HiMedia M181-100G SIM среда (Сульфит-Индол-Подвижность)

Сухая питательная среда HiMedia M181-100G SIM (Сульфит-Индол-Подвижность) для определения продукции сероводорода, образования индола и подвижности энтеробактерий. Применяется для анализа клинических и неклинических образцов; вес упаковки составляет 100 г.

Область применения

Среда SIM рекомендуется для дифференциации энтеробактерий, в частности Salmonella и Shigella, на основании трёх характеристик: продукции H₂S, образования индола и подвижности микроорганизмов. Используется для работы с изолированными микроорганизмами.

Принцип измерения и интерпретация

Среда SIM представляет собой полужидкий гель, что позволяет определять подвижность бактерий.

Определение продукции H₂S

В качестве индикаторов продукции сероводорода используются пептонизированное железо и тиосульфат натрия. H₂S реагирует с пептонизированным железом, образуя черный осадок сульфида железа (II). Подвижные организмы усиливают эту реакцию.

Определение подвижности

Подвижные микроорганизмы растут в сторону от линии инокуляции, создавая диффузный рост или помутнение по всей среде. Неподвижные организмы растут строго вдоль линии посева (прокола).

Определение образования индола

Пептон и пептон B (HM Peptone B) обеспечивают азот- и углеродсодержащие соединения, витамины и незаменимые аминокислоты. Триптофан, содержащийся в пептоне, расщепляется специфическими бактериями с образованием индола, который обнаруживается путем добавления химических реагентов после периода инкубации.

Методика проведения анализа

1. Подготовка среды:
   • Растворить 36,23 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
   • Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
   • Разлить по пробиркам.
   • Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
   • Охладить пробирки в вертикальном положении.
2. Посев: Свежую культуру инокулировать одним глубоким проколом в центр среды с помощью прямого инокулятора (иглы).
3. Инкубация и оценка:
   • После инкубации сначала оценить подвижность (диффузный рост от линии прокола или общая мутность) и продукцию H₂S (почернение среды).
   • Для определения индола добавить 3–4 капли реагента Ковакса. Появление красного кольца на границе раздела сред свидетельствует о положительной реакции.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,3 $\pm$ 0,2
• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до бежевого цвета
• Свойства геля: полужидкий, сопоставим с гелем 0,3 % агара
• Цвет и прозрачность готовой среды: янтарный, слегка опалесцирующий гель в виде столбика в пробирке
• Диапазон pH: 7,10–7,50

Дополнительные параметры

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать для предотвращения комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Ограничения: среда общего назначения и может не поддерживать рост привередливых (фастидиозных) микроорганизмов.

Меры предосторожности и утилизация

• При работе использовать защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности при работе с образцами и культурами.
• Утилизация: загрязненные материалы и использованные препараты должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с установленными лабораторными процедурами.