HiMedia M181-100G SIM среда (Сульфит-Индол-Подвижность)

Питательная микробиологическая среда HiMedia M181-100G SIM среда (Сульфит-Индол-Подвижность) предназначена для определения продукции сероводорода, образования индола и подвижности энтеробактерий; конечный pH среды составляет 7,3 ± 0,2. Среда применяется для анализа выделенных микроорганизмов из клинических и неклинических образцов, а хранение сухого продукта осуществляется при 10–30 °C.

Назначение

SIM-среда рекомендована для определения продукции сероводорода, образования индола и подвижности кишечных бацилл из клинических и неклинических образцов. Среда используется для дифференциации энтеробактерий, в частности Salmonella и Shigella, по трём признакам:

• продукции сероводорода;
• образованию индола;
• подвижности микроорганизмов.

Тип образца: выделенные микроорганизмы.

Идентификация продукта

Состав

Состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Пептон HM B# эквивалентен мясному экстракту.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 36,23 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Разлейте среду по пробиркам.
4. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 psi, что соответствует приблизительно 0,103 МПа, и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите пробирки в вертикальном положении.

Принцип действия и интерпретация

SIM-среда обеспечивает одновременное определение трёх характеристик, по которым можно дифференцировать кишечные бактерии.

Пептонизированное железо и тиосульфат натрия служат индикаторами продукции сероводорода. Образующийся H₂S реагирует с пептонизированным железом с формированием чёрного осадка сульфида железа.

Подвижные микроорганизмы усиливают реакцию образования H₂S. При росте подвижных организмов наблюдается диффузное распространение роста в стороны от линии посева, тогда как неподвижные микроорганизмы растут вдоль линии прокола. Выявление подвижности обеспечивается полутвёрдой консистенцией среды. Рост, распространяющийся от центральной линии прокола, указывает на подвижность исследуемого микроорганизма.

Пептон и пептон HM B обеспечивают среду азотсодержащими и углеродсодержащими соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и другими необходимыми питательными веществами. Триптофан, содержащийся в пептоне, разлагается отдельными видами бактерий с образованием индола. Индол выявляют добавлением химического реагента после завершения инкубации.

Для различения энтеробактерий ранее применялись также следующие подходы: Salmonella Paratyphi A и Salmonella Paratyphi B можно различать по продукции H₂S с использованием ацетата свинца; для определения подвижности одновременно с продукцией H₂S и ферментацией углеводов применялся трёхсахарный железный агар с содержанием агара 1 %; для определения подвижности и индола описывалась пептонная среда с низким содержанием агара.

Методика проведения анализа

1. Инокулируйте свежую культуру одним проколом прямой иглой через центр среды.
2. После инкубации оцените подвижность по диффузному росту в стороны от линии прокола или по помутнению по всему объёму среды.
3. Оцените продукцию H₂S по почернению среды.
4. Для выявления образования индола добавьте 3–4 капли реактива Ковача.
5. Оцените образование красного окрашивания как положительную реакцию.
6. Определяйте подвижность и продукцию H₂S до определения образования индола.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до бежевого цвета.

Желирование

Желирование: полутвёрдая среда, сопоставимая с гелем, содержащим 0,3 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность: в пробирках формируется гель янтарного цвета, слегка опалесцирующий, в виде столбиков.

Реакция среды

Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 3,6 % масс./об. при 25 °C.

pH: 7,3 ± 0,2.

Диапазон pH

Диапазон pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Условия хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения: в плотно закрытом контейнере.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия: хранить продукт в сухом виде, плотно закрыв флакон для предотвращения образования комков.

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Меры предосторожности

• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При