HiMedia M1778-500G Солевой лизиндекарбоксилазный бульон

Питательная микробиологическая среда HiMedia M1778-500G Солевой лизиндекарбоксилазный бульон — порошковая среда для выделения и идентификации Vibrio parahaemolyticus по признаку декарбоксилирования лизина. Среда применяется при анализе пищевых продуктов и кормов животного происхождения; положительная реакция проявляется пурпурной окраской и помутнением после инкубации при 35–37 °C в течение 24 ч.

Назначение

Солевой лизиндекарбоксилазный бульон предназначен для выделения и идентификации Vibrio parahaemolyticus на основании реакции декарбоксилирования лизина. Среда рекомендована ISO 8914:1990 для выделения и идентификации Vibrio parahaemolyticus из пищевых продуктов и кормов для животных.

Vibrio parahaemolyticus — галофильный эстуарный микроорганизм, который может выделяться из различных морепродуктов и морской среды. При выделении из свежих морепродуктов микроорганизм обычно присутствует в небольшом количестве и чувствителен к охлаждению и нагреванию.

Состав

Состав на 1 л:

pH после стерилизации при 25 °C: 6,80.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Дрожжевой экстракт обеспечивает азотистые соединения, факторы роста и другие необходимые питательные вещества для развития Vibrio parahaemolyticus. Высокое содержание хлорида натрия создаёт условия, облегчающие рост Vibrio parahaemolyticus.

На начальных этапах инкубации микроорганизмы ферментируют глюкозу с образованием кислоты, вследствие чего индикатор изменяет цвет на жёлтый. При дальнейшей инкубации, если L-лизин декарбоксилируется до кадаверина, возникает щелочная реакция, и цвет индикатора изменяется на пурпурный. Если цвет остаётся жёлтым, реакция декарбоксилазы считается отрицательной.

Дрожжевой экстракт обеспечивает необходимые питательные вещества для роста. Глюкоза является ферментируемым углеводом, а бромкрезоловый пурпурный — индикатором pH.

Положительная реакция после инкубации характеризуется пурпурной окраской и помутнением среды.

Методика приготовления и проведения анализа

1. Приготовьте суспензию из 39,01 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Разлейте среду в пробирки объёмом приблизительно 2 мл. Рекомендуемый размер пробирки — 9 × 180 мм.
4. Стерилизуйте среду автоклавированием при температуре 121 °C в течение 10 мин и давлении 15 фунтов (ориентировочно ≈0,10 МПа).
5. Внесите предполагаемую колонию из солевого питательного агара (M1776) непосредственно под поверхность солевого лизиндекарбоксилазного бульона.
6. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 24 ч.
7. Пурпурная окраска и помутнение среды после инкубации указывают на положительную реакцию.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или зеленовато-жёлтый однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В пробирке образуется прозрачный раствор пурпурного цвета.

Реакция

Реакция 3,9 % масс./об. водного раствора после стерилизации при 25 °C.

pH: 6,80.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч. Инокулированные пробирки покрывают стерильным минеральным маслом.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Модель/артикул: M1778-500G
• Назначение изделия: питательная среда
• Физическая форма: порошок
• Тип продукта: стандартный
• Происхождение компонентов: без компонентов животного происхождения, микробиологическое происхождение
• Упаковка: HDPE (полиэтилен высокой плотности)
• Масса: 500 г
• Температурный диапазон: 10–30 °C
• pH после стерилизации при 25 °C: 6,80
• Массовая концентрация среды для приготовления: 39,01 г/л
• Объём среды в пробирке: приблизительно 2 мл
• Рекомендуемый размер пробирки: 9 × 180 мм
• Режим стерилизации: автоклавирование при 121 °C в течение 10 мин
• Давление при стерилизации: 15 фунтов, ориентировочно ≈0,10 МПа
• Температура инкубации: 35–37 °C
• Время инкубации: 24 ч для проведения анализа; 18–24 ч для контроля культуральных характеристик

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: ниже 30 °C
• Условия хранения: в плотно закрытом контейнере
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Срок использования: до даты истечения срока годности, указанной на этикетке

Ограничения и особенности применения

Vibrio parahaemolyticus при выделении из свежих морепродуктов обычно содержится в небольшом количестве и чувствителен к охлаждению и нагреванию. При интерпретации результатов необходимо учитывать галофильную природу микроорганизма и использовать высокое содержание хлорида натрия, предусмотренное составом среды.