой ACV.

Назначение

Среда рекомендована для выделения энтерогеморрагической E. coli (EHEC), включая Escherichia coli O157:H7. Применяется при исследовании клинических образцов — фекалий, ректальных мазков и других материалов, — а также пищевых образцов.

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды.

— эквивалент кислотного гидролизата казеина.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Энтерогеморрагическая E. coli вызывает тяжёлые пищевые инфекции и является основной причиной геморрагического колита. Инфекция также может приводить к гемолитико-уремическому синдрому. Основной путь передачи — употребление загрязнённых пищевых продуктов, включая сырое или недостаточно приготовленное мясо и сырое молоко.

Триптон, Acicase™ и дрожжевой экстракт служат источниками углерода и азота, аминокислот с длинной цепью, витаминов и других компонентов, необходимых для роста бактерий. Фосфаты буферируют среду и предотвращают повреждение бактерий при изменении её pH. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс. Лактоза используется как источник углерода.

Селективная добавка ACV содержит акрифлавин, цефсулодин и ванкомицин. Компоненты добавки подавляют сопутствующую микрофлору и обеспечивают рост Escherichia coli O157:H7.

Методика подготовки среды и проведения анализа

1. Суспендируйте 21,05 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте среду в автоклаве при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки ACV Selective Supplement, FD284.
6. После подготовки образца внесите исследуемый материал в буферную пептонную воду с пируватом.
7. Инкубируйте при 37 ± 1 °C в течение 5 ч.
8. Добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки ACV Selective Supplement, FD284.
9. Инкубируйте при 42 ± 1 °C в течение 18–24 ч.

Требования к образцам и обращению

Для клинических образцов используйте установленные методики обращения с материалом и его обработки.

Для пищевых образцов применяйте установленные методики отбора и обработки проб.

При работе с образцами и культурами соблюдайте правила микробиологической лабораторной практики. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Среда предназначена для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным методикам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Среда является универсальной и может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов.
2. Для полной идентификации необходимо выполнить дополнительные изоляционные, биохимические и серологические исследования.
3. Некоторые микроорганизмы могут демонстрировать слабый рост из-за различий в пищевых потребностях.

Контроль качества

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор янтарного цвета без осадка.

Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 4,21 % масс./об. при 25 °C; pH 7,2 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления акрифлавин-цефсулодин-ванкомициновой селективной добавки ACV, FD284, и инкубации при 42 ± 1 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M1851-100G
• Назначение изделия: питательная среда
• Физическая форма: порошок
• Масса: 100 г
• Происхождение: животное
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: ПЭВП (HDPE, полиэтилен высокой плотности)
• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,00–7,40
• Температура хранения: 10–30 °C

Хранение и срок годности

• Храните порошок при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Приготовленную среду храните при температуре 2–8 °C.
• Используйте продукт до истечения срока годности, указанного на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения комкования из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать автоклавированием и/или сжиганием.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактиров