Полужидкая железосодержащая среда HiMedia M181-500G (уп/500 гр)

Полужидкая железосодержащая среда HiMedia M181-500G (SIM-агар) для определения подвижности, способности к продукции индола и сероводорода у кишечных бактерий. Применяется для анализа клинических и неклинических образцов; имеет сертификат ФСЗ 2009/03705.

Принцип измерения

Среда SIM используется для дифференциации кишечных бацилл, в частности Salmonella и Shigella, на основании трех характеристик:

1. Продукция сероводорода (H₂S): пептонизированное железо и тиосульфат натрия служат индикаторами. H₂S реагирует с пептонизированным железом, образуя черный осадок сульфида железа (II). Подвижные организмы усиливают эту реакцию.
2. Подвижность: благодаря полужидкой консистенции среды (низкое содержание агара) подвижные микроорганизмы растут вдали от линии инокуляции, создавая диффузное помутнение. Неподвижные организмы растут строго вдоль линии укола.
3. Продукция индола: триптофан, содержащийся в пептоне, расщепляется специфическими бактериями с образованием индола. Его наличие определяется путем добавления химических реагентов после периода инкубации.

Пептон и HM-пептон B обеспечивают азот- и углеродсодержащие соединения, длинноцепочечные аминокислоты, витамины и другие необходимые питательные вещества.

Методика проведения анализа

1. Посев: свежую культуру инокулируют одним глубоким уколом с помощью прямой иглы через центр среды.
2. Инкубация: образцы инкубируют при 35–37 °C в течение 18–24 часов.
3. Оценка подвижности и продукции H₂S:
   • Подвижность: диффузный рост от линии укола или общее помутнение среды.
   • Продукция H₂S: почернение среды.
4. Определение продукции индола: после оценки подвижности и H₂S в среду добавляют 3–4 капли реагента Ковакса. Появление красного кольца на границе раздела сред свидетельствует о положительной реакции.

Технические характеристики

Состав, г/л:

• Конечное значение pH (при 25 °C): 7,3 ± 0,2
• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до бежевого цвета
• Желирование: полужидкое, сопоставимо с 0,3 % гелем агара
• Цвет и прозрачность готовой среды: янтарный, слегка опалесцирующий гель (в пробирках в виде столбика)
• Диапазон pH: 7,10–7,50
• Происхождение компонентов: животное
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Приготовление и стерилизация

1. Суспендировать 36,23 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения среды.
3. Разлить по пробиркам.
4. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 lbs) в течение 15 минут.
5. Охладить пробирки в вертикальном положении.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников воспламенения.

Ограничения и меры предосторожности

• Среда является универсальной и может не поддерживать рост требовательных (fastidious) микроорганизмов.
• При работе с образцами и культурами соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности.
• Использовать средства индивидуальной защиты: перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Загрязненные материалы перед утилизацией подлежат обязательной стерилизации в автоклаве или сжиганию.