HiMedia M181F-500G Модифицированная SIM среда для подвижности

Микробиологическая дифференциальная питательная среда HiMedia M181F-500G Модифицированная SIM среда для подвижности в форме порошка предназначена для определения продукции сероводорода, образования индола и подвижности энтеробактерий. Среда используется для дифференциации представителей семейства Enterobacteriaceae, включая Salmonella и Shigella, с одновременной оценкой трёх характеристик в одном образце.

Назначение

SIM-среда рекомендована для определения:

• продукции сероводорода (H₂S);
• образования индола;
• подвижности энтеробактерий;
• дифференциации представителей семейства Enterobacteriaceae, в частности Salmonella и Shigella.

Методика основана на рекомендациях Бактериологического аналитического руководства FDA (FDA BAM, 1998); упоминание документа относится к применяемому методу анализа.

Состав

Состав среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация результатов

SIM-среда объединяет в одной полужидкой питательной среде три дифференциальных признака:

• продукцию сероводорода;
• образование индола;
• подвижность микроорганизмов.

Пептонизированное железо и тиосульфат натрия служат индикаторами продукции H₂S. Образующийся H₂S реагирует с пептонизированным железом с формированием чёрного осадка сульфида железа.

• Salmonella обычно даёт положительную реакцию на H₂S.
• Shigella обычно даёт отрицательную реакцию на H₂S.
• Подвижные микроорганизмы усиливают реакцию образования H₂S.
• Подвижные микроорганизмы растут в стороны от линии укола, формируя диффузный рост и помутнение среды.
• Неподвижные микроорганизмы растут вдоль линии укола, при этом окружающая среда остаётся прозрачной.
• Выявление подвижности обеспечивается полужидкой консистенцией среды.
• Salmonella является подвижной, а Shigella — неподвижной.

Триптофан, содержащийся в пептическом переваре тканей животного происхождения, разлагается специфическими бактериями с образованием индола. Индол выявляют добавлением химического реагента после завершения инкубации.

Ранее для дифференциации Salmonella Paratyphi A и Salmonella Paratyphi B по продукции H₂S применяли ацетат свинца. Для определения подвижности одновременно с продукцией H₂S и ферментацией углеводов также использовали трёхсахарный железный агар с содержанием агара 1 %. Для определения подвижности и индола применялась пептонная среда с низким содержанием агара.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 30,0 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленную среду по пробиркам.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (примерно 0,103 МПа или 1,03 бар) при температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите пробирки в вертикальном положении.

Методика проведения анализа

1. Внесите свежую культуру одним уколом прямой бактериологической иглой через центр среды.
2. После инкубации оцените подвижность по диффузному росту в стороны от линии укола или по помутнению всей среды.
3. Оцените продукцию H₂S по почернению среды.
4. Для выявления образования индола добавьте 3–4 капли реактива Ковача.
5. Зафиксируйте положительную реакцию на индол при появлении красного кольца на границе раздела среды.
6. Определяйте подвижность и продукцию H₂S до определения образования индола.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный свободносыпучий порошок от кремового до бежевого цвета.

Гелеобразование

Полужидкая среда, сопоставимая с 0,3%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В пробирках в виде столбиков формируется гель янтарного цвета, слегка опалесцирующий.

Реакция среды

Реакция 3,0 % масс./об. водного раствора при 25 °C: pH 7,3 ± 0,2.

Контроль pH

Диапазон pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Технические характеристики

Условия хранения и срок годности

• Храните сухую среду в плотно закрытом контейнере при температуре ниже 30 °C.
• Приготовленную среду храните при температуре 2–8 °C.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Техническое отличие методики

В отличие от сред, предназначенных для определения только одного дифференциального признака, модифицированная SIM-среда позволяет в одной пробирке оценивать подвижность, продукцию H₂S и образование индола.